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标题 HPLC法测定小叶女贞果实中齐墩果酸的含量
范文

    郭向群 曹建民 张志琴 聂奇华

    [摘要]建立HPLC法测定小叶女贞果实中的齐墩果酸含量。测定齐墩果酸的色谱条件为:色谱柱 InertSustain C18(250mm×4.6mm, 5μm);以乙腈-甲醇-0.3%H3PO4水溶液(65:25:10)为流动相进行洗脱,流速为1.000 ml·min-1;检测波长为210 nm;柱温为 40℃。结果表明,齐墩果酸进样量在0.199~1.590μg 范围内(r = 0.9998)线性关系良好,平均回收率为99.15%(RSD% = 1.39,n = 6)。HPLC法操作简便快捷、稳定性好、重现性好,为小叶女贞果实作为药材的开发利用提供依据。

    [关键词]HPLC;小叶女贞果实;齐墩果酸;含量测定

    [中图分类号]R284.1 [文献标识码]A

    小叶女贞(Ligustrum quihoui Carr.)又名小叶冬青,为木犀科女贞属小灌木,全国各地均有分布。其根叶可入药用于外伤、烫伤等症的治疗,但该植物果实作为药物应用尚未发现相关记载。据文献报道小叶女贞中含β-谷甾醇、齐墩果酸等化合物;其提取物具有免疫调节、清除自由基等作用;女贞子中的齐墩果酸具有抗炎、抗病毒及降低转氨酶作用,已用于肝病治疗。本课题用HPLC法对小叶女贞果实中所含活性成分齐墩果酸进行了测定,为其作为药材的开发利用提供依据。

    1 仪器与试剂和药品

    1.1 仪器

    LC-20A色谱仪(日本岛津公司);MS105型分析天平(瑞士梅特勒-托得多仪器有限公司);SB-4200DT超声清洗器(西安超杰仪器设备有限公司);TG16-WS台式高速离心机(郑州宏朗仪器设备有限公司)。

    1.2 试剂和药品

    乙腈和甲醇(德国MERCK公司)为色谱纯,水为三重蒸馏水,其他均为分析纯试剂。对照品齐墩果酸(批号为110809-201004,中国食品药品检定研究院)。药材9批,于冬至前采收,经楚雄医专天然药物学教研室陆鸿奎副教授鉴定为小叶女贞果实。

    2 含量测定

    2.1 色谱条件

    色谱柱:InertSustain C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-甲醇-0.3%H3PO4水溶液;检测波长:210 nm;流速:1.000 mL·min-1;柱温:40 ℃;进样量10 μL;齐墩果酸的理论塔板数均大于 8000,分离度大于1.5(见图2)。

    2.2 对照品溶液

    取齐墩果酸对照品,精密称定,用甲醇制成每1 mL含齐墩果酸0.9940 mg溶液,用0.45 μm滤膜滤过,取续滤液即得。

    2.3 供试品溶液

    取药材粗粉1 g,精密称定,加入甲醇50 mL,超声30 min后,用甲醇补足减失质量,滤过,用0.45 μm滤膜滤过,取续滤液即得。

    2.4 线性考察

    精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10、12、16μL,按“2.1”项下条件分别进行测定,得齐墩果酸面积回归方程: y = 680048x + 83405,r = 0.9999。结果表明,齐墩果酸在该色谱条件的进样量在1.98~11.93 μg之间与峰面积有良好的线性关系。齐墩果酸标准曲线见图1。

    2.5 精密度

    取浓度为0.9940 mg·mL-1的同一份齐墩果酸对照品溶液10 μL,按“2.1”项下条件测定6次,测得其峰面积的RSD 为1.56%,表明所用仪器精密度良好。

    2.6 重复性

    称取同一批藥材粗粉6 份,每份1 g,精密称定,按“2.3”项下方法制备供试液,按“2.1”项下条件测得齐墩果酸质量分数的RSD 为1.02%,表明该方法重复性良好。

    2.7 稳定性

    取同一供试品溶液分别于配制后 0、2、4、8、12、20 h 进样10μL,测得齐墩果酸峰面积的RSD 为 0.92%,表明供试品溶液在20 h内稳定。

    2.8 加样回收率

    取已知含量药材粗粉6 份,每份0.5 g,精密称定,加齐墩果酸对照品适量,按“2.3”项下方法制备供试液后测得齐墩果酸平均回收率为 99.15 %,RSD为1.39 %(见表1)。

    2.9 样品测定

    精密称取药材粗粉1 g,按“2.3”项下方法制备供试液,测得齐墩果酸质量分数平均值为0.83%,RSD 为 1.73%。色谱图见图2,测定结果见表2。

    3 讨论

    HPLC条件考察了Inertsil ODS-SP和InertSustain C18等不同色谱柱,其中InertSustain C18(5μm, 250mm×4.6mm)柱分离效果好、柱效高,故选该柱进行含测。考察了甲醇-磷酸、乙腈-磷酸、乙腈-甲醇-磷酸,结果乙腈-甲醇-0.3%磷酸(65:25:10)分离效果较好,最终确定以该溶剂系统为洗脱剂。以二极管阵列检测器于 210 nm 波长处进行全波长扫描,基线噪声较低,色谱图信息较完全,特征峰响应面高,故选210 nm为测定波长。建立的方法能简捷、准确地测定药材中齐墩果酸的含量,该法测定比较稳定,且回收率和重现性均较好。

    从色谱图可以看出药材中除含齐墩果酸外,尚有很多未知色谱峰,有待进一步研究。

    [参考文献]

    [1] 宋志远.小叶女贞果实的化学成分及其活性研究[D].哈尔滨:哈尔滨工业大学, 2013.

    [2] 李晓蒙,蔡志蓬,李显奇.小叶女贞化学成分研究[J].广东药学院学报, 1998,14(2):93-94.

    [3] 洪新,杨肇享,周向东.小叶女贞提取物-M2自由基清除剂作用的实验研究[J]. 第三军医大学学报,1995,17(4):341-342.

    [4] 韩兆东,阮月芹,宋月雁,等.小叶女贞对免疫功能损伤小鼠T淋巴细胞免疫功能的调节作用[J].滨州医学院学报, 2008,31(4):258-261.

    [5] 张明发,沈雅琴.齐墩果酸和熊果酸保肝药理作用的研究进展[J].抗感染药学, 2012,9(1):13-19.

    [6] 戚志华,王四旺,王剑波,等.不同生长期女贞子中齐墩果酸和熊果酸的含量变化[J].中国中药杂志, 2007,32(15):1583-1585.

    [7] 彭婷婷,王卫华.高效液相色谱法测定女贞子中齐墩果酸的含量[J].医学理论与实践,2011,24(20):2503-2505.

    [8] 胡芳,赵智慧,刘孟军.HPLC法测定不同枣品种果实中白桦酯酸、齐墩果酸和熊果酸含量[J].中国农学通报,2011,27(5):434-438.

    [9] 蒋珍菊,王周玉.不同方法提取女贞子中齐墩果酸的含量[J].安徽农业科学, 2011,39(26):15979-15981.

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