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不同样本类型对EBV DNA检测结果的影响

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胡如政

摘要：目的：对临床血浆样本、外周血PBMC样本与咽拭子样本的EBV DNA阳性率以及相关计数情况进行对比，以分析有关样本对最终检验结果所带来的影响，评价样本及方法的灵敏度。方法：在本院所有所收治接诊的疑似为EBV感染的90例患儿作为本次研究的对象，对其采取血浆样本、PBMC样本及咽拭子样本的采集，并观察所有患儿最终结果的阳性率是否有明显的差异，对其敏感度情况进行观察，评价相关样本的影响作用。结果：90例患儿最终检查的结果可以发现，三种检验结果彼此之间的阳性率之间形成了明显不同，从低到高依次为血浆、外周血PBMC和咽拭子标本，尤其以咽拭子标本为最高且明显高于外周血PBMC与血浆检查，灵敏度最强（P<0.05）。但在EBV DNA方面，外周血PBMC与咽拭子的相关结果未呈现明显不同（P>0.05），两项结果接近，而且明显比血浆检查结果更高（P<0.05）。结论：在临床对EB病毒筛查的过程中。咽拭子标本的敏感性最强，阳性率最高，在EBV DNA方面與外周血PBMC接近，但是其阳性率却明显较高，可以结合实际情况选择相应的标本进行疾病监测，以促使早期诊断积极进行干预。

关键词：EB病毒;小儿;DNA;咽拭子;外周血PBMC;血浆;结果;影响

【中图分类号】R446.5? 【文献标识码】A? 【文章编号】1673-9026（2020）07-034-01

引言：

EB病毒是临床常见的一种疱疹病毒，尤其在小儿群体中发生感染的情况更多，作为一种传染性单核细胞增多症的病原体，在小儿群体中尤为常见，一般以呼吸道感染为主要症状，严重情况下可以累及全身多个脏器产生问题，感染之后以B淋巴细胞为主要攻击的细胞，在其中增殖并感染其他细胞[1]。而此类病毒感染之后带来的较为典型性症状影响包括了发热、淋巴结肿大，引起咽峡炎等一系列问题，主要以呼吸道症状和全身症状为主。EB病毒的感染很容易被漏诊，进行诊断和治疗的过程中，尤其要关注其方法和标本的使用，合理选取标本进行前期检查诊断，为后续干预提供诊断依据和支持[2]。针对这一特点，本次研究主要是采取实时荧光聚合酶联反应（PCR）定量检测，对不同的样本阳性率、EBV DNA情况进行对比，以评价哪一种标本阳性率更高敏感性更强一些。

1.资料与方法

1.1一般资料

90例患儿均为本院所收治高度疑似为EBV感染的患儿群体，其年龄在4-12岁之间，平均（6.14±1.36）岁，伴有明显的淋巴结肿大、咽喉疼痛、发热咳嗽等问题，临床诊断为肺炎、支气管炎等等。所有患儿既往体健，没有明确的免疫系统疾病或者凝血功能障碍等一系列问题，在此之前没有使用过抗病毒、抗感染治疗，基础情况接近，不会影响最终结果准确性。

1.2方法

对所有患儿都进行血液标本和咽拭子标本采集，抽取静脉全血2ml，使用乙二胺四乙酸进行抗凝然后离心分离血浆，留取血浆100ul进行EBV DNA提取，剩余全血标进行外周血的单个核细胞（PBMC）EBV DNA提取。咽拭子标本方面，按照有关要求进行采集，并密封进行送检，无法及时检测的存储于零下20摄氏度环境，尽早进行检测[3]。使用ABI 7300/7500荧光定量扩增仪配合相关试剂，按照相关操作规范进行DNA模板提取，并在反应管内加入阴性质控品、质控品和参考品以及待检测标本各2ul进行检测。

1.3观察指标

观察所有患儿在三种标本同样方法检测之后的阳性率、EBV DNA对数值方面是否形成了明显差异。

1.4统计方法

所有数据利用SPSS.20.0统计学软件进行统计学数据处理，计量资料用均数±标准差（x+s）进行表示，采用t检验，当P<0.05时，表示差异较为显著，具备统计学意义。

2.结果

分别采取三种标本的结果对比发现，以咽拭子标本的阳性率最高，明显高于外周血PBMC与血浆（P<0.05），而在EBV DNA方面，其结果与外周血PBMC相近（P>0.05），但均明显大于血浆检查（P<0.05）。三种标本的最终阳性率与EBV DNA结果情况对比详见表1.

3.结论

EB病毒感染的问题在临床儿科十分常见，其发生率相对较高，由于免疫力差异导致患儿的临床症状也有明显不同，早期进行诊断对于后续治疗影响十分明确[4]。根据不同标本差异发现，咽拭子的阳性率更高，这主要是其分泌物是病毒传播的主要载体，故而其阳性率更高。而外周血PBMC作为感染病毒后主要载体，感染之后主要攻击B淋巴细胞上受体，所以其阳性率比血浆要更高一些。

如上所述，在临床不同标本进行检验的过程中发现，咽拭子检查的阳性率最高，在早期诊断的过程中选取相关方法取得的效果更好一些，有助于早期诊断和早期疾病治疗。

参考文献：

[1] 陈世知，谢运兰，梅严花，et al.传染性单核细胞增多症患者不同标本EBV-DNA检测的临床价值[J].国际检验医学杂志，2018，39（02）：53-55+58.

[2] Lorusso F ，Caleca M P ，Bellavia C ，et al.The EBV-DNA Can be Used as a Diagnostic and Follow-up Parameter of the Rhinopharyngeal Tumors in the Non-Endemic Population of the Western Sicily[J].Indian Journal of Otolaryngology and Head & Neck Surgery，2018，71-71.

[3] 张晴，崔蕾，马宏浩，et al.血浆及全血EB病毒DNA对EB病毒相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症患儿预后的影响[J].中华实用儿科临床杂志，2020，35（15）：1138-1143.

[4] 彭惠轩，麦彩喜，陈广道.EB病毒DNA检测对儿童传染性单核细胞增多症的诊断价值及其影响因素[J].国际医药卫生导报，2018，024（004）：491-493.

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