聚维酮碘对褶皱臂尾轮虫消毒的浓度

    杨旭 蔡忠璐 刘霞 陈明康 李远眉

    

    

    摘 要：为研究聚维酮碘在褶皱臂尾轮虫培育中消毒时的最适添加量，采用不同浓度聚维酮碘对褶皱臂尾轮虫Brachionus plicatilis进行消毒试验，研究了聚维酮碘对于轮虫生长和繁殖的影响。结果表明：在聚维酮碘（药品浓度）1 mg/L的情况下，对褶皱臂尾轮虫的存活、种群增长、繁殖、带卵率影响不大，即与对照组无显著性差异 （P>0.05）。

    关键词：褶皱臂尾轮虫（Brachionus plicatilis）；聚维酮碘；消毒

    轮虫广泛分布于湖泊、池塘、江河、近海等各类淡、咸水水体中，其繁殖力强，环境适应性和抗逆性强，生活周期短，可高密度大量培养，并且营养丰富，含有大量优质蛋白质、游离氨基酸、维生素、矿物质，尤其是不饱和脂肪酸，是鱼类等水生生物育苗中常用的开口饵料[1]。现阶段轮虫养殖模式中，采用的大多为室外土池培育。在培养过程中通常会使用动物的粪便等有机肥来进行氮、磷、钾等元素的补充，这些肥料会将大量有害病菌带入培育水体，从而影响到养殖生物的健康。

    聚维酮碘 （Polyvinilpyrrolidone iodine，povidoneiodine，简称 PVP-I）为碘伏类杀菌剂，它是聚乙烯吡咯烷酮（PVP）与碘的复合物[2]，是一种强力杀菌消毒剂，对病毒、细菌、真菌及霉菌孢子都有较强的杀灭作用，具有高效、低毒、无残留、刺激性小，作用持久的特点，且使用安全、简便，其作用原理是在其水溶液中，碘以低毒性的碘离子存在，离子碘从溶液中游离变成分子碘缓慢释出，氧化细菌、真菌以及病毒的蛋白使其变性。分子态的碘毒性大，离子态的碘毒性甚微。目前已应用于沙蚕[3]、石斑鱼[4]、南美白对虾苗[5-6]、暗纹东方鲀稚鱼[7]等水产动物养殖中，在水产养殖动物活饵料应用上[8]也有报道。

    本试验研究聚维酮碘在褶皱臂尾轮虫培育中消毒时的最适添加量，旨在为聚维酮碘对褶皱臂尾轮虫消毒时的安全性提供科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    褶皱臂尾轮虫（Brachionus plicatilis）来自江苏盐城土池培育的群体，暂养于试验室10 m3水泥池中，以蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidesa）藻膏为饵料，将藻膏采用300目筛绢搓洗均匀后泼洒使用。试验所选用的轮虫均为活力较好的群体。培养轮虫的溶液由过滤的海水和曝气自来水配制而成。

    聚维酮碘购自上海神华科技发展有限公司，有效碘含量9.0%～12.0%。为保证聚维酮碘的有效浓度，聚维酮碘试液均为每次使用前配制。下文叙述中的药品浓度皆为药品本身的浓度。

    1.2 方法

    1.2.1 轮虫的培育方法 试验于大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点试验室进行，首先进行了聚维酮碘对于褶皱臂尾轮虫的耐受性试验。根据预试验结果，设置浓度分别为1、2.5、5 mg/L 3个浓度组，另设1个空白对照组。采用消毒后的塑料桶为试验容器，水体体积为5 L，调节水体温度为22 ℃，盐度为20‰。通过水浴加热的方式控制轮虫水环境温度，每个试验塑料桶中都放有充气石，保证轮虫的需氧量。初期投放的褶皱臂尾轮虫浓度为80个/mL，每组试验设3个平行组。每天采用固定的投喂量，采用小球藻进行投喂，每桶投喂15 mL藻液，以保证其正常生长繁殖所需要的营养，避免因为营养不足造成试验差异。在放入前观察轮虫的生长状态、带卵情况，确定轮虫处于单性繁殖期，使试验更加具有科学性严谨性。在轮虫放入塑料桶后，在1、2、4、6、8、10 d分别对试验组进行种群数量计数，观察轮虫种群的增长情况。在轮虫放入塑料桶时，放入后1、5 d分别观察轮虫个体的带卵情况。

    1.2.2 药品使用方法 本试验采取药物的试剂现配现用，首先配制出浓度为500 mg/L的母液，向塑料桶中分别加入母液10、25、50 mL，使水体聚維酮碘浓度为1、2.5、5 mg/L 。采取一次性添加的方法，在各试验组开始时只添加一次药物。

    1.3 数据统计

    试验数据用平均数±标准差表示，用SPSS21.0软件进行单因素方差分析，并用Tukey HSDa法进行多重比较，显著性水平设为0.05。

    2 结果

    2.1 聚维酮碘对褶皱臂尾轮虫种群生长的影响

    试验过程中，不同的聚维酮碘的浓度组对褶皱臂尾轮虫的种群数量增长影响见表1。在试验开始后的前2天，各组轮虫数量均呈指数级增长，但在第6天时，各种密度开始出现差异，但之后各组数量趋于稳定。到第10天时，对照组密度最高，为475.7个/mL，1 mg/L浓度组与之接近，为474.0个/mL，其他两组与对照组相比差异显著，分别为344.7、274.3个/mL。

    2.2 聚维酮碘对褶皱臂尾轮虫带卵的影响

    不同浓度的聚维酮碘对褶皱臂尾轮虫的带卵数量的影响见表2。试验开始时轮虫带卵率为15.4%。从表2可知，试验开始后1天，各浓度组中的轮虫带卵数量都有所增加，但带卵比率最高的是对照组，为24.23%，其他浓度组带卵率分别为22.67%、20.00%、19.33%。到第5天时，带卵率明显出现了差异，除 1 mg/L浓度组外，其它浓度组显著低于对照组。带卵比率最高的是对照组，为33.0%，1 mg/L的浓度组的轮虫带卵率为31.33%，两者基本一致。而浓度为2.5 mg/L浓度组带卵率为17.67%，浓度5 mg/L浓度组带卵率仅剩下7.33%。

    3 讨论

    3.1 聚维酮碘对褶皱臂尾轮虫种群增长的影响

    轮虫是水域环境中常见的一种浮游动物，其个体小、繁殖力强、营养丰富，在水产养殖中作为鱼类等育苗的活饵料被广泛应用。当聚维酮碘浓度达到0.5～1 mg/L即有杀菌的效果。刘青等[9]研究表明浓度为 0.2 mg/L（该浓度为有效碘浓度）以上的聚维酮碘对褶皱臂尾轮虫的寿命、繁殖和种群增长有显著影响，而与对照组相比，0.1 mg/L的聚维酮碘对褶皱臂尾轮虫的存活、产前发育时间影响不大。与本实验结果相符，水体中1 mg/L的聚维酮碘，不会影响到褶皱臂尾轮虫的种群生长。

    3.2 聚维酮碘对于褶皱臂尾轮虫带卵率的影响

    轮虫的带卵率是反应轮虫生活状态、生活环境的一个很重要的参考指标。在实验第1天，各浓度组带卵率与对照组无显著性差异。具体来说，1 mg/L组的带卵率和对照组无显著性差异，说明用此浓度聚维酮碘对轮虫进行消毒处理，后期对该轮虫的带卵率影响不大，不会影响到褶皱臂尾轮虫正常的繁殖。但两个高浓度组已经与对照组产生了显著性差异。浓度为2.5 mg/L浓度组在试验过程中，出现了数量波动，带卵率先增加后减少。高浓度5 mg/L浓度组，在试验过程中，前期还很正常，但第5天带卵率就已经有了大幅度的减少，仅剩下7.3%，说明聚维酮碘高浓度作用于褶皱臂尾轮虫，使其带卵数量减少，影响到正常的生长繁殖。

    3.3 聚维酮碘水产养殖中的应用

    聚维酮碘现已成为水产养殖中常用的消毒剂。研究表明，各种水产动物对于聚维酮碘的耐受性差异较大，已研究出的安全浓度表明，南美白对虾无节幼体为0.65 mg/L[5]、暗纹东方鲀稚鱼为32.97 mg/L[7]、双齿围沙蚕为89.1 mg/L[3]。相比较而言，轮虫对聚维酮碘是敏感的，除了南美白对虾无节幼体小于轮虫外，其他两物种远远大于轮虫的使用浓度。林克冰等[4]对石斑鱼受精卵进行处理，聚维酮碘5～10 mg/L浸泡卵20 min。吴岗等[8]认为采用聚维酮碘500 mg/L浸泡卤虫卵30 min，可以达到杀菌效果。从本实验看来，该浓度对于卤虫当时影响不大，但实验未涉及其后期的生长繁殖情况，无法说明是否影响其繁殖等生命活動。

    本实验表明，褶皱臂尾轮虫对聚维酮碘是敏感的，刘青等[9]的结论与本实验结果相符。在生产消毒中，保持1 mg/L的浓度是安全的，既能杀灭病菌，也不会对褶皱臂尾轮虫的生长、繁殖带来影响。

    参考文献：

    [1]

    陈菊芳，周洁，黄祥飞.萼花臂尾轮虫休眠卵萌发的研究[J].应用生态学报，1998，9（1）：67-70.

    [2] 何宝时.影响聚维酮碘溶液稳定性的因素及对策[J].医学信息，2010，23（7）：2460-2461.

    [3] 赖祖鹏，冯善聪，梁伍气，等.几种常用消毒剂对双齿围沙蚕的急性毒性试验[J].水产科学，2014，33（3）：147-151.

    [4] 林克冰，方琼珊，吴建绍，等.石斑鱼神经坏死病毒传播途径阻断的初步研究[J].福建水产，2011（5）：15-19.

    [5] 何新华，陈雪洋，潘娟.聚维酮碘对南美白对虾虾苗的毒性试验[J].河北渔业，2015（10）：27-30.

    [6] 张萍，乔振国.PVP-碘对南美白对虾无节幼体的急性毒性试验[J].海洋渔业，2002（2）：68-69.

    [7] 孙侦龙，朱永祥，陈芸燕，等.3种水产消毒剂对暗纹东方鲀稚鱼的急性毒性试验[J].水产科学，2015，34（5）：277-281.

    [8] 吴岗，王海青，郭秀玲，等.一种新型聚维酮碘制剂对卤虫卵及无节幼体的活体消毒试验[J].水产科技情报，2017，44（4）：205-209.

    [9] 刘青，崔延超，李双宇，等.聚维酮碘对褶皱臂尾轮虫的毒性效应.大连海洋大学学报 2015（2）：149-154.