鸡肾型传染性支气管炎的防控
韩庆彬+刘诗柱+石瑞峰
摘要：近年来禽流感的肆虐发生，让养鸡场对禽流感高度重视，甚至谈禽流感色变，而对于肾型传染性支气管炎往往重视不够，在疫苗选择、防疫程序、免疫操作等方面均存在很多问题。进入2014年冬季以后，商丘市连续发生多起鸡肾型传染性支气管炎病例，死亡率达10%，生产性能也受到影响。对鸡肾型传染性支气管炎的病原、流行特點、临床症状、病理变化、诊断及防控措施进行了介绍，提出养鸡场必须提高对肾型传染性支气管炎的关注程度，科学选择、使用疫苗，来控制肾型传染性支气管炎的发生。
关键词：鸡肾型传染性支气管炎；病原；流行特点；病理变化；诊断；防控
中图分类号：S858.31 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2017）07-0023-03
鸡传染性支气管炎（IB）是一种由传染性支气管炎病毒（IBV）引起的鸡的急性、高度传染性疫病。而肾型传染性支气管炎是鸡传染性支气管炎的一种临床表现形式。1962年Winterfild等在美国发现了致肾病变型传染性支气管炎病毒，并将其命名为Holte株，该型的代表毒株有Hotle株、Gray株、CV56株、Wolgemuth株等，其中Gray株是缓和型毒株。澳大利亚学者Cumming在澳大利亚分离出N1/62（T株），该病毒被认为是嗜肾型传染性支气管炎的强毒代表株，能引起鸡只死亡和严重肾病变。1972年我国禽病专家辛朝安教授首次报道我国有传染性支气管炎的存在，其他省份也陆续报道了该病的存在，但当时发生的主要是呼吸型。传染性支气管炎具有高度的传染性，且病原存在多个血清型和多个临床型，甚至临床型和血清型之间没有直接的关系，从而造成疫苗免疫控制比较困难。到了20世纪90年代之后肾型传染性支气管炎在我国大陆大面积暴发和流行，主要发生在集约化生产的肉鸡群，其引起的雏鸡死亡率高达30%；产蛋鸡和种鸡表现为产蛋量和蛋质量下降，并可对雏鸡和育成鸡的输卵管造成永久性伤害，从而影响后期产蛋性能的发挥。
1 病原
鸡传染性支气管炎病毒（Infections bronchitis virus，IBV）属于冠状病毒科冠状病毒属的第三群，有囊膜，单股正链RNA病毒，病毒粒子呈球形或多边形，直径为80～120 nm。囊膜表面有均匀的长约20 nm冠状纤突，状如皇冠，其纤突不如副黏病毒的棒状纤突排列紧密。传染性支气管炎病毒粒子含有纤突蛋白（S）、膜糖蛋白（M）、核衣壳蛋白（N）和小膜蛋白（E），S蛋白由S1和S2两种糖蛋白组成。血凝抑制HI抗体和大部分病毒中和抗体由S1诱导产生，具有免疫保护作用。IBV对宿主细胞的吸附作用与S糖蛋白有关。重组IBV的实验结果表明S蛋白是决定病毒宿主细胞范围的一个重要因子。传染性支气管炎病毒在细胞质的基质内复制，通过不连续的转录，产生5条亚基因组mRNA，其中2、4和6分别编码蛋白S、M和N，而3和5分别编码3种和2种蛋白。遗传实验表明这四种非结构蛋白不是病毒复制必须的，但是有助于病毒的复制。在37 ℃下，感染后3～4 h细胞胞浆内开始出现新病毒粒子，而12 h后细胞内的病毒量达最大。IBV在56 ℃ 15 min和45 ℃ 90 min可灭活大部分IBV。在-20 ℃条件下保存IBV是不合适的。感染性组织在50%甘油中保存良好，并且不需冷冻即可直接送往实验室进行诊断或研究。有人报道，春季IBV可在户外存活12 d，冬季为56 d。冻干的感染性尿囊液真空密封的条件下，可在冰箱中保存30年。IBV对乙醚敏感，50%氯仿室温下作用10 min，0.1%去氧胆酸钠4 ℃作用18 h能使病毒完全失去感染性。病毒对常见消毒剂敏感，1%来苏儿溶液，1%福尔马林溶液，2%氢氧化钠溶液及70%乙醇3～5 min即可将其灭活。传染性支气管炎病毒能在10～11日龄的鸡胚中生长，用自然毒初次接种鸡胚，多数鸡胚存活，但随续代次数的增加，对鸡胚的毒力增加，到第10代时，可在接种后的第9天引起80%的鸡胚死亡。胚体的特征性变化是发育受阻，胚体卷成球形，脚变形压在头部，羊膜增厚，紧贴胚体，卵黄囊缩小，尿囊液增多，肾脏尿酸盐沉淀。传染性支气管炎病毒也能在15～18日龄的鸡胚肾细胞（CEK），鸡肾细胞（CK）和鸡胚肝细胞（CEL）上生长，经多次传代（6～10代）后，可引起较明显的细胞病变，表现为胞浆融合，形成合胞体及细胞死亡。
用于IBV鉴别和分类的方法很多。近年来发展起来的基因型分类是基于S蛋白的特征的分类方法。目前已发现的基因型和血清型已有数十种，以后还会有新的发现。血清型的确定可通过传统的VN（中和试验）和HI（血凝抑制），也有人采用单克隆抗体法，但这些方法都有较大的局限性。现在越来越多的实验室通过反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）获取IBV基因的DNA片段，然后再通过做限制性内切酶分析或测序。基因型与血清型并不完全相符，比如属于同一血清型毒株如果S蛋白的同源性不低于90%，则可认定为同一基因型；但有些毒株属于一个基因型但可能不属于一个血清型。国内外已报道的IBV有26种以上血清型。实验表明随着S1基因序列差异增大，毒株间的交叉保护程度将减弱。同一血清型的毒株也有可能基因序列差异。同时有证据表明在混合感染的情况下，IBV可能发生基因重组，很容易出现新的血清型或基因型。主要的血清型为M41型及C型，其他为变异型，包括肾型、呼吸型和腺胃型等。肾病变型是引起感染鸡死亡率最高的病型。
2 流行特点
该病的主要传播方式是病鸡从呼吸道中排出病毒，经空气飞沫传染给易感鸡。此外，可通过被污染的饲料，饮水，用具等传播，也可经消化道感染。一年四季均可发病，营养不足、密度过高、舍温过低、气候突变、寒冷、通风不良或应激等可诱发该病。秋冬季节，鸡IB发病率较高。各日龄的鸡均可发病，该病的发病表现与日龄关系密切。但以雏鸡危害最为严重，蛋鸡在15日龄以前感染该病会造成输卵管终生损伤，产蛋鸡成年后形成假母鸡，输卵管囊肿，鸡终身不产蛋。公鸡发病率往往高于母鸡，肉仔鸡发病率高于产蛋鸡，这可能与鸡只生长速度和饲料中的蛋白质含量有关，饲料中蛋白质含量愈高，鸡生长速度愈快，鸡群死亡率就愈高。有资料表明，雏鸡10～30日龄发生各型IB后对蛋鸡性成熟期输卵管发育会造成无可逆转损害，在90日龄左右开始出现输卵管囊肿或不发育。因此，在蛋雏鸡或种鸡育雏期，尤其是冬季必须做好免疫接种。
3 临床症状
肾型传染性支气管炎的发病日龄多集中在2～8周龄，该病典型的症状呈二相性，第一阶段有短期（约1～4 d）的轻微呼吸道症状，包括啰音、喷嚏、咳嗽等[1]，但只有在夜间才较明显。如无混合感染导致的明显症状，常常容易被忽视。随后又有几天症状消失的“康复”阶段：第二阶段开始排灰白色稀粪，后躯及泄殖腔周围常被粪便污染，病鸡食欲减退，渴欲增加，精神不振，羽毛粗乱，脱水，全身衰竭[2]。病程12～20 d，死亡率高达15%～40%：产蛋鸡感染后也会引起产蛋量下降，产异常蛋和死胚率增加，但死亡不多。
4 病理变化及诊断
病鸡鸡爪干瘪，鼻腔有黏液，喉头，气管及支气管黏膜水肿增厚，可见轻度出血，有的气管1/3处有黏液堵塞[3]。脱水严重，肌肉发绀，皮肤与肌肉不易分离。肾脏高度肿胀，苍白，肾小管和输尿管变粗，内充满白色尿酸盐，俗称“花斑肾”[4]。严重者在心包、肝脏、肠浆膜面表面有白色霜样物沉淀。泄殖腔内充满白色石灰样稀粪：病程较长者继发大肠杆菌和支原体感染，形成心包炎、气囊炎、肝周炎等败血症变化。
根据该病的流行特点，临床症状和病理剖检变化，可作出初步诊断。确诊需要借助于病毒学、血清学和分子生物学等一系列实验室检测法。
5 免疫防制
5.1 疫苗的选择
由于传染性支气管炎病毒血清型复杂且相互之间交叉保护力弱，而且新的血清型和变异株不断出现，临床上在某一地区对肾型传染性支气管炎保护力很好的疫苗，对另一地区的肾型传染性支气管炎可能没有保护作用。如果盲目地引进外地的肾型传染性支气管炎疫苗，有可能对本地肾型传染性支气管炎有保护作用，也有可能完全得不到保护，反而给当地增添了新的毒株。所以用疫苗前必须掌握当地疾病流行的病毒血清型，使用与当地流行毒株抗原性一致的疫苗品系，这样才能达到有效的免疫预防目的。目前使用的疫苗主要有：H120株、H52株、Ma5株、M41、28/86株、4/91株等。其中H120株、H52株、Ma5株、M41株均属于马萨诸塞型毒株。H120、H52是我国引进的荷兰株，对我国流行的多种血清型传染性支气管炎病毒有较好的免疫效果，并对一些肾型病变株有一定的交叉免疫，故成为我国使用最广的两个毒株。H120株疫苗毒力很弱，相当安全，可以用于1日龄以上育雏鸡和产蛋鸡。H52株毒力较强，在生产实践中一般不用于雏鸡和产蛋鸡，主要用于60～120日龄鸡复免用。Ma5毒力相当于或低于H120株，既可以用于雏鸡也可用于产蛋鸡。M41毒力较强，因和许多国家和地区分离出来的毒株属同一血清型，所以M41被广泛地应用。28/86株是于1986年在意大利的波溪谷暴发肾型传染性支气管炎鸡场的28号鸡舍分离出的一株肾型毒株，因而命名为28/86株。该毒株被认为是致肾病变毒力最强的毒株之一，经过SPF鸡胚的传代，达到满意的毒力致弱程度，但仍保留了很好的免疫原性。通过一系列的鸡群回归实验，证明28/86株致弱后稳定，毒力不会反强，对免疫动物有很好的免疫原性和高度的安全性，能有效抵御肾型传染性支气管炎强毒的攻击。此毒株毒力低，可用于任何日龄的鸡，对肾型病变保护率较高，毒力稳定。4/91株对预防鸡发生深层肌肉病变、输卵管病变、产蛋率下降、呼吸道症状、顽固性腹泻的变异性传染性支气管炎有较好的预防效果。
5.2 免疫程序的制定
制定免疫程序时应全面考虑该病在当地的流行状况、饲养管理条件、疫苗毒株的特点、鸡群母源抗体水平等因素，以确定适当的免疫时间，以期发挥疫苗最大的保护作用。由于该病对机体的损害主要在幼龄阶段，且母源抗体不能阻止感染，只能减轻疾病的症状，所以雏鸡免疫接种尤为重要。
首免日龄取决于雏鸡母源抗体水平及免疫方法以及当地发病情况。在肾型传染性支气管炎高发区，笔者建议将首免日期提前到1日龄，尽早产生主动免疫，增加传染性支气管炎的免疫次数，使鸡群得到更多的保护：种鸡或蛋鸡1日龄和10日龄必须接种M41、4/91+Ma5进行有效预防；蛋鸡群开产前使用灭活疫苗加强免疫，开产后每隔6～8周用H120饮水或喷雾免疫，以防止由于产蛋期感染传染性支气管炎造成的产蛋下降、蛋壳质量问题和输卵管囊肿[5]。
5.3 疫苗使用注意事项
活疫苗免疫最好采用滴鼻或点眼免疫的方法，这样有利于局部抗体的产生。免疫操作时要注意，传染性支气管炎病毒在水中衰减快，疫苗稀释后必须在30 min内滴完：由于传染性支气管炎病毒在水中迅速上浮，造成不均匀，使用时必须随时摇动。使用单苗或新支二联活疫苗免疫时，不要将两种疫苗混合在一起进行免疫接种，因为如果传染性支气管炎病毒过量会干扰新城疫的免疫应答。如果采用单苗进行免疫，为了避免干扰作用一般应该在免疫新城疫后间隔1～2周或者采用新城疫和鸡传染性支气管炎二联活苗（新支二联）。新支二联活疫苗按照科学合理的配比进行生产，能够有效地消除两种病毒之间的干扰。
另外，加强饲养管理，做好生物安全工作，注重消毒工作，严格的卫生消毒措施，完善的生物安全体系是预防该病的关键。鸡场要全进全出，平时做好带鸡消毒工作，减少环境中野毒的数量。平时要加强饲养管理，注意保持鸡舍内适宜温度、湿度，合理通风，提高鸡群体质，增强鸡群抗病能力。
参考文献：
[1] 尹震东.免疫不当而诱发鸡的传染性支气管炎[J].醫学动物防制，2007，23（10）：795.
[2] 李淑艳，桂红艳.传染性支气管炎的诊断与防治[J].畜牧兽医科技信息，2007（5）：70-71.
[3] 刘 锋.鸡群暴发传染性支气管炎的诊治[J].现代农业科技，2006（6）：47.
[4] 李艳霞.鸡肾型传染性支气管炎诊断与治疗[J].中国畜禽种业， 2015（12）：143-144.
[5] 刘玉山，马秀丽，孔凡翠，等.产蛋鸡新型传染性支气管炎的防制[J].湖北畜牧兽医，2005（3）：35-36.
