食品检测中酶联免疫吸附试验的应用初探
张欣媛
酶联免疫吸附检验的基本概述
酶联免疫吸附检验是当前比较常见的一种固相酶免疫测定技术,在酶联免疫吸附试验中,主要试剂为采用酶标记的抗原和抗体,通过利用复合物中酶的催化作用,经由底物的呈色反应从而有效定性和定量分析被检测物。现阶段在酶联免疫吸附试验当中主要使用的检验方法包括双抗体和双抗原夹心法测抗体、抗原,以及间接法和竞争法测抗体抗原等等。
酶联免疫吸附试验在食品检测中的应用分析
食品过敏源。现阶段酶联免疫吸附试验经常被用于食品过敏源的检测。譬如说早在本世纪初,国外便有研究学者通过使用酶联免疫吸附试验的方式对鱼类过敏源进行检测,其通过在试验当中将捕获剂用兔的抗鳕鱼小清蛋白的抗体的多克隆产物作为替代,直接利用该多克隆产物中的一种生物共轭物质作为检测剂。根据相关研究结果显示,在使用酶联免疫吸附试验的方式下,成功检测出了大量不同种类的鱼类,且回收率最高时能够达到将近140%,最低回收率也达到了68%,检测限为食物中鱼小清蛋白含量为0.01mg/kg,也就是说每千克食物中的鱼肉含量在5mg,其对于食品中鱼蛋白含量的控制提供了重要参考帮助。而在部分欧盟国家当中,也通过采用酶联免疫吸附试验的方式对芥末这一致敏食物进行检验。有研究人员通过对含有不同含量芥末粉的小香肠进行酶联免疫吸附试验检测,发现香肠中芥末的平均回收率达到了(95.3±10.7)%,而在将其对市面上销售的30种小香肠进行检验,发现在标注了含有芥末的15种小香肠中,成功检测出有4种产品不含芥末。而在未标注含有芥末的15种小香肠中,也成功检测出有2种产品含有芥末,可见该试验对于检测食品中的过敏源,保障消费者健康意义重大。
有毒物质。及时、精准地检测出食品中的有毒有害物质,同样是保障食品质量安全的重要途径之一。在这一过程中,通过使用酶联免疫吸附试验也可以起到一定的帮助作用。国外已有学者通过对同一种本土产玉米制品中的玉米烯酮,分别采用酶联免疫吸附試验以及均相酶免疫测定两种方法进行检测。根据相关数据显示,在使用酶联免疫吸附试验对本土产含有玉米烯酮的玉米制品样品进行检测的过程中,其检测限为每千克玉米制品样品中含有5.5μg的玉米烯酮,而采用均相酶免疫测定法下,其检测限为每千克玉米制品样品中含有7.1μg的玉米烯酮。而后其通过扩大检验样本数量,对40种含有玉米烯酮的样品分别使用酶联免疫吸附试验以及均相酶免疫测定,结果证明两者的相关性R2为0.9258,但使用酶联免疫吸附试验的检测限更低,由此证明酶联免疫吸附试验不仅能够有效检测食品中的有毒物质,同时相比于均相酶免疫测定,在检测限以及精准度方面还具有明显优势。
农药残留。食品中农药残留、超标也是导致出现食品安全问题的一大重要原因。而目前根据相关实证研究,已经证明酶联免疫吸附试验对于检验食品中的农药残留具有积极作用。国内学者通过研发一种能够对残留的甲萘威进行有效分析的酶联免疫吸附测定试剂盒,通过随机选择水、土壤以及其他多种不同种类的食品,发现均可以在短时间内成功对样品中的甲萘威进行有效检测,其最低检测限达到了每千克样品中含有0.4mg甲萘威。另外,国外也有部分学者通过将免疫原选定为新霉胺,在与酶联免疫吸附试验的方法进行有效结合下,对牛奶中的庆大霉素、新霉素等进行检验,同样也获得了良好的检验成效。
微生物检测。根据王民、曹德康(2013)的对于酶联免疫吸附试验的研究可知,其在严格按照相关标准要求,预先对蛋白胨缓冲液进行浓度和预处理之后,将酶联免疫吸附试验中的夹心法运用其中,用以对被测食物中的伤寒沙门氏菌进行有效检测。通过根据其给出的检测结果可知,采用酶联免疫吸附试验法下,能够获得102CFU/ml的检测限,也就是说在每毫升被测液态食物当中,含有102CFU的伤寒沙门氏菌。
通过对酶联免疫吸附试验在食品检测中的应用现状进行分析,可以其对于检测食品中的过敏源、有毒有害物质、农药残留等均具有一定的帮助作用。并且该种方式所表现出的高效、精准、灵敏等特性,也使其能够有效运用在其他检测领域上。相信随着我国检测技术水平的进一步发展,酶联免疫吸附技术也将得到持续优化改进,其检测范围、精准度和稳定性等还将得到进一步提高。
酶联免疫吸附检验的基本概述
酶联免疫吸附检验是当前比较常见的一种固相酶免疫测定技术,在酶联免疫吸附试验中,主要试剂为采用酶标记的抗原和抗体,通过利用复合物中酶的催化作用,经由底物的呈色反应从而有效定性和定量分析被检测物。现阶段在酶联免疫吸附试验当中主要使用的检验方法包括双抗体和双抗原夹心法测抗体、抗原,以及间接法和竞争法测抗体抗原等等。
酶联免疫吸附试验在食品检测中的应用分析
食品过敏源。现阶段酶联免疫吸附试验经常被用于食品过敏源的检测。譬如说早在本世纪初,国外便有研究学者通过使用酶联免疫吸附试验的方式对鱼类过敏源进行检测,其通过在试验当中将捕获剂用兔的抗鳕鱼小清蛋白的抗体的多克隆产物作为替代,直接利用该多克隆产物中的一种生物共轭物质作为检测剂。根据相关研究结果显示,在使用酶联免疫吸附试验的方式下,成功检测出了大量不同种类的鱼类,且回收率最高时能够达到将近140%,最低回收率也达到了68%,检测限为食物中鱼小清蛋白含量为0.01mg/kg,也就是说每千克食物中的鱼肉含量在5mg,其对于食品中鱼蛋白含量的控制提供了重要参考帮助。而在部分欧盟国家当中,也通过采用酶联免疫吸附试验的方式对芥末这一致敏食物进行检验。有研究人员通过对含有不同含量芥末粉的小香肠进行酶联免疫吸附试验检测,发现香肠中芥末的平均回收率达到了(95.3±10.7)%,而在将其对市面上销售的30种小香肠进行检验,发现在标注了含有芥末的15种小香肠中,成功检测出有4种产品不含芥末。而在未标注含有芥末的15种小香肠中,也成功检测出有2种产品含有芥末,可见该试验对于检测食品中的过敏源,保障消费者健康意义重大。
有毒物质。及时、精准地检测出食品中的有毒有害物质,同样是保障食品质量安全的重要途径之一。在这一过程中,通过使用酶联免疫吸附试验也可以起到一定的帮助作用。国外已有学者通过对同一种本土产玉米制品中的玉米烯酮,分别采用酶联免疫吸附試验以及均相酶免疫测定两种方法进行检测。根据相关数据显示,在使用酶联免疫吸附试验对本土产含有玉米烯酮的玉米制品样品进行检测的过程中,其检测限为每千克玉米制品样品中含有5.5μg的玉米烯酮,而采用均相酶免疫测定法下,其检测限为每千克玉米制品样品中含有7.1μg的玉米烯酮。而后其通过扩大检验样本数量,对40种含有玉米烯酮的样品分别使用酶联免疫吸附试验以及均相酶免疫测定,结果证明两者的相关性R2为0.9258,但使用酶联免疫吸附试验的检测限更低,由此证明酶联免疫吸附试验不仅能够有效检测食品中的有毒物质,同时相比于均相酶免疫测定,在检测限以及精准度方面还具有明显优势。
农药残留。食品中农药残留、超标也是导致出现食品安全问题的一大重要原因。而目前根据相关实证研究,已经证明酶联免疫吸附试验对于检验食品中的农药残留具有积极作用。国内学者通过研发一种能够对残留的甲萘威进行有效分析的酶联免疫吸附测定试剂盒,通过随机选择水、土壤以及其他多种不同种类的食品,发现均可以在短时间内成功对样品中的甲萘威进行有效检测,其最低检测限达到了每千克样品中含有0.4mg甲萘威。另外,国外也有部分学者通过将免疫原选定为新霉胺,在与酶联免疫吸附试验的方法进行有效结合下,对牛奶中的庆大霉素、新霉素等进行检验,同样也获得了良好的检验成效。
微生物检测。根据王民、曹德康(2013)的对于酶联免疫吸附试验的研究可知,其在严格按照相关标准要求,预先对蛋白胨缓冲液进行浓度和预处理之后,将酶联免疫吸附试验中的夹心法运用其中,用以对被测食物中的伤寒沙门氏菌进行有效检测。通过根据其给出的检测结果可知,采用酶联免疫吸附试验法下,能够获得102CFU/ml的检测限,也就是说在每毫升被测液态食物当中,含有102CFU的伤寒沙门氏菌。
通过对酶联免疫吸附试验在食品检测中的应用现状进行分析,可以其对于检测食品中的过敏源、有毒有害物质、农药残留等均具有一定的帮助作用。并且该种方式所表现出的高效、精准、灵敏等特性,也使其能够有效运用在其他检测领域上。相信随着我国检测技术水平的进一步发展,酶联免疫吸附技术也将得到持续优化改进,其检测范围、精准度和稳定性等还将得到进一步提高。