穴位刺血对实验性变应性鼻炎鼻粘膜组胺激发阈值的影响
陈永红 吕 琳 陈 红 李凤珍 韦金育 李 萍
(广西民族医药研究所,南宁530001)
摘 要 以卵清蛋白为致敏原建立豚鼠实验性变应性鼻炎模型,对动物模型给予穴位刺血治疗,并设立穴位中药敷贴、二丙酸氯地米松治疗对照,测定治疗前后各组鼻粘膜组胺激发阈值。结果显示:穴位刺血疗法有提高实验性变应性鼻炎鼻粘膜组胺激发阈值的作用,即能降低实验性变应性鼻炎模型鼻粘膜对组胺的敏感性,效果与中药穴位敷贴治疗对照组一致。
主题词 鼻炎,变应性,常年/针灸疗法 刺血疗法 组胺释放/针灸效应 鼻粘膜/分泌穴位刺血疗法古称刺络疗法,是通过刺破穴位浅表皮肤或小静脉,使之少量出血,以达到祛除病邪、调整机体功能的一种外治法。临床运用其治疗变应性鼻炎效果较满意,为了探讨其治疗变应性鼻炎的作用机理,笔者运用卵清蛋白建立了实验性变应性鼻炎豚鼠模型,探讨了穴位刺血对实验性变应性鼻炎鼻粘膜组胺激发阈值的影响,现报告如下。
1 材料和方法
1.1 动物及分组选择健康Hartely种豚鼠40只,体重350~450g(由卫生部北京生物制品研究所提供)。雌雄各半,随机分为正常对照组(8只)、模型对照组(8只)、穴位刺血组(8只)、中药穴位敷贴对照组(简称穴位敷贴组,8只)、二丙酸氯地米松对照组(简称BDP组,8只)。各组动物同等条件下分笼喂养。
1.2 变应性鼻炎的造模方法变应原的制备:基础致敏液由卵清蛋白(O.V,中国医学科学院血研所提供)30mg作抗原,氢氧化铝粉末(北京化学试剂二厂提供)3g作佐剂,加生理盐水100ml制成混悬液。强化致敏液由O.V250mg加生理盐水100ml制成。攻击致敏液:O.V1g加生理盐水100ml制成。
造模方法:参考章如新等[1]报道的方法并给予改进。实验开始将造模4组豚鼠以基础致敏液1ml腹腔内注射,隔日1次。第14天停基础致敏,改强化致敏,每日每只豚鼠以强化致敏液滴鼻3~4滴,每日1次,共5次,第19天停强化致敏。间歇1周后,第26天每只豚鼠以攻击致敏液50μl鼻腔内滴鼻攻击即完成造模。正常对照组同步给予生理盐水刺激。
1.3 组胺激发阈值测定法以pH7.2磷酸缓冲生理盐水溶解组胺,制成101,102,103,104,105,106μg/ml的溶液(以下简称为101,102,103……)。用皮试注射器先各滴1滴101溶液于豚鼠双侧下鼻甲前部粘膜表面,观察30min内有无喷嚏出现。如无则滴102,依次顺推,以引起喷嚏组胺液浓度为组胺激发阈值。若滴至106未出现喷嚏,停止实验,其组胺激发阈值即定为107。每只豚鼠均于实验治疗前后测定其组胺激发阈值。模型对照组和正常对照组组胺激发阈值的2次检验均与治疗组同步进行。
1.4 治疗方法穴位刺血组:常规消毒后,用刺血针于豚鼠双侧"迎香"、"合谷"、"曲池"、"后三里"穴位行快速刺血治疗,以挤出1滴血为度。每日治疗1次,10次为一疗程。
穴位敷贴组:参照李鹏等[2]报道的方法于豚鼠"大椎"、"肺俞"、"膏肓"、"肾俞"、"膻中"穴位给予穴位敷贴白芥子、延胡索、甘遂、丁香、白芷、细辛、生姜汁等中药糊治疗,每次贴敷3h,5天贴1次,3次为一疗程。
BDP治疗组:给予二丙酸氯地米松喷雾剂喷鼻,每日喷1次,连用10天。
3组同步开始治疗,穴位刺血组和BDP组治疗时间一致,穴位敷贴组略为延长。模型对照组和正常对照组不予任何治疗。
2 结果
2.1 造模结果造模组豚鼠在基础致敏阶段无明显的鼻痒(双前足抓挠鼻部行为)、喷嚏、鼻溢等行为和症状,强化性致敏的第3~5天开始,于给药后30min内可见部分豚鼠有不同程度的鼻痒和喷嚏行为,但无明显的鼻溢。第26天攻击液攻击致敏后,全部动物出现典型的变应性鼻炎反应行为和症状。表明豚鼠实验性变应性鼻炎模型建立成功。
2.2 治疗前后组胺激发阈值的变化实验治疗前(即成模后)各实验治疗组组胺激发阈值偏低,与正常对照组比较,显示差异有极显著统计学意义(P<0.01)。但各治疗组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后组胺激发阈值,正常对照组、模型对照组、BDP治疗对照组治疗前后比较差异无统计学意义(P>0.05);穴位刺血组、中药穴位敷贴组治疗前后比较,差异有极显著统计学意义(P<0.01);穴位刺血组、穴位敷贴组与模型对照组治疗后比较,差异有极显著统计学意义(P<0.01),详见表1。
3 讨论
在I型变态反应中,肥大细胞颗粒释放出多种介质,导致临床变态反应病。在这些介质中最重要的是组胺。组胺可引起变应性鼻粘膜炎的全部症状[3]。组胺激发试验反映人为变态反应后期鼻粘膜非特异性的过敏性,也即鼻表1 治疗前后鼻粘膜组胺激发阈值的变化(10珔x±s,μg/ml)组别n鼻粘膜组胺激发阈值治疗前治疗后正常对照组8104.705±1.159104.570±1.168模型对照组8101.929±1.315①101.861±1.525穴位刺血组8101.769±1.461①103.562±1.219②③穴位敷贴组8101.795±1.670①103.386±1.326②③BDP组8101.834±1.278①102.030±1.404注:①治疗前与正常对照组比较P<0.01;②本组治疗前后比较P<0.01;③治疗后与模型对照组比较P<0.01粘膜对组胺的感受性可通过对组胺鼻粘膜激发阈值的测定显示。本实验结果显示,实验性变应性鼻炎模型豚鼠组胺激发阈值明显低于正常对照组,反映模型组豚鼠鼻粘膜对组胺的感受性增高。穴位刺血治疗10天后,组胺激发阈值由101.769±1.461升为103.562±1.219,治疗前后比较,差异有极显著统计学意义(P<0.01),且与模型对照组比较,差异亦有极显著统计学意义(P<0.01)。表明穴位刺血疗法有改善实验性变应性鼻炎豚鼠鼻粘膜非特异的过敏性作用,即有降低鼻粘膜对组胺的敏感性作用。由此推论穴位刺血治疗变应性鼻炎的作用机理,可能与此作用有关。
祖国医学称变应性鼻炎为"鼻鼽",其病机为脾、肺、肾虚及外邪侵袭而致。传统医学治疗鼻鼽的方法多种多样,穴位敷贴疗法文献报道有效率为87.5%~98.9%[4],是一种较好的外治疗法。辛温开窍之药如丁香、细辛等可通过大椎、肺俞、肾俞、膏肓等穴达体内的五脏六腑,通过扶正培元、宣肺开窍起治疗作用。有文献资料表明细辛、干姜等中药还有抗组胺作用[5],故本研究选其作为阳性对照。研究结果显示:穴位刺血疗法与大椎、肺俞等穴位敷贴白芥子、细辛等中药治疗组一样有降低实验性变应性鼻炎鼻粘膜对组胺的敏感性作用,提示两者可能有相似的作用机理。
BDP为人工合成的氢化泼尼松衍生物,属皮质激素类药物,是治疗变应性鼻炎的较有效西药之一。其治疗作用主要是减少变态反应中肥大细胞释放组织胺类物质,同时稳定溶酶体膜,阻止多型核白细胞溶酶体中水解酶的释放,从而产生抗变态反应作用。本实验研究结果显示BDP未有降低豚鼠鼻粘膜对外源组胺的敏感性的作用。
4 参考文献
1 章如新,江德胜,李兆基,等.P物质能神经阻滞剂治疗变应性鼻炎的实验研究.中华耳鼻咽喉科杂志,1994;29(5):283
2 李鹏.穴位敷贴防治过敏性鼻炎疗效观察及机理初探.江西中医药,1989;20(6):10
3 殷明德.变应性鼻炎治疗经验与进展.临床耳鼻咽喉科杂志,1995;9(6):377
4 刘国应.过敏性鼻炎的中医治疗近况.内蒙古中医药,1991;(2):35
5 李玉洁.变态反应性鼻炎治疗近况.友谊医刊,1990;13卷增刊:93(收稿日期:19990106,齐淑兰发技术文
(广西民族医药研究所,南宁530001)
摘 要 以卵清蛋白为致敏原建立豚鼠实验性变应性鼻炎模型,对动物模型给予穴位刺血治疗,并设立穴位中药敷贴、二丙酸氯地米松治疗对照,测定治疗前后各组鼻粘膜组胺激发阈值。结果显示:穴位刺血疗法有提高实验性变应性鼻炎鼻粘膜组胺激发阈值的作用,即能降低实验性变应性鼻炎模型鼻粘膜对组胺的敏感性,效果与中药穴位敷贴治疗对照组一致。
主题词 鼻炎,变应性,常年/针灸疗法 刺血疗法 组胺释放/针灸效应 鼻粘膜/分泌穴位刺血疗法古称刺络疗法,是通过刺破穴位浅表皮肤或小静脉,使之少量出血,以达到祛除病邪、调整机体功能的一种外治法。临床运用其治疗变应性鼻炎效果较满意,为了探讨其治疗变应性鼻炎的作用机理,笔者运用卵清蛋白建立了实验性变应性鼻炎豚鼠模型,探讨了穴位刺血对实验性变应性鼻炎鼻粘膜组胺激发阈值的影响,现报告如下。
1 材料和方法
1.1 动物及分组选择健康Hartely种豚鼠40只,体重350~450g(由卫生部北京生物制品研究所提供)。雌雄各半,随机分为正常对照组(8只)、模型对照组(8只)、穴位刺血组(8只)、中药穴位敷贴对照组(简称穴位敷贴组,8只)、二丙酸氯地米松对照组(简称BDP组,8只)。各组动物同等条件下分笼喂养。
1.2 变应性鼻炎的造模方法变应原的制备:基础致敏液由卵清蛋白(O.V,中国医学科学院血研所提供)30mg作抗原,氢氧化铝粉末(北京化学试剂二厂提供)3g作佐剂,加生理盐水100ml制成混悬液。强化致敏液由O.V250mg加生理盐水100ml制成。攻击致敏液:O.V1g加生理盐水100ml制成。
造模方法:参考章如新等[1]报道的方法并给予改进。实验开始将造模4组豚鼠以基础致敏液1ml腹腔内注射,隔日1次。第14天停基础致敏,改强化致敏,每日每只豚鼠以强化致敏液滴鼻3~4滴,每日1次,共5次,第19天停强化致敏。间歇1周后,第26天每只豚鼠以攻击致敏液50μl鼻腔内滴鼻攻击即完成造模。正常对照组同步给予生理盐水刺激。
1.3 组胺激发阈值测定法以pH7.2磷酸缓冲生理盐水溶解组胺,制成101,102,103,104,105,106μg/ml的溶液(以下简称为101,102,103……)。用皮试注射器先各滴1滴101溶液于豚鼠双侧下鼻甲前部粘膜表面,观察30min内有无喷嚏出现。如无则滴102,依次顺推,以引起喷嚏组胺液浓度为组胺激发阈值。若滴至106未出现喷嚏,停止实验,其组胺激发阈值即定为107。每只豚鼠均于实验治疗前后测定其组胺激发阈值。模型对照组和正常对照组组胺激发阈值的2次检验均与治疗组同步进行。
1.4 治疗方法穴位刺血组:常规消毒后,用刺血针于豚鼠双侧"迎香"、"合谷"、"曲池"、"后三里"穴位行快速刺血治疗,以挤出1滴血为度。每日治疗1次,10次为一疗程。
穴位敷贴组:参照李鹏等[2]报道的方法于豚鼠"大椎"、"肺俞"、"膏肓"、"肾俞"、"膻中"穴位给予穴位敷贴白芥子、延胡索、甘遂、丁香、白芷、细辛、生姜汁等中药糊治疗,每次贴敷3h,5天贴1次,3次为一疗程。
BDP治疗组:给予二丙酸氯地米松喷雾剂喷鼻,每日喷1次,连用10天。
3组同步开始治疗,穴位刺血组和BDP组治疗时间一致,穴位敷贴组略为延长。模型对照组和正常对照组不予任何治疗。
2 结果
2.1 造模结果造模组豚鼠在基础致敏阶段无明显的鼻痒(双前足抓挠鼻部行为)、喷嚏、鼻溢等行为和症状,强化性致敏的第3~5天开始,于给药后30min内可见部分豚鼠有不同程度的鼻痒和喷嚏行为,但无明显的鼻溢。第26天攻击液攻击致敏后,全部动物出现典型的变应性鼻炎反应行为和症状。表明豚鼠实验性变应性鼻炎模型建立成功。
2.2 治疗前后组胺激发阈值的变化实验治疗前(即成模后)各实验治疗组组胺激发阈值偏低,与正常对照组比较,显示差异有极显著统计学意义(P<0.01)。但各治疗组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后组胺激发阈值,正常对照组、模型对照组、BDP治疗对照组治疗前后比较差异无统计学意义(P>0.05);穴位刺血组、中药穴位敷贴组治疗前后比较,差异有极显著统计学意义(P<0.01);穴位刺血组、穴位敷贴组与模型对照组治疗后比较,差异有极显著统计学意义(P<0.01),详见表1。
3 讨论
在I型变态反应中,肥大细胞颗粒释放出多种介质,导致临床变态反应病。在这些介质中最重要的是组胺。组胺可引起变应性鼻粘膜炎的全部症状[3]。组胺激发试验反映人为变态反应后期鼻粘膜非特异性的过敏性,也即鼻表1 治疗前后鼻粘膜组胺激发阈值的变化(10珔x±s,μg/ml)组别n鼻粘膜组胺激发阈值治疗前治疗后正常对照组8104.705±1.159104.570±1.168模型对照组8101.929±1.315①101.861±1.525穴位刺血组8101.769±1.461①103.562±1.219②③穴位敷贴组8101.795±1.670①103.386±1.326②③BDP组8101.834±1.278①102.030±1.404注:①治疗前与正常对照组比较P<0.01;②本组治疗前后比较P<0.01;③治疗后与模型对照组比较P<0.01粘膜对组胺的感受性可通过对组胺鼻粘膜激发阈值的测定显示。本实验结果显示,实验性变应性鼻炎模型豚鼠组胺激发阈值明显低于正常对照组,反映模型组豚鼠鼻粘膜对组胺的感受性增高。穴位刺血治疗10天后,组胺激发阈值由101.769±1.461升为103.562±1.219,治疗前后比较,差异有极显著统计学意义(P<0.01),且与模型对照组比较,差异亦有极显著统计学意义(P<0.01)。表明穴位刺血疗法有改善实验性变应性鼻炎豚鼠鼻粘膜非特异的过敏性作用,即有降低鼻粘膜对组胺的敏感性作用。由此推论穴位刺血治疗变应性鼻炎的作用机理,可能与此作用有关。
祖国医学称变应性鼻炎为"鼻鼽",其病机为脾、肺、肾虚及外邪侵袭而致。传统医学治疗鼻鼽的方法多种多样,穴位敷贴疗法文献报道有效率为87.5%~98.9%[4],是一种较好的外治疗法。辛温开窍之药如丁香、细辛等可通过大椎、肺俞、肾俞、膏肓等穴达体内的五脏六腑,通过扶正培元、宣肺开窍起治疗作用。有文献资料表明细辛、干姜等中药还有抗组胺作用[5],故本研究选其作为阳性对照。研究结果显示:穴位刺血疗法与大椎、肺俞等穴位敷贴白芥子、细辛等中药治疗组一样有降低实验性变应性鼻炎鼻粘膜对组胺的敏感性作用,提示两者可能有相似的作用机理。
BDP为人工合成的氢化泼尼松衍生物,属皮质激素类药物,是治疗变应性鼻炎的较有效西药之一。其治疗作用主要是减少变态反应中肥大细胞释放组织胺类物质,同时稳定溶酶体膜,阻止多型核白细胞溶酶体中水解酶的释放,从而产生抗变态反应作用。本实验研究结果显示BDP未有降低豚鼠鼻粘膜对外源组胺的敏感性的作用。
4 参考文献
1 章如新,江德胜,李兆基,等.P物质能神经阻滞剂治疗变应性鼻炎的实验研究.中华耳鼻咽喉科杂志,1994;29(5):283
2 李鹏.穴位敷贴防治过敏性鼻炎疗效观察及机理初探.江西中医药,1989;20(6):10
3 殷明德.变应性鼻炎治疗经验与进展.临床耳鼻咽喉科杂志,1995;9(6):377
4 刘国应.过敏性鼻炎的中医治疗近况.内蒙古中医药,1991;(2):35
5 李玉洁.变态反应性鼻炎治疗近况.友谊医刊,1990;13卷增刊:93(收稿日期:19990106,齐淑兰发技术文