茶多酚的测定及饲用效果研究进展

张哲 付柯 杨敏
摘要:茶多酚具有多种生理功效,作为饲料添加剂能够有效的增强禽畜的免疫力,提高动物生产性能,还能达到不同程度的除臭作用,改善饲养环境。本文简要介绍了几种主要的茶多酚测定方法,重点综述了其饲用效果,对饲用中存在的问题进行探讨。
关键字:茶多酚;测定;饲用效果;
前言
畜牧业的长足发展需要饲料工业作坚强后盾,天然绿色饲料添加剂能够有效保障饲料的营养价值及饲用安全性能。茶多酚具有多种生理功效,作为饲料添加剂饲养效果较好,能有效清除动物体内的自由基、改善肠道微生物结构进而促进消化,抑制和杀灭病原微生物,提高动物的生产性能,延长饲料的保质期,同时还能增强动物的免疫力。本文对茶多酚的测定方法及饲用效果进行综述,展望了其在饲料工业中的应用前景,旨在为茶多酚在饲料工业的长远发展提供参考。
1 茶多酚的测定方法
茶多酚含量的高低直接影响饲用效果,其含量的测定也能适时的反应饲料品质,因此建立高效、快捷的茶多酚含量检测方法尤为重要。目前茶多酚检测方法应用最多且测定结果较好的属紫外分光光度法、高效液相色谱法和电化学分析法。
1.1 紫外分光光度法
紫外分光光度法以朗伯-比尔定律为基础,被测物质经过紫外辐射后分子中价电子能级跃迁,在特定波长处或一定波长范围内能对紫外光进行吸收,根据吸光度与被测物质浓度之间的线性关系进行定量分析。
茶多酚在进行紫外分光光度法测定之前要进行显色反应,多用酒石酸亚铁比色法和福林酚比色法。茶多酚结构中的酚羟基与二甲铁离子反应生成蓝紫色络合物,在540nm处测定吸光度再计算含量,但研究发现酒石酸亚铁显色测定茶多酚含量一般比福林酚显色高出百分之三十左右,究其原因,茶多酚中的多种酚类化合物对测定结果有一定的干扰,因此适用于成分单一的茶多酚的检测。福林酚法主要利用福林酚的强氧化性,与茶多酚反应变蓝,在765nm处进行检测,福林酚一般还用于蛋白质的检测中,用福林酚法显色,并不能真正的区分饲料中的茶多酚和蛋白质,因此检测时首先要除蛋白。紫外分光光度法由于高效快捷、重现性好等优点成为茶多酚的常用检测方法,用于饲料中茶多酚的检测应采用福林酚法显色,可信度高。
1.2 高效液相色谱法
混合物流经固相时发生力的作用,各物质在结构及性质上的不同和与固相发生作用大小有所差异,高效液相色谱法正是借助于这种推动力使不同组分进行分离并测定。高效液相色谱法(HPLC)选择性高并且可以排除茶多酚显色时带入体系中的杂质对测定结果的影响,得到茶多酚的绝对含量,精确度高,用于饲料中茶多酚含量测定效果好。
高效液相色谱法测定茶多酚,在色谱柱为Kromasil C18、流动相为乙酸:甲醇:N,N-二基甲酰胺:水=1:1:40:58(V/V) 、色谱柱温30℃、进样量10μL、检测器为紫外检测器、检测波长280.0nm 的色谱条件下对绿茶中茶多酚含量进行测定,变异系数小于3.04%,回收率为 99.16%~100.60%,测定方法简便、准确。
1.3 电化学分析法
电化学分析法是根据溶液中物质的电化学性质及其变化规律,建立在以电位、电导、电流和电量等电参数与被测物质浓度间存在一定关系的基础之上,对组分进行定性定量的仪器分析方法。电化学分析方法,主要有毛细管电泳测定法和示波电位法,毛细管电泳测定法是指溶质以电场为推动力,在毛细管中按淌度差异而实现组分的分离及测定。电化学分析法测定茶多酚最大的优势就是检测设备成本低,用于饲料行业可行性好。
电化学分析法操作简单,分离效率高,速度快,用于多酚的分离检测发展较快,近年来相关报道不断增多。郑阿萍等研究了磷钼酸在缓冲溶液中的电化学行为以及对茶多酚的电催化活性,检测结果表明磷钼酸对溶液中茶多酚的氧化反应具有良好的催化活性,此法测定茶多酚快速、简便、准确,为茶多酚的快速检测提供了理论依据。朱丹以自制的玻碳工作电极在茶多酚的测定中进行应用,结果表明茶多酚含量测定的重复性和准确性好,与国标福林酚法相比检测时间大幅度缩短,其他并无显著性差异。
2 茶多酚的饲用效果
2.1 提高生产性能
饲粮中添加茶多酚能够一定程度地提高畜禽生产性能,改善畜产品品质。饲粮中添加100-200mg/kg茶多酚,其能够减少蛋黄中脂质过氧化物的形成,降低鸡蛋中的胆固醇和丙二醛含量,增加蛋黄中脂质的稳定性,有利于鸡蛋的保鲜,延长了鸡蛋的货架期。茶多酚还能够在一定程度上提高蛋重,100mg/kg为最佳添加量。
楼洪兴等的饲养效果表明,日粮中添加不同剂量茶多酚对蛋鸡产蛋率和饲料利用率有一定的改善,但未见随茶多酚添加水平的升高而提高的趋势。日粮中添加0.1%茶多酚可提高蛋黄中VE和VA含量,添加0.025%茶多酚降低蛋黄中胆固醇,茶多酚对全蛋中含硫氨基酸有增高趋势,重金属指标符合无公害鸡蛋要求;产蛋后期日粮中添加0.025%~0.1%茶多酚可降低破软蛋率。日粮中添加0.4%茶多酚分别降46周龄蛋鸡血清总胆固醇19.65%、甘油三醑19.99%、低密度脂蛋白7.69%,提高高密度脂蛋白45.35%,对蛋鸡血脂指标影响不显著。
茶多酚具有清自由基抗氧化等作用,改善肠道微生物结构进而促进消化,减少了动物机体内多余脂肪的积累,提高肉质,保证生物体内细胞结构和功能的完整性。以不同剂量的茶多酚复合添加剂加入动物日粮中,通过三个月的试验观察,监测生长性能,全部屠杀测定肉质特性,结果显示0.1%的茶多酚添加量能显著提高日增质量,极显著的提高猪肉pH值。0.3%的茶多酚添加量能极显著提高日增质量、猪肉pH值和失水率,剂量再增大,作用效果基本不变,所以实际喂养时应以0.3%的剂量为参考标准。
2.2 改善肉质
维生素E是肌细胞内非酶促系统抗氧化剂,能抑制磷脂酶的活性,从而阻断了脂质过氧化。茶多酚与维生素E协同作用能增强抗氧化功效。蔡海莹等用体重约28Kg左右的杜×长×大三元杂交肥育猪40头,通过在日粮中添加不同浓度的茶多酚和维生素E,检测100kg左右猪胴体眼肌肉样的肉质常规和生化指标,研究饲料中茶多酚对维生素E的增效作用以及茶多酚和维生素E改善猪肉质的协同作用。结果表明:一定浓度的茶多酚能提高猪肉维生素E的含量;荼多酚和维生素E有稳定猪肉色、提高猪肌肉系水力和抗氧化的协同作用,其中饲料200 mg/kg维生素E基础上添加茶多酚300mg/kg效果最佳。
要全面考察茶多酚对猪肉质的影响,要对不同生长阶段及不同品质的猪进行喂养试验及肉质测定。日粮中添加一定配比的茶多酚与肉质改善剂对肥育猪饲料效率及肉质有较明显的改善作用。在断奶仔猪日粮中使用,减轻了仔猪断奶的不良应激,保证仔猪较快生长,并能获得较好的饲料转化效率和饲养效率。在育肥猪日粮中添加1.0%的茶多酚复合添加剂明显改善肉色,添加0.5%和1.0%的茶多酚复合添加剂对肌内脂肪含量和嫩度均有改善作用。
李丽评估添加茶多酚对高酒糟(DDGS)日粮肉鸡生产性能和抗氧化特性的影响,肉仔鸡后期日粮中添加15%DDGS对生产性能无显著影响,但降低了肉仔鸡机体及肌肉的抗氧化(T-AOC)水平和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH.Px)活性,在15%DDGS型肉鸡日粮中添加300 mg/kg以上的TP可以抑制肉仔鸡肌肉的脂质过氧化。添加茶多酚提高了血液的T-AOC和GSH.Px活性,随着茶多酚添加剂量的升高,T-AOC和GSH.Px有升高的趋势,但各水平组之间差异不显著。
2.3 提高免疫抵抗力
机体的抗氧化能力的强弱反应了其抵抗力和健康状况,抗氧化作用一般主要通过消除自由基和活性氧以免引发脂质过氧化,分解过氧化氢,阻断过氧化链,除去催化作用的金属离子等途径来实现。日粮中添加茶多酚能提高猪肌肉总抗氧化能力,其效果以添加以300~400mg/kg较好;在一定的浓度条件下,茶多酚有利于提高生长肥育猪的免疫机能,并对降低生长猪的腹泻率有一定的作用。
茶多酚可以刺激淋巴细胞分裂后发生转化,通常以其转化率的高低来衡量淋巴细胞的功能状态与机体的免疫状况,还可以刺激淋巴细胞分泌细胞因子,从而增强机体的抵抗力。国外研究者在猪受到刀豆凝集素应激时,将1%的茶多酚添加入猪日粮中,饲养结果显示,脾脏细胞和IL-6水平增加。在受到脂多糖应激时,脾脏细胞和抗肿瘤坏死因子水平相应增加,猪的体液免疫功能增强。
李永义等采用Diquat诱导仔猪氧化应激,考察茶多酚(TP)对应激仔猪生长性能和免疫功能的影响。饲养对比结果表明,氧化应激降低仔猪生长性能和免疫功能,添加TP能缓解应激对仔猪生长性能和免疫功能的抑制。
茶多酚通过调节免疫球蛋白的量和活性,实现抑制或杀灭各种病原体,增强机体的免疫力作用。张建伟等建立大强度耐力训练动物模型,测定小鼠腹腔巨噬细胞和淋巴细胞增殖能力、脾T淋巴细胞的CD3+、CD4+、CD8+细胞比率和血清SIgA、IgM和IgG。结果表明茶多酚组与运动组比较,小鼠腹腔巨噬细胞和淋巴细胞增殖能力显著增强,脾T淋巴细胞的CD3+、CD4+、CD8+细胞比率显著增加,血清SIgA、IgM和IgG含量显著增加,证明茶多酚具有提高力竭小鼠免疫力的作用。
2.4 改善饲养环境
家禽粪便的清洁处理一直以来是养殖业的头疼问题,茶多酚具有一定的杀菌作用,其结构式上的酚羟基与菌体内的二氢叶酸合成酶肽键上的氨基酸残基作用,使二氢叶酸合成酶失活,从而影响细菌的核酸合成,使细菌的生长繁殖受到抑制,同时能促进有益菌群生长、调整肠道微生态环境,降低粪便臭味,从根源上解决禽畜粪便的处理问题,改善饲养环境。
除了杀菌作用外,茶多酚强的吸附作用也促进了除臭效果。国外的研究结果表明在仔猪的日粮中加入茶多酚喂养一个月,从第二周开始,仔猪粪便中的乳酸杆菌数量增加,抑制了粪便中细菌的增长,梭状杆菌磷酸酯酶的检出率下降,使仔猪粪便发臭的对甲酚和类酚的含量降低,短链脂肪酸和乳酸菌数量显著增加,pH值略有下降,臭味明显减小。
结语
近年来由于激素类饲料添加剂的大量应用导致多种疾病的发生,家禽的免疫抵抗力也降低,多发疾病不仅增加了饲养成本,还不时的引发食用恐慌,要从根本上解决此类问题,首先应该加强饲料添加剂的安全使用教育,此外寻求天然绿色饲料添加剂也迫在眉睫。
茶叶多酚可以降低血糖和胆固醇含量,改变动物体内代谢,改善动物肉质,对于提高畜禽肉产品的质量起到积极作用。我国是畜牧大国,饲料需求量大,激素类饲料添加剂的危害随着饲养过程不断凸显,天然绿色饲料添加剂成为新宠。茶多酚作为饲料添加剂应用还存在几个问题:
(1)茶多酚的饲用添加剂量要进行实际探索及控制,与维生素E协同作用会增强抗氧化活性,因此茶多酚与其他饲料添加剂的复合使用效果应该进行更多探索。
(2)茶多酚结构中的大量酚羟基易与饲料中的微量金属元素螯合,降低其吸收率,应该尽量避免同时饲用。
我国茶叶资源丰富,饮用后的茶叶及低档茶叶均可作为饲用多酚的提取原料,随着科研工作者对茶多酚的饲用价值的深入研究,茶多酚在饲料工业中的应用将会越来越广泛。
(参考文献略)