他克莫司软膏联合308准分子光治疗寻常型白癜风及对外周血CD4+/CD8+、IL-17、IL-22的影响

    钱俐 缪亚军 余珊珊

    [摘要]目的：觀察他克莫司软膏联合308准分子光治疗寻常型白癜风的临床观察及对患者外周血中T细胞亚群及血清中IL-17、IL-22水平的影响。方法：选择2014年12月-2016年12月在南通市通州区人民医院检查的白癜风患者85例，根据随机数字法将患者分为对照组和治疗组，对照组采用308准分子光常规治疗，治疗组在308准分子光治疗基础上加用0.1%他克莫司软膏，比较各组患者治疗前后的临床症状及外周血中T细胞亚群及血清中IL-17、IL-22的水平。结果：治疗组总有效率为95.35%，显著高于对照组的80.95%，差异有统计学意义（P<0.05）。两组患者治疗后，外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+的水平均显著升高，差异有统计学意义（P0.05），CD4+/CD8+比较差异有统计学意义（P<0.05）。两组患者治疗后，血清中IL-17、IL-22的水平均显著下降，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后，治疗组血清中IL-17、IL-22的水平分别为（29.36±3.29）pg/ml、（20.37±2.61）pg/ml，均显著低于对照组的（33.54±4.21）pg/ml、（28.57±2.48）pg/ml，差异有统计学意义（P0.05）。结论：他克莫司软膏联合308准分子光治疗寻常型白癜风的疗效确切，可降低患者血清中IL-17、IL-22的水平，升高外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+的水平。

    [关键词]寻常型白癜风;他克莫司软膏;308准分子光;疗效;CD4+/CD8+;IL-17;IL-22

    [中图分类号]R758.4+1? ? [文献标志码]A? ? [文章编号]1008-6455（2021）01-0082-04

    Tacrolimus Ointment Combined with 308 Excimer Laser in the Treatment of Vitiligo Vulgaris and its Effect on Peripheral Blood CD4+/CD8+， IL-17， IL-22

    QIAN Li，MIAO Ya-jun，YU Shan-shan

    （Department of Dermatology，Nantong Tongzhou People's Hospital，Nantong 226300，Jiangsu，China）

    Abstract： Objective? To observe the effect of tacrolimus ointment combined with 308 excimer laser on vitiligo vulgaris and the peripheral blood T cell subsets， IL-17 and IL-22. Methods? 85 patients with vitiligo vulgaris diagnosed by Nantong Tongzhou District People's Hospital from December 2014 to December 2016 were slected. The patients were divided into the control group and the treatment group randomly. The control group was treated with 308 excimer laser routine treatment， and the treatment group was treated with 0.1% tacrolimus ointment and 308 excimer laser therapy. The levels of T-cell subsets， IL-17 and IL-22 in serum were determined. Results? The total effective rate was 95.35% in the treatment group， which was significantly higher than that in the control group（80.95%）， the difference was statistically significant（P<0.05）. The levels of CD3+， CD4+， CD4+/CD8+ in serum in two groups were significantly increased after treatment （P0.05）， and there was a significant difference in the levels of CD4+/CD8+ （P<0.05）. After treatment， the level of IL-17 and IL-22 of the treatment group were （29.36±3.29）pg/ml and （20.37±2.61）pg/ml， which were significantly lower than those of the control group [（33.54±4.21）pg/ml and （28.57±2.48）pg/ml， P0.05）. Conclusion? Tacrolimus ointment combined with 308 excimer laser treatment of vitiligo vulgaris was effective， it can reduced the serum levels of IL-17 and IL-22 and increase the blood levels of CD3+， CD4+， CD4+/CD8+.

    Key words： vitiligo vulgaris; tacrolimus ointment; 308 excimer laser; CD4+/CD8+; IL-17; IL-22

    白癜风是由皮肤黑素细胞功能失调引起的皮肤色素脱失病，为临床皮肤科常见疾病，具有治疗难、病程长、病情易反复等特点[1]。其发病部位可遍布全身，给患者的容颜带来巨大改变，导致患者产生心理障碍和精神负担，最终严重影响患者正常生活[2]。目前，该病在临床上主要治疗方法为联合治疗，如手术与308准分子光联合、药物与308准分子光联合治疗等[3-4]。有研究显示[5]，他克莫司软膏联合308准分子光治疗白癜风可取得较好的效果。本研究将进一步采用他克莫司软膏联合308准分子光对寻常型白癜风的疗效进行评估，并对其作用机制进行深入研究。

    1? 资料和方法

    1.1 一般资料：选择2014年12月-2016年12月就诊于南通市通州区人民医院的白癜风患者85例，经过皮肤科临床医师确诊为寻常型白癜风[6]。各患者破损皮肤没有复色迹象，无先天免疫性疾病，近1个月未使用相关药物治疗，排除孕期及哺乳期女性，排除其他皮肤病患者，所有纳入标准的患者均签订知情同意书。根据随机数字法，将85例患者分为对照组和治疗组，对照组42例，男20例，女22例，年龄18～49岁，病程0.4～13年;治疗组43例，男20例，女23例，年龄19～47岁，病程0.5～14年，两组患者的临床资料如表1所示。两组患者性别、年龄、病程、发病部位、疾病分期等一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有临床可比性。

    1.2 治疗方法：对照组患者采用308nm准分子紫外光皮肤治疗仪（HONKON+-308XH，北京）治疗[7]，设置波长为308nm。治疗前按仪器上的MED操作模式，对患者的腹部皮肤进行照射以测定MED值。根据疾病部位及MED选择治疗的初始剂量，每3d治疗1次，治疗周期为3个月。治疗组患者以上治疗结束后，局部外用0.1%他克莫司软膏[5]，2次/d，治疗3个月。

    1.3 炎症指标检查：治疗前后分别抽取各组患者的静脉血4ml于5ml无抗凝剂的试管中，静置2h后，放置于离心机中，3 000rpm离心10min，吸取上清液，采用酶联免疫检测法，根据IL-17、IL-22试剂盒（试剂盒由南京建成生物有限公司）说明书中的实验操作，分别测定血清中IL-17、IL-22的浓度。用流式细胞术检测外周血中CD3+、CD4+、CD8+ T淋巴细胞的水平。

    1.4 疗效判定：疗效判定标准分为痊愈、显效、好转及无效[8]。皮肤上所有白斑均消退，破损皮肤恢复正常肤色则判定为痊愈;部分白斑消退或缩小，且50%以上皮损恢复正常肤色则判定为显效;部分白斑消退或缩小，且10%～49%的皮损恢复正常肤色则判定为好转;白斑无色素再生或白班面积扩大则判定为无效。有效率=（痊愈+显效+好转）例数/总例数×100%;显效率=（痊愈+显效）例数/总例数×100%。

    1.5 统计学分析：数据采用SPSS 19.0软件进行统计学分析，计量资料以均值±标准差（x?±s）表示，多組间比较采用One-way ANOVA检验中的Dunnett-t检验;计数资料采用百分比（%）表示，采用χ2检验;P<0.05为差异有统计学意义。

    2? 结果

    2.1 两组临床疗效比较：如表2所示，对照组显效率为66.67%，总有效率为80.95%;治疗组显效率为86.05%，总有效率为95.35%，两组显效率及总有效率比较差异具有统计学意义（P<0.05）。

    2.2 两组患者外周血T细胞亚群水平的比较：治疗前，两组患者外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+的水平比较差异无统计学意义（P>0.05）;治疗后，治疗组患者外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+的水平分别为（69.37±3.58）%、（38.93±2.11）%、1.56±0.16，对照组外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+的水平分别为（67.24±3.92）%、（37.42±2.17）%、1.41±0.18，均显著高于治疗前，差异均有统计学意义（P0.05）;CD4+/CD8+的水平高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。

    2.3 两组血清中IL-17、IL-22水平比较：在治疗前，两组患者血清中IL-17、IL-22水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后，治疗组患者血清中IL-17、IL-22的水平分别为（29.36±3.29）pg/ml、（20.37±2.61）pg/ml，对照组患者血清中为（33.54±4.21）pg/ml、（28.57±2.48）pg/ml，均显著低于治疗前，差异有统计学意义（P<0.05）。且治疗组各指标水平均显著低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表4。

    2.4 两组不良反应情况比较：两组患者在治疗过程中，均有部分患者局部皮肤出现瘙痒、水疱、灼烧感、红斑等不良反应，两组不良反应发生率比较差异无统计学意义（P>0.05）。且经过相应处理后，各不良反应均消退。见表5。

    3? 讨论

    白癜风是由皮肤黑素细胞功能失调引起的皮肤色素脱失病，其发病机制复杂多样，主要包括遗传学因素、自身免疫功能异常、炎症反应、精神因素、微量元素缺乏等[9-10]。其中，免疫功能失调机制在黑素细胞功能失调中起着重要的作用，而T淋巴细胞是机体关键的免疫细胞，参与皮肤免疫应答中。T淋巴细胞在机体内的总数由CD3+的值来反映，其亚型众多，与临床疾病相关的主要包括CD4+及CD8+细胞亚群等。CD4+为免疫辅助性T细胞，可以促进机体的免疫功能，而CD8+则为免疫抑制细胞，可抑制CD4+的作用，因此，CD4+与CD8+则能反映机体内环境的免疫平衡。有研究发现[11]，白癜风患者体内T细胞亚群的水平存在明显失调，表现为CD4+/CD8+值的降低。他克莫司是一种外用钙调磷酸酶抑制剂可维持黑色素细胞的活性，抑制病情的发生，常用于白癜风的治疗。而308准分子光属于中波紫外线，可以诱导白癜风皮损处的皮肤组织中浸润性T淋巴细胞的凋亡[12]。另外，308准分子光对白癜风患者的一些骨隆起部位及肢体末端的治疗受到限制。因此，本研究采用他克莫司联合308nm准分子光对寻常型白癜风进行治疗，结果发现他克莫司联合308准分子光能有效治疗寻常型白癜风，其总有效率可达95.35%，显著高于308准分子光单独治疗的有效率（80.95%），且观察组患者的皮肤颜色与对照组相比更接近于正常肤色，该结果与文献中报道的结果相一致[5]，可能由于308准分子光是一种中波紫外线，分子量小且穿透力强，能有效刺激角质形成细胞的增殖，促进黑素细胞的增生和分化，形成黑素并转移至皮损部位，最终脱落[13]。另外，他克莫司联合308准分子光治疗可以显著升高患者外周血中CD4+/CD8+的比值及CD3+的水平，可能由于他克莫司与308准分子光的联合使用使白癜风患者的病情活动性发生变化，由进展期转为稳定期，而稳定期患者的T细胞亚群水平接近正常值[14-15]。

    机体免疫功能发生异常时，便会引发一系列的炎症反应。细胞因子IL-17及IL-22则是由CD4+ T细胞亚群分泌而来。IL-17与IL-1β的作用相似，可以诱导炎症因子的释放，导致机体皮肤组织发生炎性损伤[16]。IL-22可以激活细胞内信号传导通路，刺激皮肤组织中角质细胞的增殖与迁移。研究显示[17-18]，白癜风患者血清中IL-17与IL-22的水平与健康者相比明显升高。本研究结果表明，他克莫司联合308nm准分子光治疗可以显著降低患者血清中IL-17与IL-22的水平，且效果强于308准分子光单独治疗。

    综上所述，他克莫司软膏联合激光治疗寻常型白癜风的疗效确切，可降低患者血清中IL-17、IL-22的水平，升高外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+的水平，提高寻常型白癜风的治疗有效率。

    [参考文献]

    [1]葛善珍，卢涛.白癜风693例临床特征分析[J].中国美容医学，2015，24（3）：37-40.

    [2]苗青，张艺杰，贾名妍，等.白癜风患者生活质量调查[J].中国美容医学，2015，24（4）：39-42.

    [3]廖家，郭晓瑞，蔡小健，等.自体表皮移植术联合他克莫司软膏治疗白癜风22例临床观察[J].中国皮肤性病学杂志，2016，30（3）：325-327.

    [4]林静，张万鹏，董秀芹.匹多莫德分散片联合308nm准分子激光治疗白癜风疗效观察与分析[J].中国美容医学，2016，25（2）：58-59.

    [5]尚智伟，冯海瑕，崔利莎，等.他克莫司联合308nm准分子激光治疗白癜风的效果及作用机制[J].山东医药，2016，56（21）：90-91.

    [6]张江安，于建斌.白癜风的鉴别诊断[J].中华皮肤科杂志，2014，47（1）：72-74.

    [7]雷厉，黄进华，曾庆海，等.308nm准分子激光治疗207例稳定期白癜风的疗效及影响因素[J].中南大学学报（医学版），2016，41（9）：979-983.

    [8]中国中西医结合学会皮肤性病专业委员会色素病学组.黄褐斑和白癜风的诊疗标准（2010年版）[J].中华皮肤科杂志，2010，43（6）：373.

    [9]Strassner JP，Harris JE.Understanding mechanisms of autoimmunity through translational research in vitiligo[J].Curr Opin Immunol，2016，43：81-88.

    [10]Zuo RC，Naik HB，Steinberg SM，et al.Risk factors and characterization of vitiligo and alopecia areata in patients with chronic graft-vs-host disease[J].JAMA Dermatol，2015，151（1）：23.

    [11]李楊，周明伟，孙铭徽，等.进展期白癜风患者外周血淋巴细胞亚群75例检测分析简[J].中国实验诊断学，2016，20（10）：1731-1732.

    [12]杨慧兰，黄小晏.308nm准分子激光诱导T淋巴细胞凋亡的研究[J].临床皮肤科杂志，2008，37（10）：639-641.

    [13]杨超，刘刚，龙卓宏，等.308nm准分子光治疗白癜风疗效与安全性观察[J].实用医院临床杂志，2011，8（1）：68-70.

    [14]Hann SK，Park YK，Chung KY，et al.Peripheral blood lymphocyte imbalance in Koreans with active vitiligo[J].Int J Dermatol，1993，32（4）：286-289.

    [15]张继玲，曹碧兰，袁伟等.白癜风患者皮损中CD4+，CD8+T淋巴细胞及朗格汉斯细胞的检测[J].中国皮肤性病学杂志，2008，22（11）：649-651.

    [16]Singh RK，Lee KM，Vujkovic-Cvijin I，et al.The role of IL-17 in vitiligo： A review[J].Autoimmun Rev，2016，15（4）：397-404.

    [17]Esmaeili B，Rezaee SA，Layegh P，et al.Expression of IL-17 and COX2 gene in peripheral blood leukocytes of vitiligo patients[J].Iran J Allergy Asthm Immunol，2011，10（2）：81-89.

    [18]Elela MA，Hegazy RA，Fawzy MM，et al.Interleukin 17， interleukin 22 and FoxP3 expression in tissue and serum of non-segmental vitiligo： a case- controlled study on eighty-four patients[J].Eur J Dermatol Ejd，2013，23（3）：350.

    [收稿日期]2017-09-27

    本文引用格式：钱俐，缪亚军，余珊珊.他克莫司软膏联合308准分子光治疗寻常型白癜风及对外周血CD4+/CD8+、IL-17、IL-22的影响[J].中国美容医学，2021，30（1）：82-85.