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标题

咪唑类离子液体用于猪肉中喹诺酮类抗生素的高效液相色谱检测方法的建立

范文

田婧++辛可启++朱子冬++牛树彬

摘要：建立以咪唑类离子液体为高效液相色谱流动相添加剂检测猪肉中氟喹诺酮类抗生素的方法。采用C18反相色谱柱和紫外检测方法，对流动相中离子液体溶液的pH值及流动相配比进行优化，同时对方法进行可行性评价。结果表明：当流动相中离子液体溶液的pH值为2.40，离子液体溶液与乙腈的配比为88∶12（V/V）时，诺氟沙星和环丙沙星能够实现基线分离，且分离效果较好。在此条件下，诺氟沙星和环丙沙星在质量浓度为0.05～80.00 μg/mL范围内的检出限分别为0.014 μg/mL和0.022 μg/mL，且线性关系良好（R2>0.999 0）；2 种物质的保留时间和峰面积的日内及日间（3 d）精密度均小于1.50%，符合测定要求；在猪肉样品中添加2、5、10 mg/kg的诺氟沙星和环丙沙星标准品，其固相萃取回收率在95.3%～102.0%之间，表明方法精密度较好，可用于猪肉中喹诺酮类抗生素的测定。

关键词：咪唑类离子液体；高效液相色谱法；流动相添加剂；猪肉；氟喹诺酮类抗生素

Establishment of High Performance Liquid Chromatography Method for Determination of Quinolones in Pork

Using Imidazolium-Based Ionic Liquids as Mobile Phase Additives

TIAN Jing， XIN Keqi， ZHU Zidong， NIU Shubin*

（The Experimental Teaching Center of Traditional Chinese Medicine and Biotechnology， Beijing City University， Beijing 100094， China）

Abstract： A reversed-phase high performance liquid chromatographic （RP-HPLC） method was established for the determination of quinolones in pork by using imidazolium-based ionic liquids as mobile phase additives. The chromatographic separation of quinolones was performed on a C18 column before ultraviolet detection. The effects of the pH value of ionic liquid and mobile phase composition on the analysis were investigated and optimized. The performance of the method was evaluated in terms of linear range， detection limit and reproducibility. Good baseline separation of norfloxacin and ciprofloxacin was achieved using imidazolium aqueous solution （pH 2.40）-acetonitrile （88：12， V/V） as the mobile phase. Under this condition， the calibration curves of norfloxacin and ciprofloxacin showed a good linearity in the concentration range of 0.05?80.00 μg/mL with R2 greater than 0.999 0， and the detection limits were 0.014 and

0.022 μg/mL， respectively. The intra-day and inter-day precision of migration time and peak area were less than 1.50% for both quinolones， which met the analytical requirements. The average recoveries at three spiked levels （2， 5， 10 mg/kg） ranged from 95.3%?102.0%. The presented method proved to be precise and useful for the determination of quinolones in pork.

Key words： imidazolium ionic liquids； high performance liquid chormatography； mobile phase additives； pork； quinolones

DOI：10.7506/rlyj1001-8123-201709010

中图分类号：O657.7 文献标志码：A 文章编号：1001-8123（2017）09-0058-05

引文格式：

田婧，辛可启，朱子冬，等. 咪唑类离子液体用于猪肉中喹诺酮类抗生素的高效液相色谱检测方法的建立[J]. 肉类研究， 2017， 31（9）： 58-62. DOI：10.7506/rlyj1001-8123-201709010. http：//www.rlyj.pub

TIAN Jing， XIN Keqi， ZHU Zidong， et al. Establishment of high performance liquid chromatography method for determination of quinolones in pork using imidazolium-based ionic liquids as mobile phase additives[J]. Meat Research， 2017， 31（9）： 58-62. DOI：10.7506/rlyj1001-8123-201709010. http：//www.rlyj.pub

氟喹诺酮类抗生素药物具有广谱抗菌性，被广泛用于临床医学和动物疾病的预防和治疗。然而，过量或不当使用喹诺酮类抗生素药物会使细菌的耐药性增强，从而使人体产生抗药性[1]。残留在动物体内的氟喹诺酮很可能会通过食物链传递给食用者，对食用者的中枢神经和关节产生毒性。因此，快速、灵敏地检测生物体内的喹诺酮残留具有重要意义。

离子液体是由有机阳离子和无机阴离子组成的低温熔融盐，其中常见的阳离子有咪唑、季铵盐、吡咯盐和季鏻盐阳离子。与传统分子溶剂相比，离子液体无味、不燃，可以减少因挥发而产生的环境污染，且具有良好的热稳定性和化学稳定性[2]，成为当前医学、药学和化学领域的研究热点，特别是在色谱中的应用发展极快，其中在高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）和毛细管电泳中的应用较多[3-5]。

在HPLC分析法中，离子液体作为流动相添加剂可用于葡萄酒中砷含量的测定[6]、黄柏中生物碱的测定[7]、药物制剂中乌拉酰胺含量的测定[8]、纸制品中荧光增白剂含量的测定[9]以及蛋白质的分离分析[10]等。离子液体修饰整体柱可用于猪肉中喹诺酮类抗生素的含量测定[11]、手性芳香醇衍生物及消旋药物的含量测定[12]等。离子液体也常用于果汁[13]、鸡蛋[14]、酒水[15]、植物油[16]、蔬菜[17]、蜂蜜[18]、肉类[19]和其他样品[20-24]的固相萃取和液-液萃取过程，用于提高样品的前处理效率。在离子液体中，咪唑型离子液体出现最早，其在LC中作为流动相添加剂应用最为广泛[5]，在改善峰形方面作用显著[25]，其咪唑环上的烷基链长和阴离子种类均会对被分析物的迁移行为产生影响。咪唑型离子液体作为流动相添加剂可用于酸性、中性、尤其是碱性化合物的分析，且1-己基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体在改善碱性药物分离效果时的表现较优[26]。氟喹诺酮分子为两性分子，在酸性条件下，其氨基发生质子化，具有碱性化合物在酸性环境中的表现，将1-己基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体用于畜禽肉中氟喹诺酮类抗生素的测定具有可行性，但目前尚未见报道。本研究将1-己基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体作为HPLC的流动相添加剂，替代有毒、有害物质三乙胺[27]，用于猪肉中诺氟沙星和环丙沙星2 种氟喹诺酮类抗生素药物的检测，并进行方法学评价。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

猪肉样品购于北京市上地华联超市。

乙腈（色谱纯）北京化工厂；1-己基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体（纯度≥99%）上海笛柏化学品科技有限公司；环丙沙星标准品（纯度99.9%）、诺氟沙星标准品（纯度99.5%）中国食品药品检定研究院；实验用水均为超纯水。

1.2 仪器与设备

Agilent 1200高效液相色谱仪（配备紫外可见检测器）

美国Agilent公司；Shimadzu-AUY 120分析天平

日本岛津公司；KQ-250B超声波清洗器昆山市超声仪器有限公司；PHS-3C pH计上海雷磁仪器厂；VORTEX-5涡旋振荡器海门市其林贝尔仪器制造有限公司；Avanti J-E超速冷冻离心机美国贝克曼库尔特有限公司；USE-12S固相萃取仪北京优晟联合科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1 溶液配制

3 mmol/L 1-己基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体流动相的配制：精密称取1-己基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐0.769 9 g，加水稀释至1 000 mL，用磷酸调节其pH值。

磷酸盐缓冲溶液（用于肌肉、脂肪组织）的配制：称取磷酸二氢钾6.8 g，加水溶解并稀释至500 mL，用5.0 mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至7.0。

标准溶液的配制：用0.1 mol/L HCl配制体积分数为10%的HCl-乙腈溶液作为溶剂，将诺氟沙星和环丙沙星标准品配制成二者的质量浓度均为500 μg/mL的混合标准储备溶液，-20 ℃保存。

1.3.2 样品前处理

参照中华人民共和国农业部公告第1025号-14-2008《动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测》[27]，固相萃取洗脱剂选择优化的离子液体流动相。

供试样品的制备：取2.0 g搅碎的猪肉置于30 mL离心管中，加入10.0 mL磷酸盐缓冲溶液，涡旋振荡器中速振荡5 min，在10 000 r/min条件下离心10 min。取上清液，作为供试样品。

供试样品的净化：依次用甲醇和磷酸盐缓冲溶液各2 mL对C18固相萃取柱进行预洗后，取5 mL供试样品过柱，控制上样流速为1 mL/min，1 mL水淋洗，抽干，用离子液体-乙腈（88∶12，V/V）作为流动相进行洗脱，洗脱流速1 mL/min，抽干，收集洗脱液。洗脱液经0.45 μm滤膜过滤后，供HPLC测定。

1.3.3 色谱条件

色谱柱：Kromasil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：3 mmol/L 1-己基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体-乙腈，使用前经微孔滤膜过滤；流速：1.0 mL/min；檢测波长：280 nm；柱温：室温；进样量20 μL。

流动相中离子液体溶液的pH值分别选择国家标准方法中的pH 2.40和已有文献报道中的pH 3.00[28]，流动相中离子液体与乙腈的配比分别选择90∶10、88∶12和85∶15（V/V），

根据目标化合物的分离效果选择合适的pH值及配比。

1.3.4 方法学评价

标准曲线的绘制：分别吸取不同体积的诺氟沙星和环丙沙星混合标准储备溶液，用乙腈-水（60∶40，V/V）溶液稀释，配制成诺氟沙星和环丙沙星的质量浓度均为0.05、0.10、0.25、0.50、1.00、2.50、5.00、10.00、25.00、50.00、80.00 μg/mL的系列混合标准工作溶液，0.45 μm滤膜过滤，备用。分别以诺氟沙星和环丙沙星标准品的质量浓度为横坐标，对应的峰面积为纵坐标，绘制各自的标准曲线。

重复性实验：采用质量浓度为25.00 μg/mL的混合标准工作溶液对方法的重复性进行考察。在相同分析条件下，每天连续进样5 次，测定日内精密度，连续测定3 d，得日间精密度。

加标回收率实验：1）样品1：取9 份猪肉样品，按照诺氟沙星和环丙沙星的添加量分别为2、5、10 mg/kg

3 个水平进行加标，按照1.3.2、1.3.3节中的方法对加标样品进行前处理及色谱分析；2）样品2：取不加标的猪肉样品，按照1.3.2节中的方法进行供试样品制备和萃取，用固相萃取洗脱液配制诺氟沙星和环丙沙星的混合标准溶液，将未经萃取的混合标准溶液加入萃取后的空白猪肉样品中，使样品中2 种标准品的质量浓度分别为2、5、10 μg/mL，然后进行色谱分析。固相萃取法的回收率为样品1与样品2中2 种目标化合物的峰面积之比。

1.4 数据处理

采用Microsoft Office Excel软件进行数据处理，OriginPro软件进行绘图。

2 结果与分析

2.1 色谱条件优化

2.1.1 流动相中离子液体溶液pH值的选择

流动相中的离子液体溶液在pH 2.40和pH 3.00条件下，喹诺酮分子结构中的氨基基团完全质子化，C18色谱柱对其无保留作用，离子液体溶液的阴离子部分（BF4-）和磷酸盐在分离中起到离子对试剂的作用[25，29-30]，

改变质子化的喹诺酮分子在柱中的保留行为。此外，酸性条件下，C18色谱柱中未键合的硅羟基会对样品分子产生不可逆吸附作用，与样品带有同种电荷的离子液体溶液阳离子部分竞争吸附于硅羟基表面，能够有效抑制硅羟基对样品分子的吸附作用，同时其结构中的碳氢长链对改善分离效果也能起到一定作用。由图1可知，流动相中离子液体溶液的pH值降低时，诺氟沙星和环丙沙星达到基线分离，保留时间延长，峰拖尾现象明显改善，分离效率提高。因此，选择pH 2.40作为流动相中离子液体溶液的pH值。

2.1.2 流动相配比的选择

a. 离子液体溶液∶乙腈=85∶15（V/V）；b. 离子液体溶液∶乙腈=

88∶12（V/V）；c. 离子液体溶液∶乙腈=90∶10（V/V）。

图 2 流动相配比对目标化合物分离的影响

Fig. 2 Influence of mobile phase composition on the separation of target compounds

由图2可知，流动相中离子液体溶液的pH值为2.40时，离子液体溶液在流动相中所占的比例越大，保留时间越长。流动相中离子液体溶液与乙腈的配比为88∶12（V/V）时，诺氟沙星和环丙沙星已经达到基线分离，二者的配比为90∶10（V/V）时，诺氟沙星和环丙沙星的分离度更大，但分析时间较长。综合考虑分析时间和分离效率，选择流动相中离子液体溶液与乙腈的最佳配比为88∶12（V/V）。

2.2 方法学评价

2.2.1 线性范围和检出限

在质量浓度0.05～80.00 μg/mL范围内，诺氟沙星的标准曲线方程为y=86.6x+29.3（R2=0.999 2），环丙沙星的标准曲线方程为y=57.4x+14.1（R2=0.999 4），线性关系良好。诺氟沙星和环丙沙星的检测限（limit of detection，LOD）（RS/N=3）分别为0.014、0.022 μg/mL。

2.2.2 重复性

诺氟沙星和环丙沙星色谱峰保留时间的相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）分别为0.19%和0.30%，二者峰面积的RSD分别为0.99%和1.04%（n=5）；连续3 d的测定中，诺氟沙星和环丙沙星色谱峰保留时间的RSD分别为0.65%和0.77%，峰面积的RSD分别为1.49%和1.41%，符合美国食品与药物管理局的标准[31]。对连续3 d的测定数据进行F检验和t检验分析，结果表明，F检验迁移时间不超过3.23，峰面积不超过2.29

（F（4，4）=6.39，置信度95%），t检验迁移时间不超过1.09，峰面積不超过0.66（t8=2.30，置信度95%），重复性在3 d内无显著性差异。

2.2.3 加标回收率

由表1可知，加入诺氟沙星和环丙沙星标准品的猪肉样品固相萃取回收率分别为95.3%～102.0%和97.0%～99.8%。本研究中目标化合物的含量范围为1～100 mg/kg，属于微量测定，考虑到随机误差的对称分布和置信度因素，回收率允许范围为90%～110%，满足

GB/T 27404—2008《实验室质量控制规范食品理化检测》[32]

附录F1中对回收率的要求，表明方法准确度较好。

3 結论

本研究以咪唑离子液体为流动相添加剂，采用固相萃取-HPLC法对猪肉中添加的诺氟沙星和环丙沙星进行检测。通过优化，确定出最佳色谱条件为流动相中离子液体溶液的pH值为2.40，流动相中离子液体溶液与乙腈的配比为88∶12（V/V）。在此条件下，诺氟沙星和环丙沙星的LOD分别为0.014、0.022 μg/mL，保留时间的RSD≤0.77%，峰面积的RSD≤1.49%，重复性符合要求。猪肉样品中诺氟沙星和环丙沙星的固相萃取回收率为95.3%～102.0%，方法的准确度较好，可以用于猪肉样品中喹诺酮类抗生素的检测。

参考文献：

[1] 张增峰，孟晓风，杨保伟，等. 鸡肉源沙门氏菌对（氟）喹诺酮类抗生素的耐药性及相关基因[J]. 中国食品学报， 2015， 15（3）： 158-165. DOI：10.16429/j.1009-7848.2015.03.021.

[2] ZHANG Cheng， ZHU Lusheng， WANG Jinhua， et al. The acute toxic effects of imidazolium-based ionic liquids with different

alkyl-chain lengths and anions on zebrafish （Danio rerio）[J]. Ecotoxicology and Environmental Safety， 2017， 140： 235-240. DOI：S0147-6513（17）30132-X [pii]10.1016/j.ecoenv.2017.02.054.

[3] ALI I， SUHAIL M， SANAGI M M， et al. Ionic liquids in HPLC and CE： a hope for future[J]. Critical Reviews in Analytical Chemistry， 2017， 47（4）： 332-339. DOI：10.1080/10408347.2017.1294047.

[4] HUI B Y， RAOOV M， ZAIN N N M， et al. Combination of cyclodextrin and ionic liquid in analytical chemistry： current and future perspectives[J]. Critical Reviews in Analytical Chemistry， 2017， 39（17）： 1-14. DOI：10.1080/10408347.2017.1320936.

[5] GARCIA-ALVAREZ-COQUE M C， RUIZ-ANGEL M J， BERTHOD A，

et al. On the use of ionic liquids as mobile phase additives in

high-performance liquid chromatography： a review[J]. Analytica Chimica Acta， 2015， 883： 1-21. DOI：S0003-2670（15）00433-X[pii]10.1016/j.aca.2015.03.042.

[6] CASTRO GRIJALBA A， FIORENTINI E F， WUILLOUD R G. Ionic liquid-assisted separation and determination of selenium species in food and beverage samples by liquid chromatography coupled to hydride generation atomic fluorescence spectrometry[J]. Journal of Chromatography A， 2017， 1491： 117-125. DOI：S0021-9673（17）30283-2[pii]10.1016/j.chroma.2017.02.045.

[7] DING Xiaoyuan， TANG Yan， SUN Ailing， et al. Simultaneous determination of three alkaloids in Huangbo using an ionic liquid as a mobile phase additive in reversed-phase liquid chromatography[J]. Journal of Separation Science， 2014， 38（3）： 374-380. DOI：10.1002/jssc.201400649.

[8] SEO N， LEE Y R， PARK H S， et al. Determination of urazamide in pharmaceutical preparation with room temperature ionic liquid[J]. Archives of Pharmacal Research， 2017， 40（3）： 364-372. DOI：10.1007/s12272-017-0895-010.1007/s12272-017-0895-0[pii].

[9] WANG Qing， CHEN Xianbo， QIU Bin， et al. Ionic liquid as a mobile phase additive in high-performance liquid chromatography for the simultaneous determination of eleven fluorescent whitening agents in paper materials[J]. Journal of Separation Science， 2016， 39（7）： 1242-1248.

DOI：10.1002/jssc.201501050.

[10] ZHOU L， DANIELSON N D. The ionic liquid isopropylammonium formate as a mobile phase modifier to improve protein stability during reversed phase liquid chromatography[J]. Journal of Chromatography B， 2013， 940： 112-120. DOI：S1570-0232（13）00419-4[pii]10.1016/j.jchromb.2013.08.005.

[11] SUN Xiangli， HE Jia， CAI Guorui， et al. Room temperature ionic liquid-mediated molecularly imprinted polymer monolith for the selective recognition of quinolones in pork samples[J]. Journal of Separation Science， 2010， 33（23/24）： 3786-3793. DOI：10.1002/jssc.201000337.

[12] ZHOU Zhiming， LI Xia， CHEN Xiaoping， et al. Synthesis of ionic liquids functionalized beta-cyclodextrin-bonded chiral stationary phases and their applications in high-performance liquid chromatography[J]. Analytica Chimica Acta， 2010， 678（2）： 208-214. DOI：S0003-2670（10）01052-4[pii]10.1016/j.aca.2010.08.024.

[13] FAN Chen， CAO Xueli， LIU Man， et al. Determination of Alternaria mycotoxins in wine and juice using ionic liquid modified countercurrent chromatography as a pretreatment method followed by

high-performance liquid chromatography[J]. Journal of Chromatography A， 2016， 1436： 133-140. DOI：S0021-9673（16）30039-5[pii]10.1016/j.chroma.2016.01.069.

[14] GAO Jiajia， WANG Hui， QU Jingang， et al. Development and optimization of a naphthoic acid-based ionic liquid as a

“non-organic solvent microextraction” for the determination of tetracycline antibiotics in milk and chicken eggs[J]. Food Chemistry， 2016， 215： 138-148. DOI：S0308-8146（16）31171-2[pii]10.1016/j.foodchem.2016.07.138.

[15] SONG Ying， WU Lijie， LI Na， et al. Utilization of a novel microwave-assisted

homogeneous ionic liquid microextraction method for the determination of Sudan dyes in red wines[J]. Talanta， 2015， 135： 163-169.

DOI：S0039-9140（15）00002-8[pii]10.1016/j.talanta.2014.12.049.

[16] WANG Yuanpeng， SUN Ying， XU Bo， et al. Matrix solid-phase

dispersion coupled with magnetic ionic liquid dispersive

liquid-liquid microextraction for the determination of triazine herbicides in oilseeds[J]. Analytica Chimica Acta， 2015， 888： 67-74. DOI：S0003-2670（15）00880-6[pii]10.1016/j.aca.2015.07.028.

[17] WU Hao， SHI Yating， GUO Xiaozhen， et al. Determination and removal of sulfonamides and quinolones from environmental water samples using magnetic adsorbents[J]. Journal of Separation Science， 2016， 39（22）： 4398-4407. DOI：10.1002/jssc.201600631.

[18] WU Lijie， HU Mingzhu， LI Zhanchao， et al. Determination of triazine herbicides in fresh vegetables by dynamic microwave-assisted extraction coupled with homogeneous ionic liquid microextraction high performance liquid chromatography[J]. Analytical and Bioanalytical Chemistry， 2014， 407（6）： 1753-1762. DOI：10.1007/s00216-014-8393-4.

[19] WU Lijie， SONG Ying， HU Mingzhu， et al. Ionic-liquid-impregnated resin for the microwave-assisted solid-liquid extraction of triazine herbicides in honey[J]. Journal of Separation Science， 2015， 38（17）： 2953-2959. DOI：10.1002/jssc.201500039.

[20] YU H， MERIB J， ANDERSON J L. Crosslinked polymeric ionic liquids as solid-phase microextraction sorbent coatings for high performance liquid chromatography[J]. Journal of Chromatography A， 2016， 1438： 10-21. DOI：S0021-9673（16）30126-1[pii]10.1016/j.chroma.2016.02.027.

[21] YUAN Yanan， LIANG Shiru， YAN Hongyuan， et al. Ionic

liquid-molecularly imprinted polymers for pipette tip solid-phase extraction of （Z）-3-（chloromethylene）-6-flourothiochroman-4-one

in urine[J]. Journal of Chromatography A， 2015， 1408： 49-55. DOI：S0021-9673（15）00979-6[pii]10.1016/j.chroma.2015.07.028.

[22] ZHOU Xinguang， ZHU Anwei， SHI Guoyue. Selective extraction and analysis of catecholamines in rat blood microdialysate by polymeric ionic liquid-diphenylboric acid-packed capillary column and fast separation in high-performance liquid chromatography-electrochemical detector[J]. Journal of Chromatography A， 2015， 1409： 125-131. DOI：S0021-9673（15）01008-0[pii]10.1016/j.chroma.2015.07.040.

[23] CHEN Jieping， ZHU Xiashi. Magnetic solid phase extraction using ionic liquid-coated core-shell magnetic nanoparticles followed by

high-performance liquid chromatography for determination of Rhodamine B in food samples[J]. Food Chemistry， 2016， 200： 10-15. DOI：S0308-8146（16）30001-2[pii]10.1016/j.foodchem.2016.01.002.

[24] 劉勇军，姜艳彬. 固相萃取-高效液相色谱法测定猪肉与鸡肉中替米考星、泰乐菌素残留量[J]. 肉类研究， 2012， 26（12）： 12-15.

[25] BERTHOD A， RUIZ-ANGEL M J， HUGUET S. Nonmolecular solvents in separation methods： dual nature of room temperature ionic liquids[J]. Analytical Chemistry， 2005， 77（13）： 4071-4080. DOI：10.1021/ac050304+.

[26] UBEDA-TORRES M T， ORTIZ-BOLSICO C， GARCIR-ALVAREZ-COQUE

M C， et al. Gaining insight in the behaviour of imidazolium-based ionic liquids as additives in reversed-phase liquid chromatography for the analysis of basic compounds[J]. Journal of Chromatography A， 2015， 1380： 96-103. DOI：S0021-9673（14）01996-7

[pii]10.1016/j.chroma.2014.12.064.

[27] 中华人民共和国农业部. 中华人民共和国农业部公告第1025号-14-2008 动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测[EB/OL]. （2008-05-10）

[2017-06-07]. http：//www.moa.gov.cn/zwllm/tzgg/gg/200805/t20080509_1036076.htm.

[28] 占春瑞，温志海，卜延刚，等. 鸡肉中多种喹诺酮类兽药残留量的高效液相色谱测定研究[J]. 食品科学， 2005， 26（10）： 172-176.

[29] RUIZ-ANGEL M J， CARDA-BROCH S， BERTHOD A. Ionic liquids versus triethylamine as mobile phase additives in the analysis of

beta-blockers[J]. Journal of Chromatography A， 2006， 1119（1/2）： 202-208.

DOI：S0021-9673（05）02371-X[pii]10.1016/j.chroma.2005.11.132.

[30] 王婧菲，于泓，安莹. 离子液体作高效液相色谱流动相添加剂分离测定芳香胺[J]. 分析试验室， 2012， 31（5）： 47-51. DOI：10.13595/j.cnki.issn1000-0720.2012.0136.

[31] US Department of Health and Human Services， Food and Drug Administration， Center for Drug Evaluation and Research， Center for Veterinary Medicine. Guidance for Industry： Bioanalytical Method Validation[EB/OL]. （2001-05-10） [2017-06-07]. http：//www.fda.gov/cder/guidance/index.htm.

[32] 中華人民共和国浙江出入境检验检疫局，中国合格评定国家认可中心. GB/T 27404—2008 实验室质量控制规范食品理化检测[S]. 北京：中国标准出版社， 2008.

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