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标题 实时荧光PCR检测百日咳杆菌与百日咳抗体的临床应用分析
范文

    赵丽静

    

    【摘 ?要】目的:评价实时荧光PCR应用于百日咳杆菌与百日咳抗体检测的价值。方法:将2017年9月-2019年8月在我院确诊为百日咳的56例患儿作为研究对象,采集患儿咽拭子,进行百日咳杆菌实时荧光PCR检测,采集患儿血液标本进行百日咳抗体IgM实时荧光PCR检测,统计检测结果,以百日咳杆菌与百日咳抗体IgM均为阳性作为百日咳诊断标准,统计实时荧光PCR联合检测百日咳杆菌、百日咳抗体诊断百日咳的准确率。结果:56例患儿百日咳杆菌的阳性率为85.70%,百日咳抗体IgM的阳性率为75.00%。实时荧光PCR联合检测两者诊断百日咳的准确率为73.21%。结论:实时荧光PCR检测百日咳杆菌及百日咳抗体IgM对百日咳的临床诊断具有辅助价值。

    【关键词】实时荧光PCR;百日咳杆菌;百日咳抗体;临床诊断

    【中图分类号】R440;R516.6 ? ? ?【文献标识码】A ? ? ?【文章编号】1672-3783(2020)08-0067-02

    百日咳为感染百日咳杆菌而发生的一种急性呼吸道传染病,发病后的主要临床表现为阵发性痉挛性咳嗽,且伴有“鸡鸣”样吸气性吼声,病程较长,可持续2~3个月,故称为百日咳。长期观察发现,该疾病的潜伏期较长,传染性较强,延误诊治很容易造成小范围流行[1]。因此,实现该疾病的早期临床诊治具有必要性。为进一步提高该疾病的早期确诊率,本研究探讨实时荧光PCR检测百日咳杆菌和百日咳抗体在百日咳临床诊断中的应用价值,现汇报研究内容如下:

    1. 资料与方法

    1.1一般资料

    研究对象为2017年9月-2019年8月在我院确诊为百日咳的56例患儿。百日咳临床诊断标准:有明显的咳嗽症状、持续时间至少2周且伴有以下症状中的一项:(1)呈痉挛性咳嗽;(2)伴有“鸡鸣”样吸气性吼声;(3)无明显诱因的咳嗽后呕吐。56例患儿中,男患儿26例,女患儿30例,年龄5个月~3岁(1.06±0.26)岁。其家长均事先对本研究知情,同意患儿参与研究。

    1.2方法

    1.2.1百日咳杆菌检测

    具体检测过程为:使用棉拭子取患儿咽部分泌物,置于装有无菌生理盐水的试管中立即送检。检测仪器为荧光定量PCR扩增仪(罗氏),检测试剂盒购自中国中山大学达安基因股份有限公司,严格按照仪器及试剂盒的说明书进行检测操作。

    百日咳杆菌结果判定:Ct值<38,且有扩增曲线判定为阳性,Ct值≥38或无扩增曲线判定为阴性。

    1.2.2百日咳抗体检测

    具体检测过程为:使用真空抽血管采集患儿静脉血3ml,待血液凝固后,将采血管置于血清离心机中,以4000r/min的速度离心10min,取上清液进行百日咳抗体IgM。检测试剂盒购自上海康郎生物科技有限公司,严格按照仪器及试剂的说明书进行检测操作。

    百日咳抗体IgM结果判定:浓度<14U/ml判定为阴性,反之判定为阳性。

    1.3观察指标

    统计研究对象实时荧光PCR检测百日咳杆菌和百日咳抗体IgM的阳性率以及实时荧光PCR联合检测百日咳杆菌和百日咳抗体IgM诊断百日咳的准确率。

    诊断准确率评价参考的金标准为一般资料中的百日咳临床诊断标准,反映的是联合检测百日咳杆菌和百日咳抗体IgM诊断百日咳与金标准方法的符合程度。

    2. 结果

    2.1 56例患儿的百日咳杆菌和百日咳抗体IgM的实时荧光PCR检测结果

    2.2实时荧光PCR联合检测百日咳杆菌和百日咳抗体IgM诊断百日咳的准确率

    经统计得出,56例百日咳患儿中,共41例患儿的实时荧光PCR联合检测百日咳杆菌和百日咳抗体IgM诊断结果与金标准诊断结果符合,诊断准确率为73.21%(41/56)。

    3. 讨论

    世界卫生组织(WHO)的数据统计结果显示,全球人群的百日咳发病率近年来有明显的上升趋势,不仅危害人群身心健康,同时也造成了较严重的医疗资源损失[2]。如何进一步提高该疾病的早期确诊率值得进行探索。早期,病原学检查被认为是诊断百日咳的及标准,但经长期实践应用也发现诸多局限性,如病原微生物的培养过程易受到多种因素的影响,可能出现假阳性、假阴性的结果,且检验周期较长,较易造成疾病的延误诊治。

    实时荧光PCR检测为现阶段在我国较受关注的一种检验方法,经实践证实多多种病原微生物及抗體均具有较高的敏感性和特异性。本研究应用该方法检测百日咳杆菌和百日咳抗体,并分析联合检测两者对百日咳的诊断价值。结果显示纳入研究的百日咳患儿的百日咳杆菌阳性率和百日咳抗体IgM阳性率均高于70%,实时荧光PCR联合检测两者诊断百日咳的准确率为73.21%。根据上述研究结果得出,实时荧光PCR检测百日咳杆菌和百日咳抗体能够为疾病的临床诊断提供辅助价值。百日咳杆菌的致病机制主要为其本身能够合成一种特异性的毒素,实时荧光PCR检测能够检出该毒素,且能够对该毒素进行定量[3]。因此,对百日咳杆菌具有较高的敏感性和特异性。百日咳抗体IgM近年来已被多个课题研究发现在百日咳发病早期具有较高的检出率,且初次感染的患者多会在痉挛期出现该抗体。因此,近年来该抗体检测在百日咳临床诊断中的应用较广泛。本次研究中也发现,实时荧光PCR检测百日咳抗体IgM为阳性的患儿多处于疾病的痉挛期。

    综上所述,实时荧光PCR检测百日咳杆菌和百日咳抗体在百日咳临床诊断中的应用,有利于实现百日咳的早期诊断,值得各大医院开展应用。

    参考文献

    [1] 李振,汪丙松,王昭俐,等.质谱法与聚合酶链式反应检测法检测百日咳鲍特菌[J].中国临床医生杂志,2020,48(01):92-94.

    [2] 王青,刘莹,袁林,等.实时荧光定量聚合酶链式反应检测百日咳鲍特菌的效能研究[J].中国全科医学,2019,22(23):2815-2819.

    [3] 吴丹遐,陈强,李岚,等.百日咳感染在儿童慢性咳嗽中的地位及其临床特征研究[J].中国当代儿科杂志,2019,21(01):18-23.

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更新时间:2025/3/10 19:07:56