高效液相色谱技术在食品检测中的应用
冉艳
我国《食品安全法》第一百五十条明确规定,食品是供人食用或者饮用的成品、原料、既是食品又是药品的物品。由于其为人类生存所必须的物质,特别是近些年来食品安全问题屡屡见诸于报道,使得食品检测日益受到社会各界的关注。随着科学技术的快速发展,高效液相色谱技术被广泛应用于化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中。鉴于此,本次研究围绕高效液相色谱技术在食品检测中的应用展开探讨,现内容报道如下:
材料与方法
材料。随机选取5种水基食品、4种脂肪食品作为研究对象,水基食品包括啤酒和矿泉水,脂肪食品包括鱼罐头、猪肉罐头、牛肉罐头等。所有食品均处于保质期内且无破损及污染情形。
方法。
(1)样品预处理:水基食品各自抽取100ml样品,以5ml/min的速度进行过滤处理,即将完毕时加入30%甲醇水溶液15ml进行清洗,随后利用5ml的甲醇溶液洗脱处理,洗脱液氮吹后利用甲醇定容,采用0.45μm膜过滤。脂肪食品选取适量固体物进行匀浆处理,之后利用高精密电子秤称取5g样品,加入到15ml正已烷与15ml甲醇乙腈形成的混合液中涡旋振荡均匀处理,超声萃取10min后于4℃环境下冷冻。以10000r/min离心2.5min后促使其分层,抽取甲醇乙腈层后再次加入15ml甲醇乙腈混合溶液重复萃取以此,合并两次分离的萃取液后加入无水硫酸钠将水分彻底去除后氮吹,30%甲醇5ml固定,0.45μm膜过滤。
(2)食品检测:分光光度法:选取适量食品样品后利用不同波长的紫外线光持续照射,采用分光光度计测定波长吸收值,以波长为横坐标轴,吸收强度为纵坐标轴,绘制吸收光谱曲线并转换酚类物质含量值。
高效液相色谱法:仪器设备为日本岛津公司生产的LC-10A高效液相色谱仪,将食品样品置于锥形瓶内,加入1ml浓硫酸溶液混匀后将其pH调整至2.0后按照8ml/min的速度上样,色谱柱温度设定为35℃,进样量45μl。A、B、C流动相溶液依次为1%醋酸、甲醇、乙腈,洗脱梯度值(60%A:40%B)~(25%A:50%B:25%C),流速1.5ml/min,波长以最大吸收波长为主。
观察指标。选取2,4-二氯酚、苯酚、3-甲基苯酚、2-氯酚、4-硝基酚、2,4-二甲基苯酚、2,4,6-三氯酚、五氯酚作为观察指标。
统计学方法。本次研究中所有数据均采用SPSS17.0统计软件进行处理,计量资料采用均数±标准差(±s)表示,以t检验,P<0.05表示差异具有统计学意义。
结果
高效液相色谱法、分光光度法获得的8种酚类物质含量相比较,差异有统计学意义(P<0.05),见下表。
讨论
近些年来随着食品安全问题的愈演愈烈,食品检测越来越重要,尤其是当下环境污染的加剧、化学添加剂的广泛使用等问题屡屡见诸于报道,食品安全已经成为全社会关注的焦點问题。本次研究中分别采用分光光度法以及高效液相色谱技术对相同食品中酚类物质含量进行测定,结果发现,高效液相色谱法下各指标检出量均高于分光光度法,差异均有统计学意义(P<0.05)。由此结果可知,在食品检测中高效液相色谱技术可取得理想的效果。原因在于该技术通过高压输液系统,将不同极性的单一溶剂或混合溶剂、缓冲液等流动相泵入色谱柱,在柱内对待检测成分分离后于检测器内进行检测,从而实现对样品分析的目的。此外,在实际应用中高效液相色谱技术具有灵敏度及分辨率高、操作便捷、重复性好的特点,具有重要的推广使用价值。
我国《食品安全法》第一百五十条明确规定,食品是供人食用或者饮用的成品、原料、既是食品又是药品的物品。由于其为人类生存所必须的物质,特别是近些年来食品安全问题屡屡见诸于报道,使得食品检测日益受到社会各界的关注。随着科学技术的快速发展,高效液相色谱技术被广泛应用于化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中。鉴于此,本次研究围绕高效液相色谱技术在食品检测中的应用展开探讨,现内容报道如下:
材料与方法
材料。随机选取5种水基食品、4种脂肪食品作为研究对象,水基食品包括啤酒和矿泉水,脂肪食品包括鱼罐头、猪肉罐头、牛肉罐头等。所有食品均处于保质期内且无破损及污染情形。
方法。
(1)样品预处理:水基食品各自抽取100ml样品,以5ml/min的速度进行过滤处理,即将完毕时加入30%甲醇水溶液15ml进行清洗,随后利用5ml的甲醇溶液洗脱处理,洗脱液氮吹后利用甲醇定容,采用0.45μm膜过滤。脂肪食品选取适量固体物进行匀浆处理,之后利用高精密电子秤称取5g样品,加入到15ml正已烷与15ml甲醇乙腈形成的混合液中涡旋振荡均匀处理,超声萃取10min后于4℃环境下冷冻。以10000r/min离心2.5min后促使其分层,抽取甲醇乙腈层后再次加入15ml甲醇乙腈混合溶液重复萃取以此,合并两次分离的萃取液后加入无水硫酸钠将水分彻底去除后氮吹,30%甲醇5ml固定,0.45μm膜过滤。
(2)食品检测:分光光度法:选取适量食品样品后利用不同波长的紫外线光持续照射,采用分光光度计测定波长吸收值,以波长为横坐标轴,吸收强度为纵坐标轴,绘制吸收光谱曲线并转换酚类物质含量值。
高效液相色谱法:仪器设备为日本岛津公司生产的LC-10A高效液相色谱仪,将食品样品置于锥形瓶内,加入1ml浓硫酸溶液混匀后将其pH调整至2.0后按照8ml/min的速度上样,色谱柱温度设定为35℃,进样量45μl。A、B、C流动相溶液依次为1%醋酸、甲醇、乙腈,洗脱梯度值(60%A:40%B)~(25%A:50%B:25%C),流速1.5ml/min,波长以最大吸收波长为主。
观察指标。选取2,4-二氯酚、苯酚、3-甲基苯酚、2-氯酚、4-硝基酚、2,4-二甲基苯酚、2,4,6-三氯酚、五氯酚作为观察指标。
统计学方法。本次研究中所有数据均采用SPSS17.0统计软件进行处理,计量资料采用均数±标准差(±s)表示,以t检验,P<0.05表示差异具有统计学意义。
结果
高效液相色谱法、分光光度法获得的8种酚类物质含量相比较,差异有统计学意义(P<0.05),见下表。
讨论
近些年来随着食品安全问题的愈演愈烈,食品检测越来越重要,尤其是当下环境污染的加剧、化学添加剂的广泛使用等问题屡屡见诸于报道,食品安全已经成为全社会关注的焦點问题。本次研究中分别采用分光光度法以及高效液相色谱技术对相同食品中酚类物质含量进行测定,结果发现,高效液相色谱法下各指标检出量均高于分光光度法,差异均有统计学意义(P<0.05)。由此结果可知,在食品检测中高效液相色谱技术可取得理想的效果。原因在于该技术通过高压输液系统,将不同极性的单一溶剂或混合溶剂、缓冲液等流动相泵入色谱柱,在柱内对待检测成分分离后于检测器内进行检测,从而实现对样品分析的目的。此外,在实际应用中高效液相色谱技术具有灵敏度及分辨率高、操作便捷、重复性好的特点,具有重要的推广使用价值。