对非梗阻性无精症实施AMH检测的临床应用价值评估

    段丽 许巧凤

    【关键字】非梗阻性无精症;AMH检测;临床;评估一、研究对象

    某医院在获得患者知情同意后,收集了三组不同男性的精浆样本作为本次研究对象即:正常生育组、梗阻性无精症组和非梗性无精症组。依据世界卫生组织标准,每组选取20例,年龄均在35岁左右。二、仪器与试剂

    采用的检测仪器是由美国进口的酶标仪和洗板机以及全自动化学发光免疫分析仪。还有国产的计算机辅助精子分析系统。测定血清促卵泡激素和睾酮的试剂均来自美国西门子诊断的产品。测定精浆或者血清的试剂由美国正规公司提供。计算机辅助精子的分析系统由北京某公司提供。三、检测方法

    1.检测样本的采集。(1)血样采集。将参与本次研究对象空腹时,最好在上午8点至10点之间为宜,在研究对象的前臂浅静脉处抽取5毫升的血样,将其离心后进行血清分离,必须在8小时内检测出研究对象的血清促卵泡激素睾酮的浓度。(2)精液的采集。参与本次研究对象均在采集精液前一周停止性生活,利用手淫方法将精液采集于无菌容器中,将其放置在水温为37摄氏度的水浴箱中孵育。参与研究对象在射精1小时内取部分精液样本,将其进行5min的离心处理,精浆分别利用密封管进行分装,并冷冻于冰箱中,但温度必须控制在负80摄氏度左右,在一个月的保存期限内测定抗缪勒管激素水平。(3)采集睾丸组织。对研究对象进行局部麻醉的情况下,利用常规检测方法完成睾丸活检术及获取睾丸精子。

    2.检测方法。等到精液完全液化后,严格按照世界卫生组织规定的检测标准对精液做标准的分析。血清促卵泡激素与睾酮浓度检测的最低限度为:0.101U/L,0.14IU/L。具体检测范围为:0.1~170U/L、0.20~15.86nmoI/L。AMH检测水平选择双抗体酶联免疫吸附进行双份的重复测定。检测的最低限度为3.20pmoI/L,测定范围规定在3.20~1072pmoI/L。

    3.关于研究对象睾丸体积的测量。运用B超方法进行测量,具体数据以公式为准,睾丸的体积=睾丸的前后直径×左右直径×上下直径×0.71。

    4.研究对象的睾丸精子获取术及对患者睾丸的病理学检查。在对患者实施局部麻醉后,睾丸获取术应与患者睾丸的活检同步进行。选取患者睾丸较大的一侧,利用常规切除法,将其切至露出白膜,并避开白膜下面的血管,在患者睾丸的中部将白膜用手术刀切开0.5~1.0厘米并将其进行分离,大约两50毫克左右的睾丸组织,将其中的一半放置于3毫升的培养液中进行培养。将剩余的一半送去病理科做活检,用浸泡液固定睾丸活检组织,并包埋于石蜡中,将其切片并运用苏木精曙红进行染色,从而找寻生成精子的证据。

    5.检测报告。三个研究小组中各项检测指标显示,非梗阻性无精症患者组中睾丸体积的测量与AMH的检测值明显很低。而血清促卵泡激素的浓度反而明显增高。其中睾酮浓度与其他两组相比较不存在明显差异。四、临床检测与评估

    本次研究充分利用睾丸获取术来证实精子的成功恢复,通过对各种样本的采集,包括血样采集、精液的采集及睾丸组织的采集。进行分析研究,发现研究对象的精液用AMH检测在睾丸获取术是否成功的判断价值方面要远远高于血清促卵泡激素、睾酮浓度及测量患者睾丸体积大小的各项指标,和其他检测指标相比,在正确判断睾丸精子获取术是否成功方面来讲,具体较高的准确性,并且阳性预测值及阳性依然比也很高。通过三组研究对象的实验表明,将血清促卵泡激素和睾酮浓度运用在检测和判断睾丸获取术是否成功方面的应用价值很一般,相对于测量患者睾丸体积上无论从诊断还是准确性方面,应用价值都比较差,很难准确的判断患者睾丸精子获取术是否取得成功。

    通过对三组研究对象的实验证明,要想检测睾丸起源的高水平AMH,必须在男性保持生育正常的状况下方可检测到准确数据。当人进入青春期以后,AMH会优先从人体睾丸支持细胞的最顶端逐步向周围曲细精管腔内分泌。这种现象可能与人进入青春期后,睾丸开始发挥作用有密切的关联。在生精上皮特定的周期阶段很有可能会使精浆内AMH的分泌物增强。然而,在此次研究中,精浆AMH检测浓底的明显下降与患者生精功能发生障碍有直接的关系。这也同时预示着患者PLMH分泌程度与精子的成功生成有一定的关联。但我们绝对不可能将最初AMH分泌浓度的逐渐降低有可能反映出睾丸支持细胞的改变排除在外,这样一来,很有可能导致患者睾丸的生精速度停滞。AMH检测是对非梗阻性无精症患者造成持续性减少精子生成的一种特殊的非侵入性的标志物。在绝大多数的情况下,一些男性睾丸功能不全或者不育症患者中了解的人比较少。无精子症有可能是梗阻性的,也有可能是属于分泌性的。分泌性的无精子症患者只能产生部分精子产物,也有可能缺乏完全正常产生精子的产物,这种情况,一般与睾酮浓度的不断降低和血清促卵泡激素的浓度升高有直接的原因。通过对患者睾丸的活检可以清楚的显示出精子生成的不正常或者是完全缺乏精子生成的状况。目前,国内还没有行之有效的治疗方案。然而,临床上最近出现了一种进展较快的治疗手段是,在患者卵胞浆内实施单精子注射术。这样一来,即便是无精症患者,也可通过对患者附睪进行穿刺手术或者对睾丸进行活检使无精患者产生充足的精子,在显微镜下使单精子注射术或者睾丸注射术顺利的进行并取得良好的进展。小结

    总上所述,临床上运用AMH检测非硬阻性无精症者,能够快速准确的判断患者实施的睾丸获取术成功与否,所以,在临床应用中具有一定的应用价值。

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