西藏牦牛病毒性腹泻血清抗体检测
程少龙+王刚+益西措姆+罗润波+周洪波+贡嘎+李家奎+索朗斯珠
摘要：为了解牛病毒性腹泻在西藏牦牛群中的血清抗体分布情况， 2014-2016年期间先后从西藏不同地区采集牦牛血清920份，采用ELISA法进行血清抗体检测。结果表明，西藏牦牛病毒性腹泻血清抗体阳性率平均达到48.70%，其中林芝市为84.24%，那曲地区61.41%，山南地区48.91%，拉萨市44.02%，阿里地区23.91%，日喀则市21.74%，昌都地区13.04%，说明西藏各地区牦牛群中牛病毒性腹泻病的血清抗体阳性现象均有分布，应引起重视。
关键词：牦牛；病毒性腹泻；血清抗体
中图分类号：S858.23 文献标识码：A 文章编号：1007-273X（2017）05-0005-02
牛病毒性腹泻病（BVD）是由牛病毒性腹泻病毒（BVDV）引起的牛的一种传染病，主要表现为急性黏膜病、腹泻、免疫抑制、持续性感染与免疫耐受等，BVDV与羊边界病病毒、猪瘟病毒同属于黄病毒科瘟病毒属[1，2]。该病毒在世界范围内广泛传播，主要危害牛、羊等反刍动物[3，4]。病牛和带毒牛是该病主要的传染源，病毒随粪便排出后，可以经过消化道和呼吸道传染给健康牛。该病主要症状是消化道黏膜糜烂、溃疡、脱落，病畜出现腹泻，母畜出现流产、死胎等症状[5]，给养牛业带来很大的危害。
牛病毒性腹瀉的流行给世界各国的畜牧业造成了严重的经济损失，每年死于该病的牛不少于500万头，由其持续感染造成的经济损失也严重阻碍了畜牧业的发展。随着中国牦牛、肉牛和奶牛养殖业的发展，牛病毒性腹泻作为一个对全球养牛业危害较大的传染病应引起重视。牦牛作为西藏畜牧业主打产业，是西藏农牧民衣食住行的主要来源，了解与掌握牛病毒性腹泻在牦牛群中的感染情况和动态监测十分必要。本研究团队在2014-2016年对先后从拉萨、林芝、日喀则、山南、那曲、昌都、阿里等地区采集的牦牛血清920份，采用ELISA法检测牛病毒性腹泻在牦牛血清中的抗体情况，以期了解牛病毒性腹泻在西藏牦牛群中的感染情况，为该病的防控提供参考[6，7]。
1 材料和方法
1.1 血清
牦牛血清920份，2014-2016年期间先后从西藏拉萨、林芝、日喀则、山南、那曲、昌都、阿里等地采集。
1.2 检测试剂
牛病毒性腹泻抗体酶联免疫分析试剂盒（江苏菲亚生物科技有限公司，批号：201609）。
1.3 实验仪器
恒温培养箱（上海三发科学仪器有限公司，型号为GNP-9050）、离心机、自动酶标仪（深圳雷杜生命科技有限公司，型号为Rayto RT-6100）、超纯水（Millpore公司，型号为ELIX10）、振荡机等。
1.4 试验方法
按照试剂盒说明书进行。
2 结果与分析
由表1可见，西藏各地区牦牛病毒性腹泻血清抗体阳性率平均达到48.70%，其中林芝市阳性率为84.24%、那曲地区61.41%、山南地区48.91%、拉萨市44.02%、阿里地区23.91%、日喀则市21.74%、昌都地区13.04%。
3 讨论
（1）根据血清抗体检测结果显示，西藏牦牛病毒性腹泻血清抗体阳性率平均达到48.70%，其中林芝市阳性率为84.24%、那曲地区61.41%、山南地区48.91%、拉萨市44.02%、阿里地区23.91%、日喀则市21.74%、昌都地区13.04%，从全区检测情况看，不同地区存在一定的差异，在养殖密度大的林芝市阳性率较高，而在养殖密度低的昌都、日喀则、阿里等地区阳性率普遍偏低。
（2）郑志刚等[8]1980-1990年10年间进行牛的血清学调查，结果发现全国牛病毒性腹泻黏膜病的平均感染率为19.15%，其中牦牛平均感染率为27%。我国高原牛群中牛病毒性腹泻黏膜病流行情况如下：2010-2012年，有学者对青海省散养牛和规模化养殖牛进行了BVDV的抗体检测，共检测了842份血清，结果显示平均阳性率为21.14%[9]。另有学者对青海省5个县进行了BVDV抗体检测，共检测了492份血清，平均阳性率为49.59%，数据同时显示了牦牛的阳性率较黄牛高[10]。本次检测西藏牦牛病毒性腹泻血清抗体阳性率平均达到48.70%，且西藏各地区牦牛群中均有病毒性腹泻黏膜病的血清抗体阳性情况，应引起重视。
（3）牛病毒性腹泻黏膜病感染率高的原因分析。首先，牛病毒性腹泻黏膜病病毒基因分为BVDV-1和BVDV-2两个基因型，其亚型众多，到2014年，BVDV-1可分为18个基因亚型[11]；而根据2016年最新报道，BVDV-1型可分为21个亚型[12-14]。由此可见病毒的突变和进化速度较快[15]。各亚型之间独立差异较大，并且存在着遗传和抗原性的异质性。其次PI牛是BVDV在流行病学上一个重要的流行特点，PI牛的体液、精液以及分泌物中都带有BVDV，并且不断地向外界环境排毒。第三，BVDV易感动物较多，例如牛、鹿、绵羊、猪、双峰骆驼等均能够感染BVDV，这些感染动物成为BVDV的储存宿主或者新的传染源。另外，牛病毒性腹泻血清抗体阳性率高的原因是因为牛被野毒感染还是因为使用了其他具有交叉免疫的疫苗而产生了相应的抗体，有待于进一步调查与研究。
（4）牛病毒性腹泻黏膜病是危害养牛业重要的疫病，目前牛发生牛病毒性腹泻黏膜病无特效药，该病因地理、生态环境、机体内环境（如易感性、免疫力等）、气候和季节因素的变化而产生变异，引起疾病的临床症状和致病机理较为复杂[16，17]。目前控制该病的方法主要是加强饲养管理和疫苗免疫，一旦发现牛感染该病应该立即隔离，对病死牛应做好消毒处理，防止病原扩散。
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