虾过敏原Pen a1抗原表位的关键氨基酸分析
牟慧 高美须 李淑荣 王志东 潘家荣 赵杰 支玉香 李树锦 赵鑫
1引言
虾蟹和鱼类因其味道鲜美,营养丰富,被广大民众所喜爱。但是虾类隶属于国际粮农组织(FAO)公布的八大类食物过敏原中的甲壳类过敏原\[1\],虾过敏问题一直以来广受关注。研究表明, 虾中主要过敏原是Pen a1,分子量36 kDa,是一种原肌球蛋白\[2\]。在食物过敏中,过敏原中的抗原表位即抗原决定簇起重要作用\[3,4\]。2002年,Ayuso等\[5\]利用交叠肽合成法,用患者的过敏血清鉴定出Pen a1中有5个IgE结合区,共8个线性抗原表位,见表1。表位主要由5~20个氨基酸组成,其中每个氨基酸在表位中所起的作用均不同。有些氨基酸残基在表位中起关键作用,这些特定氨基酸的存在对蛋白质构象起了关键性的作用,其发生变化会引起蛋白质的功能降低甚至丧失\[5\],即核心氨基酸或者关键氨基酸残基。因此,如何定位出过敏原中的关键氨基酸,并了解它们的作用机理, 对脱敏具有重要意义。
目前, 已经有很多关于关键氨基酸的研究。筛选关键氨基酸的方法主要有两种,一是对所有过敏原进行序列比对,找出其中表位区域所共有的氨基酸或氨基酸组合。Emoto等\[6\]通过序列比对的方法分析了腹足类及双壳类动物之间的交互作用。Liang等\[7\]对3种蟹原肌球蛋白进行序列比对,分析其同源性超过99.2%。二是将表位区域的氨基酸进行定向突变,通过检测突变后表位区域的致敏性来筛选。早在1996年,Ikagawa等\[8\]就利用氨基酸替代的方法,分析单个氨基酸取代对雪松花粉过敏原Cry j1表位活性的影响。Lehrer 等\[9\] 发现将Pen a1的特定位置的氨基酸取代,将会使其抗原决定簇完全丧失免疫原性。何晓阳等\[10\]利用定点突变的方法分析出了对人体尼古丁代谢酶CYP2A6和CYP2A13的关键氨基酸残基。Zheng等\[11\]通过将虾原肌球蛋白与人和猪的序列对比,利用变异氨基酸取代的方法,分析出F和S为peptide10的关键氨基酸。Cheng等\[12\]采用丙氨酸逐个替代的方法,分析筛选出了真菌主要过敏原Pen ch18 的关键氨基酸。
1引言
虾蟹和鱼类因其味道鲜美,营养丰富,被广大民众所喜爱。但是虾类隶属于国际粮农组织(FAO)公布的八大类食物过敏原中的甲壳类过敏原\[1\],虾过敏问题一直以来广受关注。研究表明, 虾中主要过敏原是Pen a1,分子量36 kDa,是一种原肌球蛋白\[2\]。在食物过敏中,过敏原中的抗原表位即抗原决定簇起重要作用\[3,4\]。2002年,Ayuso等\[5\]利用交叠肽合成法,用患者的过敏血清鉴定出Pen a1中有5个IgE结合区,共8个线性抗原表位,见表1。表位主要由5~20个氨基酸组成,其中每个氨基酸在表位中所起的作用均不同。有些氨基酸残基在表位中起关键作用,这些特定氨基酸的存在对蛋白质构象起了关键性的作用,其发生变化会引起蛋白质的功能降低甚至丧失\[5\],即核心氨基酸或者关键氨基酸残基。因此,如何定位出过敏原中的关键氨基酸,并了解它们的作用机理, 对脱敏具有重要意义。
目前, 已经有很多关于关键氨基酸的研究。筛选关键氨基酸的方法主要有两种,一是对所有过敏原进行序列比对,找出其中表位区域所共有的氨基酸或氨基酸组合。Emoto等\[6\]通过序列比对的方法分析了腹足类及双壳类动物之间的交互作用。Liang等\[7\]对3种蟹原肌球蛋白进行序列比对,分析其同源性超过99.2%。二是将表位区域的氨基酸进行定向突变,通过检测突变后表位区域的致敏性来筛选。早在1996年,Ikagawa等\[8\]就利用氨基酸替代的方法,分析单个氨基酸取代对雪松花粉过敏原Cry j1表位活性的影响。Lehrer 等\[9\] 发现将Pen a1的特定位置的氨基酸取代,将会使其抗原决定簇完全丧失免疫原性。何晓阳等\[10\]利用定点突变的方法分析出了对人体尼古丁代谢酶CYP2A6和CYP2A13的关键氨基酸残基。Zheng等\[11\]通过将虾原肌球蛋白与人和猪的序列对比,利用变异氨基酸取代的方法,分析出F和S为peptide10的关键氨基酸。Cheng等\[12\]采用丙氨酸逐个替代的方法,分析筛选出了真菌主要过敏原Pen ch18 的关键氨基酸。
1引言
虾蟹和鱼类因其味道鲜美,营养丰富,被广大民众所喜爱。但是虾类隶属于国际粮农组织(FAO)公布的八大类食物过敏原中的甲壳类过敏原\[1\],虾过敏问题一直以来广受关注。研究表明, 虾中主要过敏原是Pen a1,分子量36 kDa,是一种原肌球蛋白\[2\]。在食物过敏中,过敏原中的抗原表位即抗原决定簇起重要作用\[3,4\]。2002年,Ayuso等\[5\]利用交叠肽合成法,用患者的过敏血清鉴定出Pen a1中有5个IgE结合区,共8个线性抗原表位,见表1。表位主要由5~20个氨基酸组成,其中每个氨基酸在表位中所起的作用均不同。有些氨基酸残基在表位中起关键作用,这些特定氨基酸的存在对蛋白质构象起了关键性的作用,其发生变化会引起蛋白质的功能降低甚至丧失\[5\],即核心氨基酸或者关键氨基酸残基。因此,如何定位出过敏原中的关键氨基酸,并了解它们的作用机理, 对脱敏具有重要意义。
目前, 已经有很多关于关键氨基酸的研究。筛选关键氨基酸的方法主要有两种,一是对所有过敏原进行序列比对,找出其中表位区域所共有的氨基酸或氨基酸组合。Emoto等\[6\]通过序列比对的方法分析了腹足类及双壳类动物之间的交互作用。Liang等\[7\]对3种蟹原肌球蛋白进行序列比对,分析其同源性超过99.2%。二是将表位区域的氨基酸进行定向突变,通过检测突变后表位区域的致敏性来筛选。早在1996年,Ikagawa等\[8\]就利用氨基酸替代的方法,分析单个氨基酸取代对雪松花粉过敏原Cry j1表位活性的影响。Lehrer 等\[9\] 发现将Pen a1的特定位置的氨基酸取代,将会使其抗原决定簇完全丧失免疫原性。何晓阳等\[10\]利用定点突变的方法分析出了对人体尼古丁代谢酶CYP2A6和CYP2A13的关键氨基酸残基。Zheng等\[11\]通过将虾原肌球蛋白与人和猪的序列对比,利用变异氨基酸取代的方法,分析出F和S为peptide10的关键氨基酸。Cheng等\[12\]采用丙氨酸逐个替代的方法,分析筛选出了真菌主要过敏原Pen ch18 的关键氨基酸。
1引言
虾蟹和鱼类因其味道鲜美,营养丰富,被广大民众所喜爱。但是虾类隶属于国际粮农组织(FAO)公布的八大类食物过敏原中的甲壳类过敏原\[1\],虾过敏问题一直以来广受关注。研究表明, 虾中主要过敏原是Pen a1,分子量36 kDa,是一种原肌球蛋白\[2\]。在食物过敏中,过敏原中的抗原表位即抗原决定簇起重要作用\[3,4\]。2002年,Ayuso等\[5\]利用交叠肽合成法,用患者的过敏血清鉴定出Pen a1中有5个IgE结合区,共8个线性抗原表位,见表1。表位主要由5~20个氨基酸组成,其中每个氨基酸在表位中所起的作用均不同。有些氨基酸残基在表位中起关键作用,这些特定氨基酸的存在对蛋白质构象起了关键性的作用,其发生变化会引起蛋白质的功能降低甚至丧失\[5\],即核心氨基酸或者关键氨基酸残基。因此,如何定位出过敏原中的关键氨基酸,并了解它们的作用机理, 对脱敏具有重要意义。
目前, 已经有很多关于关键氨基酸的研究。筛选关键氨基酸的方法主要有两种,一是对所有过敏原进行序列比对,找出其中表位区域所共有的氨基酸或氨基酸组合。Emoto等\[6\]通过序列比对的方法分析了腹足类及双壳类动物之间的交互作用。Liang等\[7\]对3种蟹原肌球蛋白进行序列比对,分析其同源性超过99.2%。二是将表位区域的氨基酸进行定向突变,通过检测突变后表位区域的致敏性来筛选。早在1996年,Ikagawa等\[8\]就利用氨基酸替代的方法,分析单个氨基酸取代对雪松花粉过敏原Cry j1表位活性的影响。Lehrer 等\[9\] 发现将Pen a1的特定位置的氨基酸取代,将会使其抗原决定簇完全丧失免疫原性。何晓阳等\[10\]利用定点突变的方法分析出了对人体尼古丁代谢酶CYP2A6和CYP2A13的关键氨基酸残基。Zheng等\[11\]通过将虾原肌球蛋白与人和猪的序列对比,利用变异氨基酸取代的方法,分析出F和S为peptide10的关键氨基酸。Cheng等\[12\]采用丙氨酸逐个替代的方法,分析筛选出了真菌主要过敏原Pen ch18 的关键氨基酸。
1引言
虾蟹和鱼类因其味道鲜美,营养丰富,被广大民众所喜爱。但是虾类隶属于国际粮农组织(FAO)公布的八大类食物过敏原中的甲壳类过敏原\[1\],虾过敏问题一直以来广受关注。研究表明, 虾中主要过敏原是Pen a1,分子量36 kDa,是一种原肌球蛋白\[2\]。在食物过敏中,过敏原中的抗原表位即抗原决定簇起重要作用\[3,4\]。2002年,Ayuso等\[5\]利用交叠肽合成法,用患者的过敏血清鉴定出Pen a1中有5个IgE结合区,共8个线性抗原表位,见表1。表位主要由5~20个氨基酸组成,其中每个氨基酸在表位中所起的作用均不同。有些氨基酸残基在表位中起关键作用,这些特定氨基酸的存在对蛋白质构象起了关键性的作用,其发生变化会引起蛋白质的功能降低甚至丧失\[5\],即核心氨基酸或者关键氨基酸残基。因此,如何定位出过敏原中的关键氨基酸,并了解它们的作用机理, 对脱敏具有重要意义。
目前, 已经有很多关于关键氨基酸的研究。筛选关键氨基酸的方法主要有两种,一是对所有过敏原进行序列比对,找出其中表位区域所共有的氨基酸或氨基酸组合。Emoto等\[6\]通过序列比对的方法分析了腹足类及双壳类动物之间的交互作用。Liang等\[7\]对3种蟹原肌球蛋白进行序列比对,分析其同源性超过99.2%。二是将表位区域的氨基酸进行定向突变,通过检测突变后表位区域的致敏性来筛选。早在1996年,Ikagawa等\[8\]就利用氨基酸替代的方法,分析单个氨基酸取代对雪松花粉过敏原Cry j1表位活性的影响。Lehrer 等\[9\] 发现将Pen a1的特定位置的氨基酸取代,将会使其抗原决定簇完全丧失免疫原性。何晓阳等\[10\]利用定点突变的方法分析出了对人体尼古丁代谢酶CYP2A6和CYP2A13的关键氨基酸残基。Zheng等\[11\]通过将虾原肌球蛋白与人和猪的序列对比,利用变异氨基酸取代的方法,分析出F和S为peptide10的关键氨基酸。Cheng等\[12\]采用丙氨酸逐个替代的方法,分析筛选出了真菌主要过敏原Pen ch18 的关键氨基酸。
1引言
虾蟹和鱼类因其味道鲜美,营养丰富,被广大民众所喜爱。但是虾类隶属于国际粮农组织(FAO)公布的八大类食物过敏原中的甲壳类过敏原\[1\],虾过敏问题一直以来广受关注。研究表明, 虾中主要过敏原是Pen a1,分子量36 kDa,是一种原肌球蛋白\[2\]。在食物过敏中,过敏原中的抗原表位即抗原决定簇起重要作用\[3,4\]。2002年,Ayuso等\[5\]利用交叠肽合成法,用患者的过敏血清鉴定出Pen a1中有5个IgE结合区,共8个线性抗原表位,见表1。表位主要由5~20个氨基酸组成,其中每个氨基酸在表位中所起的作用均不同。有些氨基酸残基在表位中起关键作用,这些特定氨基酸的存在对蛋白质构象起了关键性的作用,其发生变化会引起蛋白质的功能降低甚至丧失\[5\],即核心氨基酸或者关键氨基酸残基。因此,如何定位出过敏原中的关键氨基酸,并了解它们的作用机理, 对脱敏具有重要意义。
目前, 已经有很多关于关键氨基酸的研究。筛选关键氨基酸的方法主要有两种,一是对所有过敏原进行序列比对,找出其中表位区域所共有的氨基酸或氨基酸组合。Emoto等\[6\]通过序列比对的方法分析了腹足类及双壳类动物之间的交互作用。Liang等\[7\]对3种蟹原肌球蛋白进行序列比对,分析其同源性超过99.2%。二是将表位区域的氨基酸进行定向突变,通过检测突变后表位区域的致敏性来筛选。早在1996年,Ikagawa等\[8\]就利用氨基酸替代的方法,分析单个氨基酸取代对雪松花粉过敏原Cry j1表位活性的影响。Lehrer 等\[9\] 发现将Pen a1的特定位置的氨基酸取代,将会使其抗原决定簇完全丧失免疫原性。何晓阳等\[10\]利用定点突变的方法分析出了对人体尼古丁代谢酶CYP2A6和CYP2A13的关键氨基酸残基。Zheng等\[11\]通过将虾原肌球蛋白与人和猪的序列对比,利用变异氨基酸取代的方法,分析出F和S为peptide10的关键氨基酸。Cheng等\[12\]采用丙氨酸逐个替代的方法,分析筛选出了真菌主要过敏原Pen ch18 的关键氨基酸。