食品中铜含量测定的方法证实
岑嘉茵+黄嘉敏
CNAS-CL01：2006 《检测和校准实验室能力认可准则》5.4.2 要求：“在引入检测或校准之前，实验室应证实能够正确地运用这些标准方法。如果标准方法发生了變化，应重新进行证实。”即实验室在将方法引入检测前，应从“人”、“机”、“料”、“法”、“环”等方面证实其有能力按标准方法开展检测活动 。当这些资源条件满足检测标准要求后，化学实验室需要通过技术实验，对检测标准的重要技术指标进行验证。
GB 5009.13-2017《食品安全国家标准 食品中铜的测定》于2017年10月6日实施，替代GB/T 5009.13-2003。新标准前处理方法除原有的干法灰化外，增加湿法消解、压力罐消解和微波消解三种前处理方法，并保留石墨炉原子吸收法为第一法，采用磷酸二氢铵-硝酸钯溶液作为基体改进剂，保留火焰原子吸收光谱法为第二法。在四种前处理方法中，微波消解法具有消解时间短、样品污染少、操作简便等优点，在多个检测领域得到广泛应用。本文参照GB/T 27404-2008附录F检验方法确认的技术要求，对GB 5009.13-2017微波消解-火焰原子吸收光谱法的回收率、标准曲线、精密度、方法检出限等技术指标进行证实。
实验部分
仪器设备。火焰原子吸收光谱仪SPECTR AA220FS （Agilent）；铜空心阴极灯（Agilent）；微波消解仪 MARS6（美国CEM公司）；赶酸器 EHD-16（北京东航科仪仪器有限公司）；电子天平 BS210S（赛多利斯公司）。
试剂。浓硝酸（for analysis MERCK）；过氧化氢（perhydro MERCK）。
标准物质。铜标准储备液：1000 mg/L（中国计量科学研究院）。
仪器测试条件。测量波长：324.8 nm；狭缝宽度：0.5 nm；灯电流：4.0 mA；空气流量：13.50 L/min；乙炔气流量：2.0 L/min；氧压：160 kPa。
方法证实各项技术指标
方法检出限。检出限（limit of detection， LOD）是衡量一个分析方法及测试仪器灵敏度的重要指标。方法检出限（method detection limit， MDL）是指在通过某一种分析方法的全部处理和测定过程后，被测定物质产生的信号能以99%置信度区别于空白样品而被测定出来的最低浓度，一般以产生3倍空白样品测量值标准偏差对应的浓度为方法检出限，按下式进行计算：
CL=3Sb/b （1）
式中：CL —方法检出限；Sb—空白样品吸光度标准偏差（连续测定20次）；b—方法校准曲线的斜率。
本次方法证实，连续测定20份空白样品，其吸光度标准偏差Sb为8.8258×10-5，标准曲线斜率b为0.20484。据式（1）计算：CL=0.001 mg/L；按称样量2.000 g，定容体积100.00 mL计算，CL=0.05 mg/kg，能达到GB 5009.13-2017第二法的方法检出限0.5mg/kg（按称样量2.000g，定容体积100.00mL计算）的要求。
回收率。在检测的样品中添加一定量的标准物质，测试添加进去的标准物质的回收率，可以衡量前处理或测试过程中的基体干扰、样品的交叉污染、样品损失、仪器性能等，目的是控制实验的准确度。
参照GB/T 27404-2008附录F F.1，食品中铜含量未制定最高残留限量（MRL），回收率应在方法定量限、常见限量指标、选一合适点进行三水平试验，其中常见限量指标参照GB 15199-1994《食品中铜限量卫生标准》（已废止），以10 mg/kg加标量进行试验。具体试验数据如表1：
校准曲线。校准曲线是指描述待测物质浓度或量与相应的测量仪器响应量或其他指示量之间的定量关系的曲线。校准曲线包括标准曲线和工作曲线。应用标准溶液制作校准曲线时，如果分析步骤与样品的分析步骤相比有某些省略时，则制作的校准曲线称为标准曲线。制作好校准曲线是取得准确测量结果的基础。
本次方法证实试验，得出的标准曲线方程为Abs=0.20484*C+0.00009，相关系数1.0000，范围0.100 mg/L～1.000 mg/L，符合GB/T 27404-2008附录F F.2“覆盖一个数量级，至少作5个点（不包括空白），线性回归方程的相关系数不低于0.99（对于确证方法）”的要求。
精密度。精密度是指使用特定的分析程序，在受控条件下重复分析测定均一样品所获得测定值之间的一致性程度，是保证准确度的先决条件。本次精密度试验在方法定量限、常见限量指标（以10 mg/kg加标量进行试验）、一合适点三个水平进行，每一水平重复6次加标回收试验，计算变异系数CV。具体试验数据表2：
总结
本文参照GB/T 27404-2008附录F，对GB 5009.13-2017微波消解-火焰原子吸收光谱法的方法检出限、回收率、标准曲线、精密度等技术指标进行试验，回收率、标准曲线、精密度试验结果均符合GB/T 27404-2008附录F的要求，方法检出限为0.05 mg/kg（按称样量2.000 g，定容体积100.00 mL计算），能达到GB 5009.13-2017第二法0.5 mg/kg（按称样量2.000 g，定容体积100.00 mL计算）的要求，且本实验室的设备、试剂、人员、环境等条件能满足GB 5009.13-2017的要求，经过方法证实，可以正常开展食品中铜的检测工作。
CNAS-CL01：2006 《检测和校准实验室能力认可准则》5.4.2 要求：“在引入检测或校准之前，实验室应证实能够正确地运用这些标准方法。如果标准方法发生了變化，应重新进行证实。”即实验室在将方法引入检测前，应从“人”、“机”、“料”、“法”、“环”等方面证实其有能力按标准方法开展检测活动 。当这些资源条件满足检测标准要求后，化学实验室需要通过技术实验，对检测标准的重要技术指标进行验证。
GB 5009.13-2017《食品安全国家标准 食品中铜的测定》于2017年10月6日实施，替代GB/T 5009.13-2003。新标准前处理方法除原有的干法灰化外，增加湿法消解、压力罐消解和微波消解三种前处理方法，并保留石墨炉原子吸收法为第一法，采用磷酸二氢铵-硝酸钯溶液作为基体改进剂，保留火焰原子吸收光谱法为第二法。在四种前处理方法中，微波消解法具有消解时间短、样品污染少、操作简便等优点，在多个检测领域得到广泛应用。本文参照GB/T 27404-2008附录F检验方法确认的技术要求，对GB 5009.13-2017微波消解-火焰原子吸收光谱法的回收率、标准曲线、精密度、方法检出限等技术指标进行证实。
实验部分
仪器设备。火焰原子吸收光谱仪SPECTR AA220FS （Agilent）；铜空心阴极灯（Agilent）；微波消解仪 MARS6（美国CEM公司）；赶酸器 EHD-16（北京东航科仪仪器有限公司）；电子天平 BS210S（赛多利斯公司）。
试剂。浓硝酸（for analysis MERCK）；过氧化氢（perhydro MERCK）。
标准物质。铜标准储备液：1000 mg/L（中国计量科学研究院）。
仪器测试条件。测量波长：324.8 nm；狭缝宽度：0.5 nm；灯电流：4.0 mA；空气流量：13.50 L/min；乙炔气流量：2.0 L/min；氧压：160 kPa。
方法证实各项技术指标
方法检出限。检出限（limit of detection， LOD）是衡量一个分析方法及测试仪器灵敏度的重要指标。方法检出限（method detection limit， MDL）是指在通过某一种分析方法的全部处理和测定过程后，被测定物质产生的信号能以99%置信度区别于空白样品而被测定出来的最低浓度，一般以产生3倍空白样品测量值标准偏差对应的浓度为方法检出限，按下式进行计算：
CL=3Sb/b （1）
式中：CL —方法检出限；Sb—空白样品吸光度标准偏差（连续测定20次）；b—方法校准曲线的斜率。
本次方法证实，连续测定20份空白样品，其吸光度标准偏差Sb为8.8258×10-5，标准曲线斜率b为0.20484。据式（1）计算：CL=0.001 mg/L；按称样量2.000 g，定容体积100.00 mL计算，CL=0.05 mg/kg，能达到GB 5009.13-2017第二法的方法检出限0.5mg/kg（按称样量2.000g，定容体积100.00mL计算）的要求。
回收率。在检测的样品中添加一定量的标准物质，测试添加进去的标准物质的回收率，可以衡量前处理或测试过程中的基体干扰、样品的交叉污染、样品损失、仪器性能等，目的是控制实验的准确度。
参照GB/T 27404-2008附录F F.1，食品中铜含量未制定最高残留限量（MRL），回收率应在方法定量限、常见限量指标、选一合适点进行三水平试验，其中常见限量指标参照GB 15199-1994《食品中铜限量卫生标准》（已废止），以10 mg/kg加标量进行试验。具体试验数据如表1：
校准曲线。校准曲线是指描述待测物质浓度或量与相应的测量仪器响应量或其他指示量之间的定量关系的曲线。校准曲线包括标准曲线和工作曲线。应用标准溶液制作校准曲线时，如果分析步骤与样品的分析步骤相比有某些省略时，则制作的校准曲线称为标准曲线。制作好校准曲线是取得准确测量结果的基础。
本次方法证实试验，得出的标准曲线方程为Abs=0.20484*C+0.00009，相关系数1.0000，范围0.100 mg/L～1.000 mg/L，符合GB/T 27404-2008附录F F.2“覆盖一个数量级，至少作5个点（不包括空白），线性回归方程的相关系数不低于0.99（对于确证方法）”的要求。
精密度。精密度是指使用特定的分析程序，在受控条件下重复分析测定均一样品所获得测定值之间的一致性程度，是保证准确度的先决条件。本次精密度试验在方法定量限、常见限量指标（以10 mg/kg加标量进行试验）、一合适点三个水平进行，每一水平重复6次加标回收试验，计算变异系数CV。具体试验数据表2：
总结
本文参照GB/T 27404-2008附录F，对GB 5009.13-2017微波消解-火焰原子吸收光谱法的方法检出限、回收率、标准曲线、精密度等技术指标进行试验，回收率、标准曲线、精密度试验结果均符合GB/T 27404-2008附录F的要求，方法检出限为0.05 mg/kg（按称样量2.000 g，定容体积100.00 mL计算），能达到GB 5009.13-2017第二法0.5 mg/kg（按称样量2.000 g，定容体积100.00 mL计算）的要求，且本实验室的设备、试剂、人员、环境等条件能满足GB 5009.13-2017的要求，经过方法证实，可以正常开展食品中铜的检测工作。
