| 标题 | 粪便直接涂片法漏检肝吸虫感染1例分析 |
| 范文 | 陶永平 李晓艳 摘 要 目的：通过临床一例肝吸虫感染者初筛漏检的案列，比较多种粪便镜检方法对肝吸虫卵的镜下检出效果。方法：采用粪便直接涂片法和水洗沉淀法及加藤厚涂片。结果：粪便水洗沉淀法及加藤厚涂片法明显比直接涂片法更易检出肝吸虫卵。结论：医院检验科在对高度怀疑的肝吸虫感染者进行粪便初筛时，如遇直接涂片法镜检阴性时，有必要进一步采用水洗沉淀法或加藤厚涂片复核，以免漏检。 关键词 直接涂片法 肝吸虫 漏检 中图分类号：R383.2文献标识码：A 1病例摘要 男，53岁，农民。有饮酒嗜好，平时在家务农。2017年9月因上腹部不适及右肋弓区隐痛1月，就诊于当地社区卫生服务站，给予小柴胡颗粒及三九胃泰治疗数周，上腹部不适缓解，但肝区隐痛加重并伴随腹泻症状，遂来院内科进一步住院检查。查体：体温36.8℃，巩膜轻度黄染，肝脾肋下未触及，唯右上腹轻微压痛，无反跳痛，血常规：嗜酸性粒细胞9.1%;肝功能T-BiL 23%emol/L，HBsAg阳性，其余正常。腹部B超、CT检查，提示疑为寄生虫样异物;胆管扩张。医生询问患者既往史后得知其有食用醋腌生鱼的习惯，故送检验科进一步粪便检查，但报告未发现肝吸虫卵及其他寄生虫卵，检验科便将粪便标本交于医学院寄生虫实验室协助进一步排查。实验室人员考虑到患者有既往史，体检特征也提示可能存在肝吸虫感染，但该院检验科未从粪便中直接发现相关虫卵，怀疑可能是标本采集或检查方法的原因。经沟通得知检验科操作时采用的是直接涂片法，故嘱咐患者再次留取粪便标本复检。次日，实验室对患者粪便标本进行复检，首先采用直接涂片法（三张），置显微镜低倍镜下观察。由于患者当日仍有腹泻现象，三张直接涂片标本在制作时厚度较薄，也未直接找到寄生虫卵。最后采用水洗沉淀法和加藤厚涂片法复检，这两种方法均检出肝吸虫卵。临床医生综合其它检查项目的结果进行判断，最终予以确诊肝吸虫病。其后给予该患者抗肝吸虫药物治疗，数日后临床症状基本消失，其余体检正常，予以出院。 2讨论 当前，临床上进行肝吸虫病诊断，主要采用病原学诊断、免疫学诊断法、影像学检查等手段。其中影像学检查虽能够科学、直观地对病变位置进行诊断，但其在肝吸虫病诊断中准确率不高，易被误判为肝胆结石、肝癌等其他疾病，因此必须要结合虫卵或虫体检测等方法。在本病例中，B超和CT检查均强烈提示肝胆部疑有类似寄生样异物，加之患者有相关感染途径和临床症状，所以首先应重点考虑肝内寄生虫感染。肝内寄生虫感染常见于血吸虫肝病和肝吸虫病， 少见于猪囊虫病等。其中肝吸虫感染病例在临床上时有遇到，主要是患者有生食淡水鱼虾的饮食习惯，因鱼片中的肝吸虫囊蚴未高温杀死而造成感染。常用的病原学诊断方法有直接涂片法、水洗沉淀法、加藤厚涂片法、氢氧化钠消化法以及免疫学方法等。考虑到检验工作的时率问题，临床检验科一般对粪便标本寄生虫卵检查，优先采用直接涂片法。但根据实验室人员的经验来看，肝吸虫卵体积很小，约为30%em？5%em，是人体寄生虫卵中最小的一种，低倍显微镜下也只呈现芝麻粒状，如果不仔细辩认肩峰和卵盖等结构，很容易将虫卵误认为小气泡而忽略。同时，使用直接涂片法时，至少需要取样3张以上进行涂片。如果粪便中混有较多的未消化食物，很容易粘附或覆盖住虫卵，也易造成漏检。而水洗沉淀法主要用于蠕虫卵和吸虫卵检查，操作方法是，取粪便20～30g，放入烧杯内加10倍清水制成粪浆;用铜筛过滤入500mL锥形量杯中，再以水清洗残渣直至量杯将满，静置30分钟后倾去上液，再如前法加水沉淀，重复数次直至上液澄清为止，最后弃去上液取沉渣镜检。此法利用虫卵比重大于水，可以将虫卵自然沉于水底，使虫卵集中，更容易检出。本次病例标本中，检验科初筛时采用的就是直接涂片法，送检到实验室进一步排查时，实验人员首先也是使用直接涂片法，并且还是取样3张粪便标本，均未能发现虫卵。分析可能是由于患者感染程度较轻，或在之前服用中成药期间，由于某些中药对虫体有驱杀作用，使得患者體内虫体数量较少，以致粪便中肝吸虫卵数量过少，分布较稀疏。即便是使用水洗沉淀法取沉渣涂片，6个视野后也才能将肝吸虫卵检出，更证明患者体内虫卵数量较少。实验室为了保证检查结果的准确性，一并使用了加藤厚涂片法进行复核，同样也检出数个肝吸虫卵。加藤厚涂片法的操作是取经过4？cm的100目/吋金属筛或尼龙网筛过的粪便50mg，置于载玻片上，盖以浸透甘油-孔雀绿溶液的玻璃纸，轻压使粪便铺成约25？0mm的涂面，置36℃温箱中约30min，待粪膜稍干，透明即可镜检。相比直接涂片法，以上两种方法操作较为费时，一般医院检验科粪便初筛时较少采用，但这两法在蠕虫和吸虫的检出率上比直接涂片法要高。鉴于此例，提示检验工作人员，对于高度怀疑的肝吸虫感染病例，当使用三张直接涂片法对粪便标本初筛无结果时，务必要再次使用水洗沉淀法和加藤厚涂片法进一步复查，才宜定论。 参考文献 [1] 邓安杰，李和平，李天永.肝左叶外侧段区寄生虫感染误诊1例[J].实用医院临床杂志，2004，1（03）：97. [2] 陆予云，李争鸣.寄生虫学检验（第4版）[M].北京：人民卫生出版社，2017：152-155. |
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