《苍耳子油脂质体的制备工艺研究》-理学论文，中医中药论文-论文范文参考-科学狗论文网

标题

苍耳子油脂质体的制备工艺研究

范文

王红娟王芳王亚桃

摘要目的：为了得到苍耳子油脂质体的最佳制备工艺。方法：以卵磷脂和胆固醇为膜材，采用薄膜分散水化法制备脂质体，利用游离药物与含药脂质体的重量差异通过超速离心法分离，并计算其包封率。根据单因素实验得对其包封率有显著影响的因素，以正交试验设计筛选出制备脂质体的最佳制备方法。结果：通过正交试验得到最优方法为：卵磷脂：胆固醇3∶1、苍耳子油：卵磷脂1∶7、水化溶液体积20 mL，此条件下测得其包封率为68.0%。结论：该方法所得脂质体包封率达60%以上，比较稳定。

关键词苍耳子油;脂质体;包封率;正交试验

Study on Preparation Technology of Xanthii Fructus Oil Liposomes

WANG Hongjuan，WANG Fang，WANG Yatao

（Gansu Medical College，Pingliang 744000，China）

Abstract Objective：In order to obtain the optimal preparation process of Xanthii Fructus oil liposomes.Methods：Lecithin and cholesterol was used as membrane materials，liposomes were prepared by a thin film dispersion hydration method.The weight difference between free drugs and drug-containing liposomes was used to separate them by ultracentrifugation，and their encapsulation rates were calculated.According to the single factor experiment，the factors that have a significant effect on its encapsulation efficiency were obtained.The best method for preparing liposomes was screened by orthogonal test design.Results：The optimal method obtained through orthogonal test was：lecithin：cholesterol 3∶1，Xanthii Fructus oil：lecithin 1∶7，and the volume of the hydration solution was 20 mL.Under this condition，the encapsulation rate was 68.0%.Conclusion：The encapsulation rate of liposomes obtained by this method is more than 60%，which is relatively stable.

Keywords Xanthii Fructus Oil; Liposome; Encapsulation efficiency; Orthogonal test

中图分类号：R283文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.02.007

苍耳子为菊科植物苍耳（Xanthium sibiricum Patr.et Widd.）干燥成熟带总苞的果实，其中油脂是苍耳子的主要成分，油脂中主要含有酚酸类成分，如绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C等[1]。现代药理研究表明苍耳子具有抗菌、抗病毒、抗炎、镇痛、降血糖、抗过敏等作用且对鼻炎具有很好的疗效[2-4]。脂质体是一种具有类似生物膜的双分子层结构的超微球形载体制剂，它主要用于药物的制备，即利用脂质体溶于细胞膜的性质，将药物送入细胞内部，保护定向至某治疗的靶器官或组织中[5-7]，因此脂质体作为鼻腔给药的一种新型剂型其具有以下优点：将药物包封入脂质体后鼻腔给药，不仅能有效地减少药物对鼻腔的刺激性和毒性，增加药物疗效，并可使药物通过磷脂双分子层幻世控制释放，克服以往气雾剂吸收快及必须频繁给药的缺陷[8-9]。本研究主要选用薄膜分散水化法，以卵磷脂和胆固醇为膜材对苍耳子油进行包合，采用超速离心法测定其包封率。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器双光束紫外分光光度计（上海光谱仪器有限公司，型号：SP-1920），电子分析天平（上海越平科学仪器有限公司，型号：FA2004B），pH酸度计（北京赛多利斯仪器系统有限公司，型号：PB-10），超声波清洗机（天津雯特赛恩斯仪器有限公司，型号：AS系列），循环水式多用真空泵[陕西太康生物科技有限公司，型号：SHB-A（Ш）]，旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂，型号：RE-52），数码恒温磁力搅拌器（常州国华电器有限公司，型号：HJ-3），台式高速冷冻离心机（长沙湘仪离心机器仪器有限公司，型号：H-1605R），紫外可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司，型号：SP-756P）。

1.2 试剂甲醇（分析纯，天津市大茂化学试剂厂，批号：20180808），乙醚（分析纯，天津津东天正精细化学试剂厂，批号：20170326），卵磷脂（中国华东师范大学化工厂，批号：20180425），胆固醇（分析纯，天津市大茂化学試剂厂，批号：20170909），磷酸氢二钠（分析纯，天津市百世化工有限公司，批号：20170404），磷酸二氢钠（分析纯，天津市百世化工有限公司，批号：20180717），氢氧化钠（分析纯，天津市天力化学试剂有限公司，批号：20171208），氯化钠（分析纯，天津市百世化工有限公司，批号：20171121），苍耳子（甘肃省平凉市庄浪县洛怡药业有限责任公司，批号：20181225）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件采用紫外可见分光度法，在200～400 nm波长范围内扫描，结果显示苍耳子油在206 nm、328 nm处有最大吸收，空白脂质体在230 nm处有最大吸收，选择空白脂质体无干扰的波长，即测定波长选择在328 nm处。

2.2 对照品溶液的制备称取苍耳子油0.5 g于50 mL的容量瓶中加入适量甲醇超声溶解并定容至刻度作为对照品溶液，分别吸取0.2 mL对照品溶液和空白脂质体到10 mL容量瓶中用甲醇定容至刻度。

2.3 供试品溶液的制备精密称取卵磷脂300 mg，胆固醇100 mg，苍耳子油43 mg于250 mL圆底烧瓶中，精密量取乙醚12 mL，超声使其完全溶解，旋转减压蒸发除去有机溶剂，形成均匀的类脂薄膜，再加入温度为40 ℃、pH=6.5磷酸盐缓冲溶液20 mL，并在40 ℃水浴下旋转水化至瓶壁上的脂质体薄膜完全被洗脱下来，转入30 mL锥形瓶中，置于磁力搅拌器上40 ℃搅拌水化1 h，得淡黄色苍耳子油脂质体混悬液，将脂质体过0.45 μm的微孔滤膜3次，即得苍耳子油脂质体溶液。在328 nm处测吸光度并根据标准曲线求出C总[10-13]。即包封率：EE%=（C总-C游）÷C总×100%。

2.4 线性关系考察分别精密量取2.1项下的对照品溶液0.2 mL、0.4 mL、0.8 mL、1.6 mL、3.2 mL、6.4 mL至10 mL的容量瓶中加甲醇至刻度并摇匀，在328 nm的波长下测量吸光度[14]。以苍耳子油质量浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，做标准曲线得到线性回归方程：y=0.116 8x+0.058 6，r2=0.998 9。结果显示配制的对照品溶液在0.2～6.4 g/L范围内有良好的线性关系，所得标准曲线。见图1。

2.5 单因素实验

2.5.1 膜材比设定卵磷脂与胆固醇的比例分别为2∶1、3∶1、4∶1、5∶1，按2.3项下方法制备脂质体，按2.4项下方法测其包封率，并计算。其结果显示当膜材比为3∶1时所得包封率最大。见图2。

2.5.2 药脂比设定苍耳子油与卵磷脂比例为1∶3、1∶5、1∶7、1∶9，按2.3项下方法制备脂质体，按2.4项下方法测其包封率，并计算。其结果显示当药脂比为1∶5时所得包封率最大。见图3。

2.5.3 磷酸缓冲液的体积分别设定pH=6.5磷酸盐缓冲溶液为10 mL、15 mL、20 mL、25 mL，按2.3项下方法制备脂质体，按2.4项下方法测其包封率，并计算。其结果显示当水化溶液的体积达到20 mL以上时所测得的包封率达到最大并趋于稳定。见图4。

2.5.4 水化时的温度分别设定水化时的温度为30 ℃、35 ℃、40 ℃、45 ℃，按2.3项下方法制备脂质体，按2.4项下方法测其包封率，并计算。其结果显示水化时的温度对包封率的测定没有显著影响。见图5。

2.5.5 水化时间分别设定水化时间为0.5 h、1 h、1.5 h、2 h，按2.3项下方法制备脂质体，按2.4项下方法测其包封率，并计算。其结果显示随着水化时间的增加包封率随之增大，并在1 h后趋于稳定。见图6。

2.6 正交试验设计在单因素实验的基础上，发现膜材比、药脂比、磷酸缓冲液的体积对脂质体包封率的测定影响较大，而水化时的温度和时间影响相对较小，因此选择影响较大的因素进行正交试验。见表1、表2。

2.7 样品测定结果由表2可知，A因素对该实验影响最大，当胆固醇与卵磷脂的比例为3∶1时，所测得的包封率较高，C因素为次要因素，B因素对该实验的影响最小。最优制备方法为A1B3C3，即卵磷脂与胆固醇的比为3∶1、苍耳子油与卵磷脂比为1∶7、磷酸缓冲液的体积为20 mL时所制得苍耳子油脂质体包封率较高，在最优制备方法下平行3次实验所测包封率分别为68.3%、67.7%、68.1%，平均值达68.0%。该处方比较稳定。

3 讨论

本文采用薄膜分散水化法制备苍耳子油脂质体，外观为淡黄色混悬液。现代研究表明苍耳子油对鼻炎和鼻息肉的治疗有很好的疗效，但其也具有一定的毒性和不良反应，脂质体作为鼻黏膜给药的新剂型能很好的避免上述缺点，由于苍耳子油为水不溶性药物采用薄膜分散水化法制备能有效减少药物的流失且方法简便易行[15]。包封率是脂质体质量评价的重要指标，常用的测定方法有超速离心法、葡聚糖凝胶色谱柱法、琼脂糖凝胶色谱柱法等，脂质体粒径大小不一采用色谱柱法分离效果差，但脂质体和游离药物的重量差异较大可以用超速离心法很好的分离，有效的减小了研究误差[16]。经研究表明其方法下制备苍耳子油脂质体操作简便，重现性好且包封率达60%以上，为下一步研究奠定基础。

苍耳子主要可以用于治疗过敏性鼻炎，目前其在此方面的应用，主要是通过联合氯雷他定、地塞米松等以鼻炎滴丸的方式给药，还有报道以散剂直接给药，鲜有关于其他剂型的报道[17-20]。本研究是首次对苍耳子油脂质体的进行了制备，说明以苍耳子油为基础的剂型可以进一步拓展，以此扩大其给药方式和途径。

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（2020-02-12收稿责任编辑：王杨）

基金项目：2019年甘肃省高等学校创新能力提升项目（2019B-200）;甘肃省重点研发计划-社会发展类项目（17YF1FL147）

作者简介：王红娟（1984.10—），女，硕士，讲师，研究方向：中药化学和中药质量控制，E-mail：181922169@qq.com

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