猪、禽采血及血清制备操作方法

    张伟

    摘要:主要介绍了猪禽采血及血清制备的操作方法,供参考。

    关键词:猪;禽;采血;血清

    中图分类号:S851.33 文献标识码:B 文章编号:1007-273X(2016)07-0011-02

    血清学检测是诊断动物疫病、评价重大动物疫病强制免疫效果的重要手段之一[1],血液样品的采集及制备是保证血清学检测成功的前提条件。畜禽采血及血清制备是畜牧兽医部门一项常规的业务工作,也是基层畜牧兽医人员必须熟练掌握的技术。下面简单介绍猪禽采血及血清制备的操作方法,以供参考。

    1 采血前调查摸底

    为了检验动物疫病免疫抗体水平,需要对已进行免疫接种的畜禽进行采血[2]。采血前,认真查阅养殖档案,摸清防疫等相关情况,对免疫注射情况不详的,免疫注射时限未达到规定要求的不纳入采样范围。同时,要检查畜禽个体健康状况,健康状况不好的,正在患病治疗或尚未治愈的,以及生长发育不良的也不纳入采样范围,以免引发应激反应和意外事故。

    2 采血方法

    2.1 采血的部位

    猪采血的部位可选择前腔静脉和耳静脉。但大批量采血时宜选择前腔静脉。禽采血的部位可选择禽翅静脉和心脏,最常用的是禽翅静脉采血法。

    2.2 采血具体方法

    2.2.1 猪前腔静脉采血 采血前将同群猪只隔离,采取适当的保定方法。对25kg以下的小猪,采取人工仰卧保定方法,双后肢与身体平行向后轻轻拉直,双前肢朝上拉直与体中线垂直并左右微微张开。在双前肢与胸骨连线的前侧左右凹窝内,采血人员用酒精或碘酊棉球消毒后,选用9#针头进针2~3cm,针刺方向为向后内方与地面呈60°角,轻轻抽出前腔静脉血液即可。采血完毕,用消毒棉球紧压采血部位针孔处,迅速拔出针头,压迫止血片刻后,解除保定。

    对体型较大的猪只,采用站立式保定方法,用金属保定器套住猪的上颌骨,收紧金属保定器圈环,向前方用力牵引,将猪的上颌骨稍稍吊起偏向右侧,使猪的头颈与水平面呈30°角,这时猪的注意力集中在鼻部,猪多呈后退姿势。采血人员用酒精或碘酊棉在猪的右侧胸前凹窝处消毒,用采血针对准凹窝最低处,垂直刺入,感觉有负压感且有回血,则标志已刺入血管,然后轻轻回抽针管内芯,即可采取前腔静脉血液。采血完毕,拔出针头,采血部位用消毒棉球压迫止血片刻后,解除保定。对100 kg以上的猪采血一般宜选用14#针头采血,50~100 kg的育肥猪选用12#针头,25~50 kg的小猪也选用12#针头。

    2.2.2 禽翅静脉采血 辅助人员将家禽个体侧卧保定,展开翅膀,拔掉腋窝部羽毛,可见由翼根进入腋窝的翼根静脉,对其用酒精或碘酊棉球进行消毒。采血人员等待消毒液干燥后,左手拇指压迫血管近心端,使静脉血管怒张、明显,右手用装有7#针头的采血针或注射器沿翼根向翅方向,于血管0.3~0.5 cm一旁倾斜刺入皮肤,再与血管平行进针0.2~0.4 cm后刺入血管,然后逐步放松按压,缓慢抽取血液。进针不宜过深,针头的切口面应向上[3]。采血完毕后,用棉球压迫采血部位1~2 min止血,同时可起到消毒作用。

    2.3 采血时间

    一般为猪、禽进行免疫接种后抗体的高峰期进行血样采集。提前通知被采血单位或养殖户在采血当天采血前不要饲喂畜禽,被采样畜禽禁食8h(空腹)后进行采血,一天中多选择在早上或午后采血。

    3 血清制备

    3.1 血样静置

    猪样品每份采集全血不少于3 mL,禽样品每份采集全血不少于2 mL。用一次性无菌注射器采血后把注射器活塞往后拉,直接去掉内芯,可形成封闭的离心管,再加针头帽,最后针头朝上倾斜30~45°摆放,在室温(20~25 ℃)下放置2~3 h,待血清自然析出。

    使用一次性采血针连接真空采血管采集血液样品后,把采血针取下,直接将采血管与地面成30~45°斜放,在室温下放置2~3 h,待血清自然析出。

    3.2 血样运输

    采血后室温静置10~15 min,待血液凝固后才能运送。运送血样样品时一定要轻拿轻放,防止剧烈震动。使用血液样品专用运输箱运送更好。能在4 h内运输到达实验室的,只需冷藏后运输;不能在4 h内送达的,则要做冷冻处理后,再冷藏运输,必须在24 h内送到。

    3.3 实验室血清制备

    血样运输到实验室后,接收的样品若血清析出良好,可直接将血清转入塑料离心管,按实验室规定程序编号检测;接收的样品若血清析出较差或室外气温过低,可放入37 ℃恒温箱中1 h或25~37 ℃水浴锅中1 h作预处理,再用离心机1 500~2 000 r/min离心5 min分离血清。在实验室的保存,若短时间保存,4 ℃冷藏即可,时间最多不能超过1个月;若长时间保存,可在-20 ℃冷冻保存。血清由室温转入

    -20 ℃或由-20 ℃转入室温时,须经过冷藏并摇匀处理,切忌反复冻融[4]。

    参考文献:

    [1] 王荣华.血清制备的影响因素[J].中国畜牧业,2016(5):50.

    [2] 李书儒.动物免疫监测的重大意义[J].当代畜牧,2016(5):46.

    [3] 陈 静,陈德明,徐玉玲.动物血液样品采集制备与保存的方法[J].兽医导刊,2015(8):72-73.

    [4] 李 娟,黄仁树.血清学诊断的运用[J].四川畜牧兽医,2015(1):58-59.

相关文章!
  • 当前小杂粮种植发展建议

    李新胜【摘? ?要】 本文首先分析了我国的小杂粮种植种类问题,并对现有的小杂粮种类进行了探讨,分析了种植过程中所存在的若干问题。通过

  • 刺参工厂化育苗、保苗生产中常

    刘学迁 刘志君摘 要:?? 概述了在刺参( Apostichopus japonicus )工厂化育苗、保苗中常见的原生动物、线虫、苔藓动物、桡足类、尾索动物等

  • 红艳无核在云南干热河谷区的引

    张永辉 龚向光 谭炜 付君 唐成顺红艳无核(图1)是中国农业科学院郑州果树研究所近年选育的中熟、优质、无核鲜食葡萄品种,具有果穗美