| 标题 | 质壁分离操作技术 |
| 范文 | 黄卫华 【摘 要】本文介绍了质壁分离技能高考的内容，考核知识点与技能要求，提出了学生操作时易发生的问题以及提高质壁分离技术的措施。 【关键词】质壁分离；学生技能；培养 【中图分类号】G633.91 【文献标识码】A 【文章编号】2095-3089（2018）12-0101-01 16年来，《洋葱鳞片表皮细胞质壁分离临时装片的制作与观察》新增为江苏省对口单招农业类专业技能高考项目。根据江苏省普通高校对口单独招生农业类专业技能考试标准，《洋葱鳞片表皮细胞质壁分离临时装片的制作与观察》主要包括临时装片的制作（30分）、显微镜使用（35分）、生物绘图（20分）、熟练程度（15分）等四个部分。高考时间为30分钟，总分为100分。一、高考内容、考核知识点与技能要求 1.临时装片制作。 按照临时装片制作的技术要求完成擦皿、取材、浸泡、擦玻、滴糖、展片、制片等七个步骤全过程（具体略）。 2.显微镜使用。 按照显微镜使用的技术要求完成擦镜、对光、装片、低倍镜观察、高倍镜观察等五个步骤全过程（具体略）。 3.生物绘图。 要求绘出高倍镜下观察到的细胞质壁分离状态（至少三个细胞），标注出观察到的其中一个的细胞。二、学生操作时易发生的问题 1.临时装片制作时易发生的问题。 （1）擦培养皿：①取培养皿动作大、声响大或损坏培养皿；②培养皿擦拭不干净，放置位置不妥。 （2）撕取材料：①撕取洋葱内表皮或颜色较浅部位外表皮；②撕取的洋葱外表皮边缘不整齐、过大或过小；③未用刀片划取，直接用镊子撕取。 （3）浸泡材料 ：①洋葱鳞片叶外表皮小块浮于蔗糖溶液上；②洋葱外表皮小块未展平或部分重叠；③镊子或解剖针处理时，破损洋葱小块。 （4）擦拭玻片：①用手直接拿在载玻片、盖玻片的正反面；②玻片整体不干净或部分不干净；③夹取或擦拭盖玻片用力过大，导致盖玻片碎裂；④擦拭后的盖玻片随意放置。 （5）滴加蔗糖溶液：①在载玻片上滴加的蔗糖溶液过多或过少；②滴加的液滴不圆润；③载玻片擦拭不干净，液滴扩散不圆润。 （6）展片：①洋葱小块浸泡时间过长或过短；②洋葱外表皮未完全浸润在液滴中；③洋葱外表皮未展平，有折皱；④洋葱外表皮放置倾斜，不水平。 （7）制片 ：①直接把盖玻片整个盖在洋葱表皮上；②洋葱外表皮倾斜，没有扶正；③盖玻片倾斜，没有位于载玻片正中；④溢出的液滴，没有用吸水纸吸取，整个装片不干洁；⑤装片中有气泡，没有排出。 2.显微镜使用时易发生的问题。 （1）擦镜：①忘记用擦镜纸擦目镜、物镜、反光镜等；②忘记用干净的抹布擦镜臂、载物台、镜座等。 （2）对光：①没有打开电源开关或未通电；②视野的明亮度不适宜：过暗或过亮；③双目显微镜的左右视野未完全吻合；④聚光镜孔径光阑调节杆没有拨至10×数字。 （3）放片：①标本夹弹片压在装片上面；②不会使用纵、横向移动手轮调整装片；③装片中的观察目标未调到光路中央。 （4）低倍镜观察：①未换用10×物镜聚焦；②不是通过旋转转换器调用低倍物镜，用手指转动低倍镜镜头；③未调聚光镜孔径光阑至10×数字；④未旋转粗调焦手轮上升载物台；⑤不用微调节手轮、或图像不清楚；⑥未将观察目标调至视场中央。 （5）高倍镜观察：①不是通过旋转转换器调用高倍物镜，用手指转动高倍镜镜头；②未调聚光镜孔径光阑至40×数字；③不用微调节手轮、或图像不清楚；④未将观察目标调至视场中央；⑸高倍镜下视野较暗，不会调节亮度。 3.生物绘图时易发生的问题。 （1）所绘图大小与实际不符。 （2）没有画圆，没有标注细胞的各部分名称。 （3）细胞线条反复擦改。 （4）没有至少绘出3个相邻完整的细胞，或其他细胞轮廓不完整。 （5）线条断断续续，不是一笔画成；或线条连接点明显。 （6）细胞膜、液泡膜等用完整的线条画出。 （7）画点时，铅笔倾斜，点画成短线条。 （8）点的稀疏与视野内的亮暗不符。 （9）各引出线之间不等距，细胞名称没有右对齐。 （10）标注不齐全，文字潦草。 （11）绘图没有左右对称，影响整幅图的效果；⑿图的下方没有标注图的名称。 4.整理与清洁桌面。 （1）未先降低灯泡亮度，后关闭电源。 （2）沒有把高倍镜还原到低倍镜。 （3）没有清洁台面、或台面清理不干净。三、提高质壁分离操作技术的一些措施 1.制作临时装片（30分）。 （1）擦培养皿：取一个培养皿，用吸水纸擦拭干净，在里面滴加2～3滴蔗糖溶液，斜靠在另一个培养皿上。 （2）撕取材料：靠洋葱顶端下侧，用刀片划约5×3mm大小的洋葱鳞片叶外表皮一块，置于蔗糖溶液的培养皿中，浸泡1～2分钟。 （3）擦拭玻片：用左手的食指和拇指夹住载玻片的长边，右手用吸水纸包住载玻片，均匀擦拭，直至擦拭干净。擦拭盖玻片的方法类似，擦拭后放置于载玻片的一侧边缘，外露一小部分。 （4）滴加蔗糖溶液：将载玻片水平放置于实验台上，在中央偏左滴加一滴蔗糖溶液。 （5）展片：用镊子把培养皿中浸泡过的洋葱外表皮小块放入载玻片上的蔗糖溶液中，并把它展平。 （6）制片：用镊子夹起盖玻片，使其一边先接触载玻片上蔗糖溶液的一侧，然后缓缓地放下。 （7）检查：检查所做装片是否美观。若盖片后有液滴溢出，则用吸水纸吸取多余的液滴；若装片中有气泡，则左手持镊子抵住盖玻片左侧，右手持解剖针，从右侧轻轻掀起盖玻片，然后缓缓放下，若气泡较多，则可重复几次；若洋葱表皮小块倾斜，可在掀起盖玻片时，用解剖针挑正。 2.显微镜使用（35分）。 （1）擦镜：用擦镜纸擦目镜、物镜、反光镜等，用抹布擦镜臂、镜座、载物台等。 （2）对光：旋转转换器，将10×物镜移至光路，再将聚光镜孔径光阑调节杆拨至10×数字。打开电源开关，缓缓旋转亮度旋钮调节视场的明亮度适宜，调节双目镜镜筒转座至左右视场完全吻合。 （3）放片：把制作好的临时装片放在载物台上，将装片固定住。转动纵、横向移动手轮，把装片中的洋葱小块调至光路中央。 （4）低倍镜观察：旋转粗调焦手轮，将载物台升至最高点。双眼通过目镜观察，慢慢旋转粗调焦手轮，降低载物台，至标本像出现。旋转微调焦手轮对标本的像进行精确聚焦，至看到清晰的图像，并把观察目标调至视场中央。 （5）高倍镜观察：旋转转换器，将40×物镜移至光路，再将聚光镜孔径光阑调节杆拨至40×数字。双眼通过目镜观察，双手转动微调焦手轮，缓缓下降载物台，直至看到物像为止，并把观察目标调到视场中央。若视野较暗，则可旋转亮度调节旋钮，使视场亮度适宜。 3.生物绘图（20分）。 （1）画圆：在考试纸的中间偏左的位置，用圆规画出一个直径9厘米的圆。要考虑好标注细胞名称后左右对称。 （2）绘图：一边观察，一边绘图。至少要详绘出视场中3个质壁分离进程不同的相邻完整细胞，其他周围细胞要绘出细胞壁。绘出的细胞形状要与显微镜中观察到的细胞形状一致。 用垂直点绘细胞膜、细胞质、液泡膜、细胞核，点由密到稀、由深到浅。 （3）标注：向右水平横线引出说明细胞的各部分，等距均匀分布，右对齐清晰标注各部分名称。图的下方标注图的名称，并加上放大倍数。 4.整理与清洁（15分）。 操作完毕，关闭电源，旋转转换器，将物镜转到10×物镜。物品归位，清洁桌面。形成良好的职业素养。 |
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