天灸对哮喘患者血清可溶性IL2受体及T淋巴细胞亚群的影响
赖新生 李月梅 张家维
(广州中医药大学针灸推拿学院,广东510407;广州中医药大学第一附属医院针灸科)摘要采用双抗体夹心法(ELISA)和抗体致敏的红细胞花环(直接法)对121例患者可溶性白细胞介素2受体(SIL2R)和T淋巴细胞亚群进行了观察。结果显示:哮喘患者的血中SIL2R显著高于正常对照组(P<0.01),其中,CD4及CD4/CD8亦显著高于正常组(P<0.05);经天灸治疗后,其SIL2R显著下降(P<0.05),CD4及CD4/CD8亦显著降低(P<0.05);SIL2R的变化同CD4+T淋巴细胞有显著相关性(r=0.614,P<0.05),提示:天灸通过调节T淋巴细胞的活化而影响着哮喘的病理。
主题词穴位贴敷法哮喘/血液受体,白细胞介素2/针灸效应T淋巴细胞亚群/针灸效应
天灸疗法是穴位敷贴疗法的一种,因其据《内经》"春夏养阳"原则,特取每年初、中、末伏第1天进行治疗,故名。临床上天灸具有疗效好、副作用小、经济安全的特点,对于哮喘病的防治具有独特的作用。本文通过检测T淋巴亚群及SIL2R(可溶性白细胞介素2受体)的变化,旨在提示T淋巴细胞在哮喘发病中的作用,并阐明天灸治哮平喘的免疫学机理。
1材料与方法
1.1病例选择(1)121例哮喘患者来自广州中医药大学第一附属医院针灸科门诊,诊断均符合1992年中华医学会制订的《支气管哮喘的定义、诊断、严重度分级及疗效判断标准》(修正方案)[1]。其中男58例,女63例;年龄6～76岁,平均34岁;病程最短1年,最长12年,平均7.5年。(2)正常对照组30例,来自本院及健康自愿者,男15例,女15例;年龄平均30岁。
1.2方法(1)药物组成:麻黄、细辛、甘遂、延胡、白芥子(生);各药按比例研成粉末,用时以生姜老汁调成糊状,切成1cm×1cm的等大方饼状,并撒以麝香适量。(2)穴位选择:发作期选肺俞、风门、定喘;缓解期选肺俞、膏肓、肾俞。(3)时间:夏季的初、中、末伏的第1天各贴1次,每次据病人耐受程度贴3～7小时。
1.3检测(1)血清SIL2R的检测:采用双抗体夹心法间接(ELISA)法(试剂盒购自白求恩医科大学基础医学院免疫教研室),操作按说明书。具体步骤包括包被、封闭、加样、加多抗、加酶标抗体、显色、绘制标准曲线并计算样品含量。(2)T淋巴细胞亚群CD4、CD8淋巴细胞表面标志的检测:采用抗体致敏的红细胞花环法(直接法,试剂购自武汉生物制品研究所),按说明书操作。
2结果
2.1治疗前外周血CD4亚群百分数与正常对照组比较121例哮喘患者CD4均高于正常人(P<0.01),二者差异显著,且其CD4/CD8亦高于正常组(P<0.05),其CD8亚群百分数有下降趋势,但无统计学意义(P>0.05),结果还发现,哮喘患者血清SIL2R显著高于健康对照组,(P<0.05)(表1)。
2.2治疗前后哮喘患者的SIL2R及T淋巴细胞亚群比较ヌ炀闹瘟坪,患者体内SIL2R、CD4(%)及CD4/CD8明显降低(P<0.05),SIL2R亦较治前显著降低(P<0.05),而CD8(%)变化不显(表2)。
2.3相关分析シ⑾盅清SIL2R与CD4T淋巴细胞呈显著正相关,相关系数玶=0.614(P<0.01)。提示:SIL2R可能与CD4T淋巴细胞具有一定内在关系。
3讨论ピ谥气管哮喘的发病过程中,T细胞活化有肯定的作用[2,3],研究[4]表明,过敏性哮喘患者外周血IL2R和活化T淋巴细胞较正常人明显增高;现代认为[5],T淋巴细胞的异常活化是IgE产生的重要原因。IgE的产生受T抑制细胞(CD8)的调节,二者有一恒定比值,一方发生改变,造成二者比值异常,从而使对IgE的调节功能紊乱,导致IgE过量产生。本实验结果表明哮喘组CD4及CD4/CD8比值显著上升(P<0.01,P<0.05),与文献报道相符;而CD8虽有下降趋势,但不显著(P>0.05),考虑可能与哮喘的不同分型及阶段性病程有关,有待今后进一步纳入更多病例深入研究。另已知IL2R是活化淋巴细胞膜IL2Rα链(P55)链成分通过某种酶的作用进入循环的,它是淋巴细胞活化的标志[6]。它能以低亲和力结合IL2R,从而参与免疫调节。结果还显示:哮喘患者血清SIL2R水平明显升高(P<0.01),且与CD4T淋巴细胞百分比增高呈显著正相关。提示:哮喘患者CD4+T淋巴细胞被激活,活化的T细胞mIL2R表达增强,分泌释放IL2R增加,故血中IL2R水平升高[7]。ハ喘的治疗,目前国内外首选消除非特异炎症的糖皮质激素,但由于副作用大,成瘾性强及易反复发作等缺点的存在,使其有效应用受到一定限制。而天灸治哮平喘则是在传统中医针灸理论指导下发挥其独特疗效的。祖国医学认为咳喘多属阳虚,冬季寒邪袭肺容易引起疾病复发,据《内经》"春夏养阳"的原则,故行"天灸"以"冬病夏治";又且夏季三伏之令,人体腠理疏松,气血畅通,易于药物渗透吸收。方选辛温宣肺的麻黄、细辛以宣通肺卫,定喘止咳;延胡、甘遂破血逐瘀;更加白芥子之温阳行气,化痰宽中;并辅以麝香辛香开窍走窜,促进药力,共奏奇效。此治则在一定意义上受近代中医痰瘀互结的哮喘病机所指导。又哮喘病位在肺,治喘不离于肺,但又不止于肺,据中医"急治其标,缓治其本"的原则,发作期选肺俞、定喘、风门,缓解期增用肾俞、膏肓以固本,标本兼顾。一方面刺激穴位,疏通经络,另一方面特定药物在特定穴位上被吸收,发挥了持久的药理作用。故天灸治疗哮喘在临床上疗效卓著[8]。本实验结果显示,天灸后哮喘患者血清SIL2R显著下降(P<0.05);CD4及CD4/CD8比值亦随之下降(P<0.05),说明天灸可以改善患者体内T淋巴细胞的异常活化,调节失衡的T淋巴细胞亚群百分数,在一定程度上抑制了IgE的亢进性生成,这与早已证实的中药针灸具有调节人体免疫机能作用的观点相吻合。ビ捎谌颂迕庖呋能的改变也有一定的时间进程,穴位贴敷在取得即时疗效的基础上,应重点观察其防治复发的疗效。故临床观察时间还有待延长,如可连续观察3年,并进行远期疗效追踪,同步检测患者体内各项相关性好、灵敏度高、特异性较强的指标的变化,这将对中医防治哮喘具有重要的指导意义,这方面的工作有待今后进一步深入进行。
4参考文献
1支气管哮喘的定义、诊断、严重度分级及疗效判断标准(修正方案).中华结核和呼吸杂志,1993;16(哮喘增刊):5
2Frigas E,et al.Allergy Clin Immunol,1986;77:527
3Walker C,et al.Am respir Dis,1991;143(Part)2A:802
4闫春连.支气管哮喘与可溶性白介素2受体.国外医学·呼吸系统分册,1995;15(3):529
5Kay AB.淋巴细胞与哮喘.国外医学·呼吸系统分册,1992;12(1):35
6Rubin LA,Kurman C C,Fritz ME.J Immunol,1985;135:3172
7Greene WC, et al.Anm Inter Med,1986;105:560～572(4)
8闫怀士,李京培,等.穴位敷贴治疗哮喘病的临床疗效研究.中国针灸,1995;(4):4
(收稿日期:19990211,赵昕发稿)
(广州中医药大学针灸推拿学院,广东510407;广州中医药大学第一附属医院针灸科)摘要采用双抗体夹心法(ELISA)和抗体致敏的红细胞花环(直接法)对121例患者可溶性白细胞介素2受体(SIL2R)和T淋巴细胞亚群进行了观察。结果显示:哮喘患者的血中SIL2R显著高于正常对照组(P<0.01),其中,CD4及CD4/CD8亦显著高于正常组(P<0.05);经天灸治疗后,其SIL2R显著下降(P<0.05),CD4及CD4/CD8亦显著降低(P<0.05);SIL2R的变化同CD4+T淋巴细胞有显著相关性(r=0.614,P<0.05),提示:天灸通过调节T淋巴细胞的活化而影响着哮喘的病理。
主题词穴位贴敷法哮喘/血液受体,白细胞介素2/针灸效应T淋巴细胞亚群/针灸效应
天灸疗法是穴位敷贴疗法的一种,因其据《内经》"春夏养阳"原则,特取每年初、中、末伏第1天进行治疗,故名。临床上天灸具有疗效好、副作用小、经济安全的特点,对于哮喘病的防治具有独特的作用。本文通过检测T淋巴亚群及SIL2R(可溶性白细胞介素2受体)的变化,旨在提示T淋巴细胞在哮喘发病中的作用,并阐明天灸治哮平喘的免疫学机理。
1材料与方法
1.1病例选择(1)121例哮喘患者来自广州中医药大学第一附属医院针灸科门诊,诊断均符合1992年中华医学会制订的《支气管哮喘的定义、诊断、严重度分级及疗效判断标准》(修正方案)[1]。其中男58例,女63例;年龄6～76岁,平均34岁;病程最短1年,最长12年,平均7.5年。(2)正常对照组30例,来自本院及健康自愿者,男15例,女15例;年龄平均30岁。
1.2方法(1)药物组成:麻黄、细辛、甘遂、延胡、白芥子(生);各药按比例研成粉末,用时以生姜老汁调成糊状,切成1cm×1cm的等大方饼状,并撒以麝香适量。(2)穴位选择:发作期选肺俞、风门、定喘;缓解期选肺俞、膏肓、肾俞。(3)时间:夏季的初、中、末伏的第1天各贴1次,每次据病人耐受程度贴3～7小时。
1.3检测(1)血清SIL2R的检测:采用双抗体夹心法间接(ELISA)法(试剂盒购自白求恩医科大学基础医学院免疫教研室),操作按说明书。具体步骤包括包被、封闭、加样、加多抗、加酶标抗体、显色、绘制标准曲线并计算样品含量。(2)T淋巴细胞亚群CD4、CD8淋巴细胞表面标志的检测:采用抗体致敏的红细胞花环法(直接法,试剂购自武汉生物制品研究所),按说明书操作。
2结果
2.1治疗前外周血CD4亚群百分数与正常对照组比较121例哮喘患者CD4均高于正常人(P<0.01),二者差异显著,且其CD4/CD8亦高于正常组(P<0.05),其CD8亚群百分数有下降趋势,但无统计学意义(P>0.05),结果还发现,哮喘患者血清SIL2R显著高于健康对照组,(P<0.05)(表1)。
2.2治疗前后哮喘患者的SIL2R及T淋巴细胞亚群比较ヌ炀闹瘟坪,患者体内SIL2R、CD4(%)及CD4/CD8明显降低(P<0.05),SIL2R亦较治前显著降低(P<0.05),而CD8(%)变化不显(表2)。2.3相关分析シ⑾盅清SIL2R与CD4T淋巴细胞呈显著正相关,相关系数玶=0.614(P<0.01)。提示:SIL2R可能与CD4T淋巴细胞具有一定内在关系。
3讨论ピ谥气管哮喘的发病过程中,T细胞活化有肯定的作用[2,3],研究[4]表明,过敏性哮喘患者外周血IL2R和活化T淋巴细胞较正常人明显增高;现代认为[5],T淋巴细胞的异常活化是IgE产生的重要原因。IgE的产生受T抑制细胞(CD8)的调节,二者有一恒定比值,一方发生改变,造成二者比值异常,从而使对IgE的调节功能紊乱,导致IgE过量产生。本实验结果表明哮喘组CD4及CD4/CD8比值显著上升(P<0.01,P<0.05),与文献报道相符;而CD8虽有下降趋势,但不显著(P>0.05),考虑可能与哮喘的不同分型及阶段性病程有关,有待今后进一步纳入更多病例深入研究。另已知IL2R是活化淋巴细胞膜IL2Rα链(P55)链成分通过某种酶的作用进入循环的,它是淋巴细胞活化的标志[6]。它能以低亲和力结合IL2R,从而参与免疫调节。结果还显示:哮喘患者血清SIL2R水平明显升高(P<0.01),且与CD4T淋巴细胞百分比增高呈显著正相关。提示:哮喘患者CD4+T淋巴细胞被激活,活化的T细胞mIL2R表达增强,分泌释放IL2R增加,故血中IL2R水平升高[7]。ハ喘的治疗,目前国内外首选消除非特异炎症的糖皮质激素,但由于副作用大,成瘾性强及易反复发作等缺点的存在,使其有效应用受到一定限制。而天灸治哮平喘则是在传统中医针灸理论指导下发挥其独特疗效的。祖国医学认为咳喘多属阳虚,冬季寒邪袭肺容易引起疾病复发,据《内经》"春夏养阳"的原则,故行"天灸"以"冬病夏治";又且夏季三伏之令,人体腠理疏松,气血畅通,易于药物渗透吸收。方选辛温宣肺的麻黄、细辛以宣通肺卫,定喘止咳;延胡、甘遂破血逐瘀;更加白芥子之温阳行气,化痰宽中;并辅以麝香辛香开窍走窜,促进药力,共奏奇效。此治则在一定意义上受近代中医痰瘀互结的哮喘病机所指导。又哮喘病位在肺,治喘不离于肺,但又不止于肺,据中医"急治其标,缓治其本"的原则,发作期选肺俞、定喘、风门,缓解期增用肾俞、膏肓以固本,标本兼顾。一方面刺激穴位,疏通经络,另一方面特定药物在特定穴位上被吸收,发挥了持久的药理作用。故天灸治疗哮喘在临床上疗效卓著[8]。本实验结果显示,天灸后哮喘患者血清SIL2R显著下降(P<0.05);CD4及CD4/CD8比值亦随之下降(P<0.05),说明天灸可以改善患者体内T淋巴细胞的异常活化,调节失衡的T淋巴细胞亚群百分数,在一定程度上抑制了IgE的亢进性生成,这与早已证实的中药针灸具有调节人体免疫机能作用的观点相吻合。ビ捎谌颂迕庖呋能的改变也有一定的时间进程,穴位贴敷在取得即时疗效的基础上,应重点观察其防治复发的疗效。故临床观察时间还有待延长,如可连续观察3年,并进行远期疗效追踪,同步检测患者体内各项相关性好、灵敏度高、特异性较强的指标的变化,这将对中医防治哮喘具有重要的指导意义,这方面的工作有待今后进一步深入进行。
4参考文献
1支气管哮喘的定义、诊断、严重度分级及疗效判断标准(修正方案).中华结核和呼吸杂志,1993;16(哮喘增刊):5
2Frigas E,et al.Allergy Clin Immunol,1986;77:527
3Walker C,et al.Am respir Dis,1991;143(Part)2A:802
4闫春连.支气管哮喘与可溶性白介素2受体.国外医学·呼吸系统分册,1995;15(3):529
5Kay AB.淋巴细胞与哮喘.国外医学·呼吸系统分册,1992;12(1):35
6Rubin LA,Kurman C C,Fritz ME.J Immunol,1985;135:3172
7Greene WC, et al.Anm Inter Med,1986;105:560～572(4)
8闫怀士,李京培,等.穴位敷贴治疗哮喘病的临床疗效研究.中国针灸,1995;(4):4
(收稿日期:19990211,赵昕发稿)
