猪、禽采血及血清制备操作方法

    张伟

    摘要：主要介绍了猪禽采血及血清制备的操作方法，供参考。

    关键词：猪；禽；采血；血清

    中图分类号：S851.33 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2016）07-0011-02

    血清学检测是诊断动物疫病、评价重大动物疫病强制免疫效果的重要手段之一[1]，血液样品的采集及制备是保证血清学检测成功的前提条件。畜禽采血及血清制备是畜牧兽医部门一项常规的业务工作，也是基层畜牧兽医人员必须熟练掌握的技术。下面简单介绍猪禽采血及血清制备的操作方法，以供参考。

    1 采血前调查摸底

    为了检验动物疫病免疫抗体水平，需要对已进行免疫接种的畜禽进行采血[2]。采血前，认真查阅养殖档案，摸清防疫等相关情况，对免疫注射情况不详的，免疫注射时限未达到规定要求的不纳入采样范围。同时，要检查畜禽个体健康状况，健康状况不好的，正在患病治疗或尚未治愈的，以及生长发育不良的也不纳入采样范围，以免引发应激反应和意外事故。

    2 采血方法

    2.1 采血的部位

    猪采血的部位可选择前腔静脉和耳静脉。但大批量采血时宜选择前腔静脉。禽采血的部位可选择禽翅静脉和心脏，最常用的是禽翅静脉采血法。

    2.2 采血具体方法

    2.2.1 猪前腔静脉采血 采血前将同群猪只隔离，采取适当的保定方法。对25kg以下的小猪，采取人工仰卧保定方法，双后肢与身体平行向后轻轻拉直，双前肢朝上拉直与体中线垂直并左右微微张开。在双前肢与胸骨连线的前侧左右凹窝内，采血人员用酒精或碘酊棉球消毒后，选用9#针头进针2～3cm，针刺方向为向后内方与地面呈60°角，轻轻抽出前腔静脉血液即可。采血完毕，用消毒棉球紧压采血部位针孔处，迅速拔出针头，压迫止血片刻后，解除保定。

    对体型较大的猪只，采用站立式保定方法，用金属保定器套住猪的上颌骨，收紧金属保定器圈环，向前方用力牵引，将猪的上颌骨稍稍吊起偏向右侧，使猪的头颈与水平面呈30°角，这时猪的注意力集中在鼻部，猪多呈后退姿势。采血人员用酒精或碘酊棉在猪的右侧胸前凹窝处消毒，用采血针对准凹窝最低处，垂直刺入，感觉有负压感且有回血，则标志已刺入血管，然后轻轻回抽针管内芯，即可采取前腔静脉血液。采血完毕，拔出针头，采血部位用消毒棉球压迫止血片刻后，解除保定。对100 kg以上的猪采血一般宜选用14#针头采血，50～100 kg的育肥猪选用12#针头，25～50 kg的小猪也选用12#针头。

    2.2.2 禽翅静脉采血 辅助人员将家禽个体侧卧保定，展开翅膀，拔掉腋窝部羽毛，可见由翼根进入腋窝的翼根静脉，对其用酒精或碘酊棉球进行消毒。采血人员等待消毒液干燥后，左手拇指压迫血管近心端，使静脉血管怒张、明显，右手用装有7#针头的采血针或注射器沿翼根向翅方向，于血管0.3～0.5 cm一旁倾斜刺入皮肤，再与血管平行进针0.2～0.4 cm后刺入血管，然后逐步放松按压，缓慢抽取血液。进针不宜过深，针头的切口面应向上[3]。采血完毕后，用棉球压迫采血部位1～2 min止血，同时可起到消毒作用。

    2.3 采血时间

    一般为猪、禽进行免疫接种后抗体的高峰期进行血样采集。提前通知被采血单位或养殖户在采血当天采血前不要饲喂畜禽，被采样畜禽禁食8h（空腹）后进行采血，一天中多选择在早上或午后采血。

    3 血清制备

    3.1 血样静置

    猪样品每份采集全血不少于3 mL，禽样品每份采集全血不少于2 mL。用一次性无菌注射器采血后把注射器活塞往后拉，直接去掉内芯，可形成封闭的离心管，再加针头帽，最后针头朝上倾斜30～45°摆放，在室温（20～25 ℃）下放置2～3 h，待血清自然析出。

    使用一次性采血针连接真空采血管采集血液样品后，把采血针取下，直接将采血管与地面成30～45°斜放，在室温下放置2～3 h，待血清自然析出。

    3.2 血样运输

    采血后室温静置10～15 min，待血液凝固后才能运送。运送血样样品时一定要轻拿轻放，防止剧烈震动。使用血液样品专用运输箱运送更好。能在4 h内运输到达实验室的，只需冷藏后运输；不能在4 h内送达的，则要做冷冻处理后，再冷藏运输，必须在24 h内送到。

    3.3 实验室血清制备

    血样运输到实验室后，接收的样品若血清析出良好，可直接将血清转入塑料离心管，按实验室规定程序编号检测；接收的样品若血清析出较差或室外气温过低，可放入37 ℃恒温箱中1 h或25～37 ℃水浴锅中1 h作预处理，再用离心机1 500～2 000 r/min离心5 min分离血清。在实验室的保存，若短时间保存，4 ℃冷藏即可，时间最多不能超过1个月；若长时间保存，可在-20 ℃冷冻保存。血清由室温转入

    -20 ℃或由-20 ℃转入室温时，须经过冷藏并摇匀处理，切忌反复冻融[4]。

    参考文献：

    [1] 王荣华.血清制备的影响因素[J].中国畜牧业，2016（5）：50.

    [2] 李书儒.动物免疫监测的重大意义[J].当代畜牧，2016（5）：46.

    [3] 陈 静，陈德明，徐玉玲.动物血液样品采集制备与保存的方法[J].兽医导刊，2015（8）：72-73.

    [4] 李 娟，黄仁树.血清学诊断的运用[J].四川畜牧兽医，2015（1）：58-59.