《厚朴饮片标准汤剂的制备及质量标准研究》-理学论文，中医中药论文-论文范文参考-科学狗论文网

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厚朴饮片标准汤剂的制备及质量标准研究

范文

吕玲玲谢松张凯媛郑岚

摘要?目的：为建立厚朴饮片标准汤剂的制备方法，并进行质量标准研究。方法：采用标准化工艺制备标准汤剂，制备15批次不同产地的厚朴饮片标准汤剂，以厚朴酚和和厚朴酚作为定量检测指标，并进行转移率、出膏率计算及指纹图谱研究，并建立其分析方法。结果：15批次厚朴样品制成的标准汤剂中，厚朴饮片的标准汤剂的出膏率在7.13%～12.60%之间，平均值为10.65%;厚朴酚的转移率在2.75%～4.44%之间，平均值为3.47%;和厚朴酚的转移率在6.09%～9.62%之间，平均值为7.25%。采用软件《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》进行厚朴样品的特征图谱进行分析，对15批厚朴饮片及标准汤剂进行相似度评价，其相似度均大于0.9。结论：本研究中的样品处理方法简单易行、重复性好，可用于厚朴标准汤剂的制备及质量标准研究。

关键词?厚朴饮片;标准汤剂;质量标准;制备工艺;厚朴酚

Abstract?Objective：To establish the preparation method of standard decoction of Houpo Decoction pieces and to study the quality standard.Methods：Standard decoction was prepared by standardized process，and 15 batches of standard decoction of Houpo Decoction pieces from different regions were prepared.Magnolol and honokiol were used as quantitative detection indicators，and the transfer rate，paste rate calculation and fingerprint spectrum research were carried out，and the analysis method was established.Results：Among the standard decoctions made from 15 batches of Cortex Magnoliae Officinalis samples，the paste rate of the standard decoction of Cortex Magnoliae Officinalis was 7.13%～12.60%，with an average of 10.65%; the transfer rate of magnolol was 2.75%～4.44%，the average was 3.47%; the transfer rate of Cortex Magnoliae Officinalis was between 6.09%～9.62%，and the average was 7.25%.The software “Chinese Medicine Chromatographic Fingerprint Similarity Evaluation System” was used to analyze the characteristic maps of Cortex Magnoliae Officinalis samples，and 15 batches of Houpo Decoction pieces and standard decoctions were evaluated for similarity.The similarities were all greater than 0.9.Conclusion：The sample treatment method in this study is simple，feasible，which can be used for preparation and quality standard study of Cortex Magnoliae Officinalis standard decoction.

Keywords?Houpo Decoction pieces; Standard decoction; Quality standard;Preparation process;Magnolol

中圖分类号：R284.1文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2020.21.008

厚朴中药材为木兰科植物厚朴或凹叶厚朴的枝皮、干燥干皮及根皮，具有燥湿消痰、下气除满的功效，在我国已经有两千多年的药用历史。本文重在开展厚朴标准汤剂的研究，以期建立合理的厚朴饮片标准汤剂质量标准。

1?仪器与试药

1.1?仪器?超高效液相色谱仪（Waters公司，美国，型号：Waters Acquity）;精密天平（梅特勒-托利多公司，瑞士，型号：PB1501-N）;数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司，型号：KQ-500DE）;冷冻干燥机（北京博医康实验仪器有限公司，型号：FD-1A-50）;旋转蒸发器（上海予华仪器有限公司，型号：DLSB）;色谱柱（4.6 mm×100 mm，2.7 μm）（Agilent公司，美国，型号：Poroshell 120 EC-C18）;实验室级超纯水器（南京易普易达科技发展有限公司，型号：EPED-E2-10TF）;色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）（美国Agilent公司，型号：Eclipse plus C18）。

1.2?试剂?甲醇（AR，上海泰坦科技有限公司，批号：P1689731），甲醇（色谱级，美国ACS，批号：MA1292G），厚朴酚的对照品（纯度98.8%，中国食品药品检定研究院，批号：110729-201511），和厚朴酚的对照品（纯度99.3%，中国食品药品检定研究院，批号：110730-201614）。

1.3?样品?本研究采用厚朴饮片共15批，分别产自湖北、福建、湖南、重庆、四川5个省份，所购15批厚朴饮片均为厚朴的干燥树皮。见表1。

2?方法与结果

2.1?厚朴饮片的水分，灰分和酸不溶性灰分测定?按照《中华人民共和国药典》（2015版）（以下简称《药典》）通则0832第四法来测定15批厚朴饮片中的水分：含水量为8.31%～12.59%，平均含水量为10.05%，结果表明15批厚朴饮片含水量均小于15%，符合规定[1-2]。见表2。按照《药典》通则2302来测定15批厚朴饮片中的总灰分：总灰分为4.15%～6.90%，平均总灰分为5.37%，结果表明15批厚朴饮片总灰分均小于7%，符合规定。见表2。按照《药典》通则2302来测定15批厚朴饮片中的酸不溶性灰分，得酸不溶性灰分为0.94%～2.15%，平均酸不溶性灰分为1.42%，结果表明15批样品酸不溶性灰分均小于3%，符合规定。见表2。

2.2?厚朴饮片中厚朴酚和和厚朴酚的含量测定?根据《药典》含量测定的方法，采用Eclipse plus C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μ m）[3]，测定15批厚朴饮片中厚朴酚和和厚朴酚的含量，其中厚朴酚的含量为1.40%～2.43%，平均值为1.85%;和厚朴酚含量为1.50%～3.99%，平均值为2.37%;二者总含量为3.02%～6.01%，平均值为4.23%。结果表明15批样品厚朴酚和和厚朴酚总含量均大于2%符合规定。见表3。

2.3?厚朴饮片标准汤剂的制备?取厚朴饮片120 g，加入10倍量的去离子水浸泡30 min后，加热至微沸并保持30 min，趁热过滤，再加入8倍量的去离子水，加热并保持微沸20 min，趁热过滤。合并2次滤液，50 ℃下减压浓缩至300 mL左右后，预冷过夜，冻干既得厚朴饮片标准汤剂粉末，并计算各批次厚朴饮片出膏率。平行2次[4]。

2.4?厚朴饮片标准汤剂中厚朴酚和和厚朴酚的含量测定

2.4.1?色谱条件?按照《药典》含量测定的色谱条件，色谱柱Eclipse plus C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），流动相为甲醇∶水=78∶22，柱温为35 ℃，流速为0.8 mL/min，检测波长294 nm，进样量4 μL[5]。在此条件下，厚朴酚和和厚朴酚分离良好。见图1。

2.4.2?供试品制备方法建立?由于厚朴酚和和厚朴酚极性较弱，冷却过程会有所析出，影响测定结果的准确性，本文采用《药典》含量测定所用溶剂——纯甲醇对标准汤剂粉末进行复溶，以保证厚朴酚和和厚朴酚能够完全溶解，保证结果的准确性。精密称定厚朴饮片标准汤剂的粉末0.2 g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇25 mL，摇匀，密塞，浸溃24 h，滤过，摇匀，即得。

2.4.3?对照品制备?分别适量取厚朴酚和和厚朴酚的对照品，精密称定，加甲醇制成每1 mL含厚朴酚500 μg、和厚朴酚500 μg的溶液。

2.4.4?线性关系考察?取“2.4.3”中对照品溶液，用纯甲醇分别稀释成每1 mL含对照品500、250、250、100、50、25、10、1 μg的溶液，按照“2.4.1”项下方法进样，测定厚朴酚和和厚朴酚的峰面积，绘制标准曲线，其中横坐标为浓度，纵坐标为峰面积。厚朴酚Y=9.423 6X+3.809 9（R2=0.999 0），线性范围为1～500 μg/mL;和厚朴酚Y=9.670 9X+18.684 9（R2=0.999 3），线性范围为1～500 μg/mL[6]。

2.4.5?精密度实验?取同一批厚朴饮片标准汤剂粉末（HP-01），供试品溶液制备方法按“2.4.2”，色谱条件方法按“2.4.1”，连续进样6次。计算供试品溶液中厚朴酚和和厚朴酚的峰面积，得到RSD分别为1.00%和1.12%，说明精密度良好[6-8]。

2.4.6?重复性实验?采取步骤“2.4.5”方法，计算供试品溶液中厚朴酚和和厚朴酚的峰面积，得到RSD分别为1.97%和1.23%，说明该方法的重复性良好。

2.4.7?稳定性实验?采取步骤“2.4.5”方法，分别在0、2、4、8、12、24 h进样，计算供试品溶液中厚朴酚和和厚朴酚的峰面积RSD分别为2.20%和1.52%，说明供试品溶液24 h内稳定[9-11]。

2.4.8?回收试验?取已知含量的厚朴饮片标准汤剂的粉末（HP-01）0.1 g，按1∶1添加混合对照品（厚朴酚0.48 mg，和厚朴酚0.79 mg）制备供试品溶液，平行六次，色谱条件方法测定，得到供试品溶液中厚朴酚和和厚朴酚的加样回收率平均分别为101.25%和98.16%，RSD分别为0.26%和0.43%，说明该方法的准确度较好。

2.4.9?样品测定及转移率计算?取各批次厚朴饮片标准汤剂粉末，步骤方法同“2.4.5”，测定15个批次，每批次平行2份，外标一点法得到厚朴酚和和厚朴酚含量。厚朴饮片的标准湯剂的出膏率在7.13%～12.60%之间，平均值为10.65%;厚朴酚的转移率在2.75%～4.44%之间，平均值为3.47%;和厚朴酚的转移率在6.09%～9.62%之间，平均值为7.25%。见表4。

2.5?指纹图谱的建立

2.5.1?色谱条件建立?对不同流动相、流速、柱温和波长进行了考察，最终确定色谱条件如下：

Poroshell 120 EC-C18（4.6 mm×100 mm，2.7 μm）色谱柱，流速0.5 mL/min，检测波长265 nm，柱温40 ℃，进样量：4 μL;流动相为0.1%磷酸（A）-甲醇（B），梯度洗脱程序，B：0～20 min，14%～35%;20～25 min，35%～85%;25～32 min，85%。对照品和供试品谱图如图2[12-13]。

2.5.2?供试品制备方法建立?对标准汤剂粉末的提取溶剂（纯水、20%甲醇、40%甲醇、50%甲醇、60%甲醇、80%甲醇、纯甲醇）进行了考察，综合考虑峰的数目及峰形，最终确定为50%甲醇。

精密称定厚朴饮片标准汤剂的粉末0.2 g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇25 mL，摇匀，密塞，浸溃24 h，滤过，摇匀，即得。

2.5.3?精密度实验?取厚朴饮片标准汤剂粉末（HP-10），按“2.5.2”制备供试品溶液，色谱条件方法按“2.5.1”，连续进样6次。以厚朴酚峰（8号峰）为参比，结果显示各峰相对保留时间RSD<0.10%，相对峰面积RSD<1.78%，说明该指纹图谱方法的精密度良好。

2.5.4?重复性实验?取厚朴饮片标准汤剂粉末（HP-10），按“2.5.2”制备供试品溶液，平行六次，按“2.5.1”下色谱条件方法进样。以厚朴酚峰（8号峰）为参照峰，结果显示各峰相对保留时间RSD<0.70%，相对峰面积RSD<2.56%，说明该指纹图谱方法的重复性良好。

2.5.5?稳定性实验?取厚朴饮片标准汤剂粉末（HP-10），按“2.5.2”制备供试品溶液，按“2.5.1”下色谱条件方法，分别在0，、2、4、8、12、24 h进样。以厚朴酚峰为参照峰，计算各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD，结果表明各峰相对保留时间RSD<1.30%，相对峰面积RSD<3.01%，说明该方法性质稳定。

2.5.6?样品测定及分析?取各批次厚朴饮片标准汤剂粉末，步骤方法同上，记录色谱图，导入2012版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》软件，设置时间窗口为0.1 min，以中位数的方式生成对照指纹图谱。见图3。相似度结果见表5。结果表明，15批厚朴饮片来源于不同产地，其相似度有所差异，但相似度均大于0.9，说明各批次的厚朴饮片相似度良好。

3?讨论

中药饮片标准汤剂，可谓对传统煎煮的中药汤剂的传承和创新，其标准参照体系主要从3个参数进行表征：出膏率、有效（或指标）成分的含量测定及转移率、指纹或特征图谱等分析[14]。本试验以15批次厚朴饮片的标准汤剂为研究对象，通过测定其指标成分厚朴酚和和厚朴酚的含量、转移率、及标准汤剂的出膏率，确定各参数的变化范围，方法学考察均符合要求，表明本方法稳定可行、重复性良好，为中药配方颗粒质量控制提供了基础数据，更好的完成中药质量标准控制。

本试验建立了厚朴饮片标准汤剂的含量测定方法及特征图谱分析方法，能够较全面地反映厚朴饮片的内在质量，可为厚朴配方颗粒的质控和评价提供參考[15]。

中药饮片质量标准研究的研究系统深入，逐步推广应用于临床，可为中药饮片制备标准规范化研究奠定基础，并有效的提高中医药治疗的临床疗效，具有重要意义。

参考文献

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（2019-11-26收稿?责任编辑：王明）

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