鸡绿脓杆菌病的流行病学、临床特征、实验室诊断及防控

    张伟宏

    摘要：鸡绿脓杆菌病是由于感染假单胞茵属的绿脓杆菌而引起，雏鸡以及成年鸡可通过外伤感染或者发生败血症，当病菌侵入受精卵后，还会导致胚胎或者刚出壳的雏鸡发生死亡。该病是集约化养鸡场常见的一种疾病，且往往是孵化室容易感染。该病全年任何季节都能够发生，尤其在春季多发。主要特征是急性发病，病程持续时间短，病雏鸡精神极度沉郁，明显腹泻、脱水，皮下发生水肿，机体衰竭，角膜变得混浊，快速死亡，较大损害养鸡户的经济效益。

    关键词：鸡;绿脓杆菌病;流行病学;临床症状;剖检变化;实验室诊断;药物治疗;接种疫苗

    中图分类号：$858.31 文献标识码：B 文章编号：2095-9737（2020）06-0151-02

    1流行病学

    1.1病原

    绿脓杆菌是一种革兰氏阴性菌，菌体长度为1.5～3.O gm，宽度为0.5～0.8gm，生有鞭毛，可自行运动，但不会形成芽孢，可单个散在或呈者短链状排列。该菌一般能够产生绿色的水溶性色素，主要成分为绿脓菌素和荧光素，并伴发明显的果味芳香。该病在土壤、潮湿的环境以及水中普遍存在，具有非常强的抵抗力，对温度、阳光、多种消毒药和抗生素都不敏感。

    绿脓杆菌可分泌较多的致病物质，主要是内毒素、外毒素以及杀白细胞素等物质，往往会引起继发感染。

    1.2易感动物

    各个年龄段的鸡都能够感染发病，尤其是雏鸡以及发生应激或者处于免疫缺乏状态下成年鸡的易感性更高，另外成年母鸡相比于公鸡更易感染。

    1.3发病特点

    该病在全年任何季节都能够发生，其中以春季易发。该病是一种条件致病菌，尤其是混合感染其他病毒时，会导致鸡群对绿脓杆菌的敏感性出现变化。病鸡通常在发病1～3天后出现死亡高峰，发病率和死亡率通常为2%～10%，有时能够达到60%～80%。

    2临床症状

    病雏鸡初期表现出精神萎靡，食欲不振。大部分出现程度不同的下痢，排出淡黄绿色的水样粪便，严重时可见粪便中混杂血丝，泄殖腔四周污染粪便。部分病鸡的眼周围发生程度不同水肿，破裂会有液体流出，干燥后形成结痂，眼睛呈半闭或者全闭，流泪增多。由于下痢导致脱水，机体消瘦，羽毛粗乱、失去光泽。

    3剖检变化

    病鸡皮下存在胶胨样的淡绿色浸润物，严重时水肿处的皮下散布有出血点或者出血斑;实质器官发生程度不同充血、出血。肝脏、脾脏发生肿大，存在出血小点，且肝脏出现淡灰黄色的坏死灶，呈小米粒大小;心内外膜存在出血斑点;肾脏发生肿大，表面散布有出血小点;肺脏发生充血，有时存在出血点;气囊增厚、变得混浊;小肠黏膜发生严重充血、出血。

    4实验室诊断

    4.1涂片镜检

    无菌条件下取病死鸡的心血、肝脏、脾脏等病料制成涂片，通过革兰氏染色、镜检，可发现革兰氏阴性小杆菌，菌体两端钝圆，没有荚膜，不会形成芽孢，往往单个散在。

    4.2细菌培养

    無菌条件下取病死鸡的肝脏、脾脏和水肿液等病料在普通营养琼脂上接种，放人37～C恒温箱中进行24h培养，可见培养基上长出稍隆起的菌落，边缘不整齐，表面湿润、光滑，菌落以及四周培养基都呈明显的绿色，将平皿盖打开后可闻到明显的芳香气味。挑取菌落进行革兰氏染色、镜检，能够看到散布的革兰氏阴性杆菌，菌体两端钝圆。

    4.3生化试验

    挑取典型菌落接种于肉汤培养物中进行纯培养，然后取24h肉汤培养物进行生化试验，要求所有试验都在37℃恒温条件下进行。结果发现，该菌可使葡萄糖、甘露糖分解，产酸但不产气;无法使蔗糖、麦芽糖、乳糖分解;枸橼酸盐试验、明胶液化试验都呈阳性，靛基质试验、硫化氢试验、吲哚试验、乙酰甲基甲醇（V-P）试验以及甲基红（M.R）试验都呈阴性。

    4.4血清型鉴定

    选取48h马丁肉汤液体培养基的培养物滴在载玻片上，与相应的B型、C型、G型阳性血清进行凝集实验，根据是否发生凝集判定血清型。

    4.5动物实验

    取24h马丁肉汤培养液，给5只7日龄SPF鸡腹腔接种，每只0.3mL，同时取2只SPF鸡作为空白对照，接种等量的生理盐水，经过3天可见实验鸡都发生死亡，并可从皮下、肝脏、心脏分离得到绿脓杆菌。

    4.6药敏试验

    取典型菌株的纯培养物，用接种环（经过火焰灭菌）的挑取适量的细菌培养物，在平皿培养基上以划线方式涂布。然后将镊子略停于酒精灯火焰上进行灭菌，取直径为6mm的药敏片贴在平皿培养基表面，注意每种药物的药敏试验都要设置3个重复。为确保能够准确地观察试验结果，要求在平皿培养基上有规律地的放置药敏片。然后将平皿培养基放在37℃温箱中进行24h培养，测量抑菌圈直径并计算平均值，据此确定敏感药物。

    5防控措施

    5.1药物治疗

    方案1：每只病鸡可肌肉注射4000～5000IU庆大霉素，每天1次，连续使用3天，同时提供足够的饮水。

    方案2：每只病鸡肌肉注射4000～5000IU环丙沙星，每天1次，连续使用3天，同时提供足够的饮水。

    方案3：在饮水中添加40000～80000IU/L庆大霉素混饮，连续使用3天。

    辅助治疗，即在按照以上方案治疗的同时，在饲料中添加适量的黄芪多糖、电解多维或者维生素A、维生素D等。

    5.2合理接种

    父母代种鸡场、刚孵出的雏鸡在免疫注射马立克氏病疫苗时，注意对配制及注射疫苗时使用的所有设备进行严格消毒，防止通过这一途径导致鸡感染病原菌，从而有效避免在接种疫苗时感染鸡绿脓杆菌病。

    5.3严格消毒

    对鸡舍、种蛋、孵化室、孵化器以及孵化环境都要进行严格消毒，并确保进入孵化室的工作人员也经过消毒。

    消毒常用碘酸混合溶液（即三碘氧化物消毒剂，含碘量为3%），渗透性非常强大，彻底杀死细菌、病毒、芽孢以及霉菌，且药效持久。一般手术器械可用1：3～6比例稀释的消毒液浸泡，种蛋、鸡舍、饲养器具消毒可用按1：100～200比例稀释的消毒液后进行喷洒或者冲洗。