标题 | GeneXpert MTB/RIF分子检测在肺结核诊断中的实用性 |
范文 | 徐红梅 赵军 【摘要】目的:探讨GeneXpertMTB/RIF分子检测在肺结核诊断中的实用性。方法:选取2018年4月到2019年10月我院收集的陇南市(八县一区)疑似肺结核的患者标本,共183份,对标本进行抗酸染色及结核分枝杆菌(MTB)培养;GeneXpertMTB/RIF系统分子检测;同时抽取38份样本,对其进行Hain(线性探针/芯片)检测,并对检测结果进行观察。结果:肺结核患者标本的阳性检出份数为157份,检出率为85.79%;经RIF检测显示,共检测出14株耐药株,检出率为7.65%。结论:GeneXpertMTB/RIF分子检测在肺结核诊断中具有较高的实用性,能够获得较高的疾病诊断率。 【关键词】GeneXpertMTB/RIF分子检测;肺结核;诊断价值 【中图分类号】R249【文献标志码】A 【文章编号】1005-0019(2020)15-070-01 肺结核是一种常见的慢性感染性疾病,能够对诸多脏器产生不良累及,临床中主要依据结核病实验室诊断,包括抗酸染色与MTB培养等方式[1]。然而抗酸染色检查的过程较为复杂,并且阳性率较低,同时MTB培养较易受到感染,并且检测时间较长,因而导致肺结核无法获得有效的诊断[2]。随着检测技术的不断发展,目前临床中多使用GeneXpertMTB/RIF分子检测方式[3]。本研究将探讨GeneXpertMTB/RIF分子检测在肺结核诊断中的实用性。 1资料与方法 1.1一般资料 选取2018年4月到2019年10月我院收集的陇南市(八县一区)疑似肺结核的患者标本,共183份,其中男女各129份与54份,年龄为32-67岁,平均年龄为(45.5±4.9)岁。 1.2肺结核的诊断标准胸部影像学检查符合以下指标中至少1项:①结核菌素皮肤试验反应≥15mm或存在丘疹、水泡、双圈;②存在肺结核可疑症状;③血清抗结核抗体呈阳性。 1.3纳入标准①均为疑似肺结核;②均获得家属的完全同意。 1.4排除标准①无法积极配合完成检测;②患有其他呼吸感染性疾病。 1.5方法(1)结核分枝杆菌(MTB)培养。使用40d/L的NaOH对183份样本进行处理,之后将其接种至酸性罗氏培养基上,将孵育温度调整至35℃,连续8周每周对MTB生长情况进行严密管检查,阳性的判定标准为酸性罗氏培养基斜面有MTB菌落生长,否则则为阴性;并按照菌落数量所占斜面面积多少分为1+、2+、3+、4+。 (2)Hain(线性探针/芯片)检测。利用超声波水浴破坏细菌,提取DNA;应用热启动Taq酶扩增目的DNA片段;将PCR扩增产物与试纸条上固定的探针进行杂交显色;利用酶显色反应对结果进行判读。以罗氏培养与药敏试验作为“金标准”,检测HAIN技术下药物的耐药程度、敏感程度分别计算其敏感度、特异度。 (3)GeneXpertMTB/RIF系统分子检测。分别抽取183份样本的1ml痰样本,使用GeneXpertMTB/RIF系统分子进行检测,2h后观察检测结果。将MTBDNA拷贝的高低分为高、中、低、极低与未检出5个量级作为MTB数量,将利福平检测结果作为耐药检测结果。 1.6观察指标 Hain检测与GeneXpertMTB/RIF系统分子检测结果。 2结果 Hain检测与GeneXpertMTB/RIF系统分子检测结果 肺结核患者标本的阳性检出份数为157份,检出率为85.79%;经RIF检测显示,共检测出14株耐药株,检出率为7.65%;经Hain检测显示,有2份未检出,而GeneXpert全部检出。 3讨论 肺结核是一种十分常见的临床疾病,由于其病情较长,病情较重,因而若能够在患病早期并予以及时正确的診断,能够在较大程度上控制该疾病的传播,并且能够及时为患者提供良好的治疗,进而提升其健康水平。目前临床中主要将细菌学检查作为诊断该疾病的金标准,主要分为痰涂片与培养等方式;然而对于痰涂片方式而言,其检验质量在较大程度上取决于标本质量,同时无法获得较高的阳性检出率;对于培养方式而言,由于需要对标本进行5-8周的培养,因此使得检测时间明显滞后[4]。因此为获得较高的阳性检出率,则需要使用一种更加有效的方式进行检测。 GeneXpertMTB/RIF分子检测是近年来新兴的一种检测方式。该种检测技术主要是以半巢式实时定量PCR技术为基础,并且对PCR检测步骤进行了良好的整合,从而完全实现了自动化的检测目标,并且整个检测全过程不超过2h便可完成。该种检测技术具有操作简便、耗时较短、较高的敏感度与特异度的特点,无需对患者造成不良任何不良损伤,因而具有较高的安全性;并且作为集MTB检测与MTB利福平耐药检测于一体的新型检测技术,因而具有较高的检出率与较大的应用价值[5]。依据本研究的检测结果显示,采用GeneXpertMTB/RIF分子检测技术后,阳性检出率高达85.79%,并且经RIF检测显示,耐药株的检出率为7.65%;经Hain检测显示,有2份未检出,而GeneXpert全部检出。这足以说明GeneXpertMTB/RIF分子检测技术具有较高的应用价值。 综上所述,本研究认为GeneXpertMTB/RIF分子检测在肺结核诊断中具有较高的实用性,能够获得较高的疾病诊断率,可作为肺结核诊断的首选检测方式。然而通过相关临床研究显示,GeneXpertMTB/RIF虽然对涂阳培阳的样本阳性检出率较高但对涂阴培阴的检出率仍较低,因此仍按需要加强对该种方式的研究。 参考文献 [1]陈子芳,孙义军,孙本海,etal.GeneXpertMTB/RIF系统在肺结核诊断及利福平耐药检测中的应用价值[J].中华临床感染病杂志,2014,7(4):351-353. [2]陈子芳,孙本海,霍丽丽,王建,陈琦.GeneXpertMTB/RIF技术在结核性胸膜炎诊断及利福平耐药检测中的价值[J].中国卫生检验杂志,2017,27(06):819-821. [3]田斌,王孝君,文岚,郭彦昌.XpertMTB/RIF检测系统对肺结核临床诊断病例的应用价值[J].中国人兽共患病学报,2016,32(09):798-801. [4]张青,薛冰茹,李克诚.GeneXpertMTB/RIF系统对肺结核的诊断价值[J].检验医学,2016,31(07):599-602. [5]牛海军,王歌,李明虎.GeneXpertMTB/RIF检测在肺结核诊断中的价值评估[J].中国防痨杂志,2017,39(8):829-832. |
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