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标题 浅谈3例化学发光法检测乙肝五项非常见模式
范文

    林艺群

    【摘 要】目的:通过3例化学发光法检测乙肝五项结果分析,使我们了解并掌握乙肝五项检测的一些非常见(偶见、罕见)模式及其相应的临床意义。方法:化学发光免疫分析法结果:选择本院2018年1月至6月门诊住院收治患者检测乙肝五项分析共3351份标本,其中检测出3例样本为乙肝五项非常见模式。结论:近年来随着抗病毒药物以及乙肝疫苗的广泛应用,化学发光法灵敏度提高,发现较多的乙肝五项非常见模式。掌握相应的临床意义,对于推动慢性乙肝患者个体化医疗,更好地为病人解释检验报告,减少医患纠纷具有十分重要意义。

    【关键词】慢性乙型肝炎;化学发光免疫分析法;乙肝五项检测; 非常见模式;酶联免疫法

    Abstract:Objective Analyzing the results of three cases of five indicators for HBV detected by chemiluminescence immunoassay, we identified some uncommon modes (accident modes or rare modes) and mastered the correlative clinical significance. Methods: Chemiluminescence immunoassay. Results: A total of 3351 cases of suspected hepatitis B patients admitted in our hospital from January 2018 to Jun 2018 were selected, among which we found three cases of five indicators for HBV were the uncommon modes. Conclusions: With extensive use of antiviral drugs and hepatitis B vaccines, moreover, improvement of the sensitivity of chemiluminescence immunoassay in recent years, more and more uncommon modes of five indicators for HBV are detected. Acquirement its correlative clinical significance is important for the development of individualized diagnosis of chronic hepatitis B, and also effective in reducing the medical dispute due to the better explanation the reports to patients.

    Key words: Chronic hepatitis B, Chemiluminescence immunoassay, Five indicators for HBV, Uncommon mode, Enzyme-linked immunosorbent assay

    乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎(简称乙肝)病毒(HBV)感染引发的一种世界性流行的疾病。全世界HBsAg携带者约有3.5亿,其中我国1亿左右。[1]据世界卫生组织报道,全世界每年约有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝癌(HCC)。[2]我国是慢性乙肝感染的重灾区,其中慢乙肝患者2000万例。近年来标记免疫分析技术发展迅速,化学发光免疫分析法(chemiluminescent immunoassay,CLIA)由于具有高灵敏度、精确定量、检测快速、易于标准化等特点已被临床实验室广泛使用。[3]随着抗乙肝病毒药物以及乙肝疫苗的广泛应用,化学发光免疫定量分析法灵敏度的提高,检测工作中会发现非常见HBV-M模式,掌握相应的临床意义,可以使临床医生在工作中更准确,更快捷地做出相应的治疗判断,对于推动慢乙肝患者个体化医疗,如何更好地与病人解释检验报告,减少医患纠纷具有十分重要意义。

    1 材料与方法

    1.1 研究对象 收集福建省南安市中医院2018年1月至6月门诊住院患者检测乙肝五项分析标本共3351份,年龄2个月至91岁。其中共有3例乙肝五项结果分析为非常见模式。

    1.2 样本采集 严格按实验操作规程用真空采血管采集静脉血5ml,放置于37度隔水式电热恒温培养箱里静置30分钟后,用湘仪TDZ-WS离心机以离心力4,000×g进行10分钟离心分离,去除可见纤维蛋白块(丝)后取血清备用。

    1.3 仪器与试剂 HISCL-800全自动高敏化学发光免疫分析仪,所用试剂为希森美康医用电子(上海)有限公司提供乙型肝炎病毒五项检测试剂盒。及相应的校准品,乙型肝炎病毒多项质控品。

    1.4 检测方法 化学发光免疫分析法 严格按照仪器和试剂操作SOP文件操作,确保每一次校准曲线均为合格有效。

    1.5 质量控制 严格按照乙型肝炎病毒多项质控品说明书和仪器操作SOP文件操作,所测的室内质控均在控。2018年3月参加福建临检中心乙肝五项室间质评,五份样本乙肝五项成绩每项均达到100﹪.

    1.6 结果判断 HBsAg(0-0.03)IU/mL,HBsAb(0-5)mIU/mL,HBeAg(0-1)CO.I,HBeAb(0-50)Inh﹪,HbcAb(0-1)CO.I。检测结果在相应参考区间内判为阴性,超出相应的区间判为阳性。

    2 结果

    2.1 例1:陈XX,男,68岁,临床初步诊断:肝功能异常。乙肝五项检测结果如下:HBsAg37.88 IU/mL(+), HBsAb38.4mIU/mL(+), HBeAg83.67CO.I(+), HBeAb34.5 Inh﹪(-),HbcAb639.73CO.I(+)。该病人HBVDNA结果为1.170E+04IU/ mL,(检测方法:实时荧光PCR,参考区间<5.000E+01)要求患者重新采血,复测结果如下:HBsAg38IU/mL(+),HBsAb39.5mIU/mL(+),HBeAg85.13CO.I(+),HBeAb33.3 Inh﹪(—),HbcAb640.15CO.I(+)。1235阳性表示亚临床型感染或非典型性感染早期。HBsAg/ HBsAb共存模式,可能与不同亚型病毒感染,或乙肝患者服用核酸類药物,导致编码S蛋白的单碱基发生突变和Pre-S区删除突变,使得HBsAg的抗原性发生变化有关[4]。也可能由于HBV基因“a”决定簇出现变异[5]。

    2.2 例2:蔡XX,男,56岁,临床初步诊断:乙肝复查。乙肝五项检测结果如下:HBsAg>2500.00IU/mL(+),HBsAb0.58mIU/mL(-),HBeAg3.61CO.I(+),HBeAb73.88 Inh﹪(+),HbcAb185.7CO.I(+)该病人HBVDNA结果为8.340E+07IU/ mL,(检测方法:实时荧光PCR,参考区间<5.000E+01)要求患者重新采血,复测乙肝五项,结果如下:HBsAg>2500.00IU/mL(+),HBsAb0.68mIU/mL(-),HBeAg3.28CO.I(+),HBeAb74.8 Inh﹪(+),HbcAb186.75CO.I(+)。1345阳性,表示急性HBV感染,趋向恢复,慢性携带者。HBeAg/HBeAb共存模式可能是HBeAg在转阴过程中出现的一种现象,在机体的恢复过程中,病毒载量减少,抗体滴度增加,用灵敏度高的方法可以发现机体内血清转换过程中的动态变化[6]。有学者认为该情况可能为HBeAg、HBeAb转换的过渡阶段或HBV发生变异[7]。

    2.3 例3:邹XX,男,39岁,临床初步诊断:肺部感染。乙肝五项检测结果如下:HBsAg>2500.00IU/mL(+),HBsAb12.97mIU/mL(+),HBeAg16.98CO.I(+),HBeAb58 Inh﹪(+),HbcAb482.05CO.I(+)该病人拒绝再检测HBVDNA,故无HBVDNA结果。要求患者重新采血,复测乙肝五项,结果如下:HBsAg>2500.00 IU/mL(+),HBsAb13.36mIU/mL(+),HBeAg3.28CO.I(+),HBeAb55Inh﹪(+),HbcAb346.75CO.I(+)。12345均阳性表示可能是不同亚型或突变感染。另外HBsAb和HBsAg一般不同时存在,可能由于不同亚型HBV感染,或处于HBsAb产生的早期[8]。其临床意义可能为:(1)一种亚型的HBsAg及异型的抗-HBs(常见);(2)血清从HBsAg转化为抗-HBs的过程(少见);(3)HBeAg向HBeAb转化。建议临床医生结合患者病史,治疗史和接触史,排除干扰因素,定期复查,动态观察。

    讨论:

    人体感染HBV之后,HBV的包膜、核壳抗原作为外来抗原物质以及整合有病毒核酸成分的感染肝细胞也可成为异“己”物质刺激机体产生针对其的细胞和体液免疫应答。由于病毒在体内的量和人体对其的反应性不同,体现在血清中可检测到的病毒特异性抗原抗体组成不同,另外,更多的药物治疗干扰了自然转归的过程,使血清学表现出多种模式。从排列组合的原理分析,乙肝五项血清标志物应该有32种组合模式。近年来随着抗乙肝病毒药物以及乙肝疫苗的广泛应用,临床上发现越来越多的HBV-M模式,通常有9种常见模式和16种非常见模式。本研究中例1和例2属于非常见模式中的偶见模式,例3属于罕见模式。目前,国内临床实验室检查乙肝常用的方法是酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),该方法操作简单,价格低廉,在临床中得到广泛应用。但因其是定性试验,不能提供HBV标志物的具体含量,只能进行阴阳性判断,故不可能完成HBV感染的动力学观察。据田拥军等报道目前国内主要 8 种试剂盒检测变异的 HBsAg 总体漏检率为 16 .7% ~44 .4%HBV 突变可导致常规试剂检测 HBsAg 值降低 ,是造成检测能力下降的原因之一 。现在某些医院采用酶联免疫法检测乙肝五项时,最后仅通过肉眼判读检测(显色)结果。这样就很可能把一些本来是弱阳性的检测结果误判读为阴性结果,或者本来是阴性结果误判为弱阳性结果。如果同一患者检测结果为乙肝五项非常见模式在另一家采用酶联免疫法检测,所得结果就很有可能不一样,特别是该患者在其中一家医院有进行输血或有创治疗后就有可能引发争议甚至大的医患纠纷。乙肝非常见模式的出现是多种因素造成的,排除试剂,操作及其他干扰因素,主要原因是病毒变异或人体免疫状态改变所引起的。尚红、王毓三、申子瑜主编第4版《全国临床检验操作规程》中关于HBV血清学标志物的临床意义亦只列出11种模式的临床意义。而今在某些时候医患关系相对比较紧张的情况下,如何分析乙肝五项检测结果一些非常见模式及相应的临床意义,使我们能更精确,更全面地去思考慢性乙肝的发生和发展过程,从而更有利于对慢性乙肝的诊断,预防和治疗;进一步推动慢性乙肝个体化医疗的发展,同时也对如何更好地与病人解释检验报告,加强与患者沟通,减少医患纠纷具有十分重要的意义。

    参考文献

    李兰娟,任红主编.传染病学〔M〕,第8版.北京:人民卫生出版社,2013.

    汪咏新,张学东,马莉.浅谈乙肝五项定量检测结果及常見模式分析﹝J﹞.医学检验与临床,2009,20(4):115.

    何应中,郑国波,邹焰,等.ECLIA和ELISA检测乙肝病毒血清标志物对比探讨[J].遵义医学院学报,2010,33(5):439-442.

    胡伟,周锦勇,毕永春,等.12554例乙型肝炎病毒血清标志物的组合模式与分析[J].现代医学,2011,39(3):309—311.

    吴淑梅,林云,王辉,等.HBV血清标志物e抗原假阴性的原因分析及对策[J].第二军医大学学报,2006,27(7):768-770.

    孙学青,韩景银,刘兆军.电化学发光定量检测乙肝五项指标分析及临床意义[J].医药前沿,2013(5):389-391.

    黄晶,林花,奚丽,等.化学发光法检测77286例乙型肝炎病毒血清标志物结果分析.1临床肝胆病杂志,2010,26(3):324-325.

    张爱民,王慧芬,李桂英,等.HBV突变与HBV相关慢加急性肝衰竭相关性研究[J].传染病信息 ,2014 ,27(2) :74-77

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更新时间:2025/3/14 22:50:42