| 标题 | 蛹虫草液体发酵培养基的研究 |
| 范文 | 李志涛 彭蕊 朱冰清 王晖 摘要：以蛹虫草的菌丝体为目的产物，采用L18（37）正交试验研究蛹虫草最佳液体菌种培养基配方。试验结果表明，葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁对蛹虫草菌丝体含量有显著影响；最佳配方为：葡萄糖2.5%、玉米粉1.0%、蛋白胨0.5%、磷酸二氢钾0.15%、碳酸钙0.05%、硫酸镁0.10%、维生素B1 0.003%，在此条件下的菌丝体含量达24.17 mg/mL。 关键词：液体发酵；培养基配方；蛹虫草；正交试验；菌丝体 中图分类号：TS201.3 文献标识码：A 文章编号：1674-1161（2019）02-0003-03 蛹虫草又称北冬虫夏草，是一种食药两用的大型真菌，其药用成分与冬虫夏草相近，具有降压、抗衰老、镇静、保肺、益肾、止血、抗疲劳、提高人体免疫力、抗癌等功能，医药价值和经济价值均较高。目前，我国一般采用固体菌种方式培养蛹虫草，但这种培养方式具有菌龄长而不一，出菇不整齐的缺点。与固体菌种培养相比，液体菌种制种具有菌龄一致、周期短、出菇整齐等优点，因此，以蛹虫草的菌丝体为目的产物，研究蛹虫草的最佳液体菌种培养基配方，为进一步开发蛹虫草提供科学依据。 1 材料与方法 1.1 材料與试剂 蛹虫草：衡水学院食品学实验室提供。 PDA斜面培养基：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，水1 000 mL，pH值自然。 葡萄糖、玉米粉、蛋白胨、磷酸二氢钾、碳酸钙、硫酸镁、维生素B1。 1.2 仪器与设备 Alpha1506型分光光度计：上海谱元仪器有限公司；AE523型电子天平：上海恒平有限公司；SPX-100B-Z型生化培养箱：苏州江东精密仪器有限公司；HH-6型恒温水浴锅：上海析达公司。 1.3 试验方法 1.3.1 蛹虫草菌丝生长量测定 蛹虫草菌丝提取流程为：蛹虫草斜面菌种（PDA斜面培养基进行培养）→摇瓶液体发酵→蛹虫草发酵液→收获蛹虫草菌丝体→60 ℃条件下干燥→称量。 摇瓶液体发酵的培养基成分为葡萄糖、玉米粉、蛋白胨、磷酸二氢钾、碳酸钙、硫酸镁、维生素B1。将不同发酵培养基分别装入三角瓶（装量为100 mL/250 mL，接种量为10%），在转速150 r/min、24 ℃条件下振荡培养6 d。 菌丝生长量测定公式为： 蛹虫草菌丝体含量=菌丝体的干重（mg）/ 发酵液体积（mL） （1） 1.3.2 正交试验 选用葡萄糖、玉米粉、蛋白胨、磷酸二氢钾、碳酸钙、硫酸镁、维生素B1为试验因素，进行L18（37）正交试验，因素水平见表1。 2 结果与分析 2.1 正交试验 L18（37）正交试验结果及分析见表2。 由表2得知，按培养基成分对蛹虫草菌丝体含量影响顺序为：C>F>D>A>G>B>E，即蛋白胨>硫酸镁>磷酸二氢钾>葡萄糖>维生素B1>玉米粉>碳酸钙。说明蛋白胨对蛹虫草菌丝体含量的影响最大，葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁对菌丝生长有显著影响（p<0.05）。 由表2中的数据还可知：最佳试验组合为A2B2C2D2E2F2G1，即葡萄糖2.5%、玉米粉1.0%、蛋白胨0.5%、磷酸二氢钾0.15%、碳酸钙0.05%、硫酸镁0.10%、维生素B1 0.003%。。 2.2 验证试验 采用最佳组合进行验证试验，结果取3次平行试验的平均值，确定菌丝体含量为24.17 mg/mL，明显高于正交试验（表1）中的最高值。 3 结论 采用正交试验确定的蛹虫草的最佳培养基配方为：葡萄糖2.5%、玉米粉1.0%、蛋白胨0.5%、磷酸二氢钾0.15%、碳酸钙0.05%、硫酸镁0.10%、维生素B1 0.003%。在此最佳条件下进行验证试验，菌丝体含量达24.17 mg/mL。 参考文献 [1] 戴群，仇玲玲，杨启银，等.1株蛹虫草的液体发酵试验及蛹虫草多糖的提取[J].辽宁师范大学学报（自然科学版），2012，35（4）：534-537. [2] 胡健微，秦秀丽.蛹虫草人工培养营养基质的优化试验[J].食用菌，2013（5）：29-31. [3] 马风琴，何桂芳，赵金萍.虫草菌液体悬浮培养条件研究[J].现代农业科技，2010（22）：40-41. [4] 李志涛，孙金旭.杏鲍菇液体发酵培养基优化研究[J].食品研究与开发，2017，38（3）：166-169. [5] 孙润生，孙冬梅，张杰，刘云成.蛹虫草产虫草素培养基优化[J].黑龙江八一农垦大学学报，2018，30（05）：92-97. [6] 狄志彪，陈新璐，张强，等.响应面分析法优化蛹虫草液体发酵培养基[J].中国生物制品学杂志，2016，29（10）：1104-1108. [7] 王文风.蛹虫草液体发酵培养基的筛选[J].中央民族大学学报（自然科学版），2016，25（3）：14-17. [8] 龙思颖，康德灿，柯江，刘曌，罗宇霞.液体发酵培养富硒蛹虫草菌丝体优化条件的试验[J].食用菌，2016，38（3）：11-13. |
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