| 标题 | 高效液相色谱法测定黄瓜中三羟基克百威的不确定度评定 |
| 范文 | 田甜 张瑜 [摘要]对高效液相色谱法测定黄瓜中三羟基克百威含量的不确定度进行评估，并分析产生该方法不确定度的来源。经检测黄瓜中的三羟基克百威含量为0.08305mg/kg时，其扩展不确定度为0.00276 mg/kg，k=2（95%置信度）。评定结果表明，标准峰面积的测定（）是影响该方法不确定度的主要因素。 [关键词]高效液相色谱法；不确定度；黄瓜；三羟基克百威 [中图分类号]S481.8 [文献标识码]A 克百威是广谱、高效、高毒性的氨基甲酸酯类杀虫、杀螨、杀线虫剂，可以被植物吸收并输送到茎叶部，达到防治害虫的目的。三羟基克百威是克百威的主要代谢产物，具有触杀和胃毒作用，属于丁硫克百威的毒代谢产物，若与胆酰脂酶结合具有不可逆性，因此毒性甚高。根據国家标准《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量，GB 2763-2016》，蔬菜中三羟基克百威农药残留按照 NY/T761-2008规定的方法进行检测。为有效控制黄瓜中使用该农药所带来的残留风险，实验人员根据该方法对黄瓜中三羟基克百威的残留量进行有效监测。 为了进一步提升检测分析方法的有效性及可靠性，对其进行不确定度的评估显得格外有意义。本研究依据《测量不确定度评定与表示，JJF1059.1-2012》和《化学分析中不确定度的评估指，CNAS—GL06》等技术规范要求，对液相色谱法测定黄瓜中三羟基克百威的不确定度进行评估，分析该方法不确定度分量及其来源，确保检测结果更加真实有效。 1 材料与方法 1.1 仪器设备 岛津液相色谱仪（配荧光检测器与柱后衍生系统）；柱子为C8（4.0×250mm），5?m；移液枪为Eppendorf。 1.2 实验步骤 精确称量25.00g样品置于打样机中，移取50.0mL乙腈，均匀破碎2min后过滤，汇集滤液40±5mL到装有6±1g氯化钠的100mL具塞量筒中，在离心机中离心3min后取出静置15min，等待分层充足后。在具塞量筒中移取10.00mL乙腈上清液，放置在150mL的烧杯中，通过65℃水浴锅进行加热，同时缓缓氮吹，将乙腈蒸发近干，加入甲醇+二氯甲烷（比例为1+99）2.0mL洗净，待净化。用4.0mL甲醇+二氯甲烷（1+99）活化氨基柱，当溶液面到达氨基柱吸附层表面的时候，立刻加入待净化的溶液，用15 mL玻璃试管将洗脱液进行收集，用2 mL甲醇+二氯甲烷（1+99）洗具塞量筒后过柱，并再重复一次。将试管放置在氮吹仪上，设置水浴温度为45℃，氮吹蒸发至溶液近干，用甲醇定容至2.5mL。混匀后，采用0.45μm滤膜进行过滤，吸取20.0μL样品溶液注入液相色谱仪中，等待分析。检测时，室温保持在16～26℃。 2 结果与讨论 2.1 建立数学模式 ω为样品中农药的含量（mg/kg）；为标准液中三羟基克百威浓度含量（μg/mL）；为标准液中三羟基克百威峰面积（mV*s）；为样品中三羟基克百威峰面积（mV*s）；m为样品的质量（g）；为提取液的总体积（mL）；为提取液分取的体积（mL）；为样品溶液定容体积（mL）。 2.2 分析不确定度的来源 HPLC检测黄瓜中三羟基克百威的标准不确定度主要来源：标准液浓度、试样称量、样品前处理溶液体积、标准溶液峰面积、试样峰面积、检测方法重复性等。 从检测方法可知，各参数相互独立，合成标准不确定度计算可采用相对标准不确定度的合成。 2.3 量化不确定度分量 2.3.1 由实验总重复性导出的相对不确定度μrel（rep）。同一样品溶液进样5次，检测到农药浓度分别为0.178 mg/kg、0.187 mg/kg、0.184 mg/kg、0.182 mg/kg、0.179 mg/kg。平均浓度为0.182 mg/kg。计算不确定度： 2.3.2 标准溶液浓度导致的相对标准不确定度评定。（1）标准液纯度引入的相对标准不确定度。实验用三羟基克百威标准溶液母液，浓度为100 μg/mL，1.0 mL/支，其扩展不确定度为-0.12 ～0.12μg/mL（k=2），则： （2）稀释过程引入的相对标准不确定度评定。将三羟基克百威标准母液1mL移至10mL容量瓶（A级）中，制备成浓度为10μg/mL的标准储备液。再用移液枪吸取200μL标准储备液至定容体积为10mL的容量瓶（A级）中，用甲醇进行定容，配置成浓度为0.2μg/mL的三羟基克百威标准液。 （3）合成相对不确定度评定。 2.3.3 测定标准溶液峰面积导致的相对标准不确定度评定。根据《液相色谱仪检定规程，JJG 705-2014》操作测定样本。仪器精准度、进样偏差最终均反映在试样峰，相同条件下对标准溶液中三羟基克百威含量进行平行6次检测，如表1所示。该不确定度通过连续平行检测计算，属于A类评定。 （1）标准色谱峰面积重复测量导致的相对标准不确定度。根据以上数据，计算可得： （2）仪器产生的相对标准不确定度。依据仪器检定信息，其重复性误差为，则： （3）标准溶液色谱峰面积测定不确定度的合成。 2.3.4 试样色谱峰面积检测引入的相对标准不确定度评定。（1）由试样色谱峰面积重复测量导致的相对标准不确定度。通过该不确定度重复进样计算，属于A类评定。对样本中三羟基克百威含量6次重复测定结果分别为49618、49345、50750、49970、48663、49212mV*s，平均值49593mV*s，则 （2）由检测仪器产生的相对标准不确定度。依据仪器检定信息，其定量重复性误差为（B类评定），则： （3）由试样峰面积测定引入的相对标准不确定度合成。 2.3.5 样品称量时带入的相对标准不确定度μrel（m）评定。样品称量过程中使用的天平（最小称量值为0.01g），其最大误差为-0.05～0.05g，因此由称量带入的不确定度为： 2.3.6 试样前处理溶液体积引入的相对标准不确定度评定。（1）提取过程中溶液总体积导致的相对标准不确定度。50 mL单标线胖肚移液管（A级）的容量允许误差范围为±0.050mL，则。 乙腈的膨胀系数为1.37×10-3/℃，而检测实验室的温度变化范围在-3～3℃之间，因此。 计算样品提取液总体积引入的相对标准不确定度： 3 讨论 由表2可知，对检测结果影响最大的不确定度分量为标准峰面积的测定（A标），其次是样品总重复性测定（rep）、样品峰面积测定（A样）和前处理过程溶液体积（V）等。因此在检测过程中应按仪器操作规程做好仪器各项调试工作，确保仪器温度、压力等仪器条件稳定运行，同时检测所用的仪器、器材、容器和检测场所应保持清洁，以免沾染其他物质影响检测结果准确性。注意样品前处理操作规范，做到均匀取样。此外，还应特别注意检测过程中加强对上述主要影响因素的控制，减少测量的不确定度，提高测量结果的准确性和可靠性。 [参考文献] [1] 赖勇，唐淑军，梁幸，等.SPE-GC/MS法同时测定蔬菜中克百威和三羟基克百威残留[J].热带农业工程，2010（2）：1-5. [2] NY/T 761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定[S].北京：中国标准出版社，2008. [3] 臧慕文.分析测试不确定度的评定与表示[J].分析实验室，2005（11）：74-79. [4] 国家质量监督检验检疫总局.测量不确定度评定与表示：JJFl059.1—2012 [S].北京：中国标准出版社，2012. [5] 中国合格评定国家认可委员会.2006化学分析中不确定度的评估指南：CNAS—GL06[S].北京：中国计量出版社，2006. |
| 随便看 |
|
科学优质学术资源、百科知识分享平台，免费提供知识科普、生活经验分享、中外学术论文、各类范文、学术文献、教学资料、学术期刊、会议、报纸、杂志、工具书等各类资源检索、在线阅读和软件app下载服务。