标题 | 唐古特大黄不同提取物抗痛风作用比较研究 |
范文 | 王红娟 吕小旭 王芳 邹家栋 张旭东
摘要:目的:对比唐古特大黄的不同提取物抗痛风作用。方法:选取体重相近的Wistar大鼠并分组,通过次黄嘌呤及氧嗪酸钾建立痛风性肾病模型,给予唐古特大黄水、甲醇和酸水解高(5g·kg-1)低剂量(1.25g·kg-1)的提取物,实验中另设空白组、阴性对照组和阳性对照组。测定大鼠肾脏指数及大鼠血液中尿酸值来考察抗痛风作用。结果:唐古特大黄不同提取物抗痛风作用存在显著性差异,以酸水解提取物效果最好,其次为甲醇提取物和水提取物。结论:唐古特大黄的酸水解提取物有较强的抗痛风作用,其中酸水解提取物含有游离的蒽醌类成分最多,其作用机制需进一步研究,此为唐古特大黄的开发利用提供了依据。 关键词:唐古特大黄;痛风;肾脏指数;尿酸 中图分类号:R589.7 文献标志码:A 近年痛風患者越来越多,而痛风与血液中尿酸含量过高有关。唐古特大黄具有解热抗炎解毒,抗痛风,活血凉血,泻下攻积,清热泻火,止血,活血化瘀之功效。现代药理作用表明,唐古特大黄具有抗炎、泻下、抗肿瘤和抑制肺纤维化等方面作用,同时也有将唐古特大黄作为临床治疗痛风性肾病常用药物的研究。本文所研究的唐古特大黄为蓼科植物唐古特大黄(Rheklm tanguticum Maxim.ex Bam)的干燥根及根茎,主产于青海、甘肃、西藏等地,主要以野生品种为主。对现有唐古特大黄药理作用的研究基础上,对唐古特大黄水提取物、甲醇提取物和酸水解提取物治疗痛风作用进行了比较研究。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1实验动物 wistar大鼠,雌雄各半,体重180-220g,均由中国农业科学院兰州兽医研究所动物实验中心,生产许可证号:(甘)20150001。喂养于本学院机能实验室动物房,给予正常大鼠饲料饲喂,自由饮水,适应性喂养一周后进行实验。 1.1.2药物及试剂 唐古特唐古特大黄为野生品种,采自六盘山地区,经本院程亚青教授鉴定为蓼科植物唐古特大黄(Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.的干燥根及根茎。氧嗪酸钾(武汉远成共创科技有限公司,批号:00164);次黄嘌呤(武汉远成共创科技有限公司,批号:00164);苯溴马隆(德国赫曼大药厂,批号:1681550);尿酸测定试剂盒(上海复星长征医学科学有限公司,批号:D18010231);甲醇(天津市大茂化学试剂厂,分析纯,批号:20170824);乙醚(天津市大茂化学试剂厂,分析纯,批号:20180325);水为蒸馏水。 1.1.3实验仪器 cs系列全自动生化分析仪(长春迪瑞医疗科技股份有限公司);Bs224s电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);12号大鼠直形灌胃针(浙江省宁海县电子医药仪器厂,批号:GJ8301-A);5mL一次性使用人体静脉血样采集容器(浏阳市三力医用科技发展有限公司,批号:GA5011);H-1650R台式高速冷冻离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司);TDL-40B台式离心机(上海安亭科学仪器厂制造)。 1.2方法 1.2.1药物组处理方法 唐古特大黄蒸馏水煎煮两次,合并煎煮液,浓缩成1g·mL-1的溶液,为水提取组;唐古特大黄甲醇加热回流提取两次,合并提取液,旋转蒸发为流浸膏,加蒸馏水成1g·mL-1的混悬液,为甲醇提取组;唐古特大黄8%盐酸酸水解后,再用乙醚加热回流提取,合并滤液,旋转蒸发干乙醚后,加蒸馏水成1g·mL-1的混悬液,为酸水解提取组。 1.2.2高尿酸血症动物模型的建立 90只Wistar大鼠,雌雄各半,适应性喂养一周,分为9组,空白组、阴性对照组生理盐水,阳性对照组苯溴马隆(0.01g·kg-1),药物组6组,为唐古特大黄水提取、甲醇提取和酸水解提取高(5g·kg-1)低剂量(1.25g·kg-1)组。每组10只,除空白组外每组大鼠灌胃次黄嘌呤(1g·kg-1),同时皮下注射氧嗪酸钾(250mg·kg-1)建立大鼠急性高尿酸血症模型。造模1h后,称重并按不同剂量灌胃,阴性对照组给予相同体积的生理盐水,阳性对照组给予相应剂量的苯溴马隆,给药2h后,断头采血,测定血尿酸含量。 1.2.3大鼠尿酸型肾病模型的建立 90只Wistar大鼠,雌雄各半,适应性喂养一周,分为9组,空白组、阴性对照组生理盐水,阳性对照组苯溴马隆(0.01g·kg-1),药物组6组。大鼠灌胃氧嗪酸钾(400mg·kg-1)2mL构建大鼠尿酸型肾病模型,空白对照组灌胃等体积生理盐水。药物组同1.2.2项下方法给药,早中晚各给药1次,连续给药5周。最后一次给药结束3h后腹腔注射10%水合氯醛(0.03mL·kg-1)麻醉大鼠,摘除肾脏,仔细剔除无关组织,质量称重,计算肾脏指数,统计分析结果。脏器指数=脏器(g)/体重(g)·100%。 1.2.4统计学方法 使用SPSS19.0软件对数据进行处理,数据结果以均值±标准差(x±s)表示,多组数间比较采用方差分析,两组数间采用F检验,以P<0.05说明差异有统计学意义。P<0.01说明差异有显著统计学意义。 2结果 2.1唐古特大黄不同提取物对大鼠尿酸值的影响 通过对尿酸值的分析,唐古特大黄的不同提取物均可明显降低尿酸值,与阴性对照组相比有显著统计学意义(P<0.05,P<0.01)。其中酸水解提取物组降低尿酸值最明显,其次为甲醇提取组和水提取组,且各组之间有差异(P<0.05)。高、低剂量之间只有甲醇提取组有差异(P<0.05)。结果见表1所列。 2.2唐古特大黄不同提取物对大鼠肾脏指数的影响 通过SPSS分析,唐古特大黄的不同提取物对尿酸型肾病大鼠均有影响,其结果与阴性对照组相比有显著统计学意义(P<0.05,P<0.01)。其中酸水解提取物组对肾脏的保护作用最明显,其次为甲醇提取组和水提取组(除甲醇提取物低剂量组),且各组之间有差异(P<0.05)。这与唐古特大黄对不同提取物对大鼠尿酸值影响的结果相符。但各高、低剂量之间无统计学意义差异(P<0.05)。结果见表2所列。 3讨论 综合以上分析结果,唐古特大黄不仅具有降低大鼠血尿酸,同时还能保护大鼠肾脏的作用,这与文献报道相符。对不同提取物治疗效果比较研究发现,其中酸水解提取物治疗效果最好。唐古特大黄的化学成分的分析中,水提取物中主要是水溶性成分,如糖类等;甲醇提取物,主要含有结合型蒽醌,如蒽醌苷类;酸水解提取物主要含有游离型蒽醌类,如唐古特大黄素、唐古特大黄酸、唐古特大黄酚、唐古特大黄素甲醚、芦荟唐古特大黄素等。王雪等研究发现唐古特大黄酸对马兜铃酸A引起的斑马鱼幼鱼肾损伤有一定的保护作用。还有研究表明,唐古特大黄总蒽醌对结肠和肾脏水通道蛋白表达具有重要影响,可用于治疗消化和泌尿系统相关疾病。本研究发现唐古特大黄中游离蒽醌类成分治疗痛风作用显著,其作用机理还需进一步研究。 |
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