液相色谱技术在定量分析中的应用
卢肖兰
随着我国科学技术的不断发展进步，色谱分离柱等低噪音高灵敏的检测器和数据处理系统也随之出现，据相关研究表明，液相色谱技术方法非常稳定，能够快速分离检测物质，并且检验结果十分准确，在实验室中非常受到液相色谱工作者的青睐，液相色谱技术已经成为实验室中应用最为广泛的技术。比如：液相色谱工作者常常把液相色谱技术应用到定量分析中，包括我们日常生活中所食的食品营养素含量分析、血和药浓度检测以及生物活性物质分析等等。在本文中，笔者将对液相色谱技术在定量分析中的应用进行研究探讨。
液相色谱仪的组成
液相色谱仪是一种对混合物质进行分离的分析鉴定仪器，随着科学技术的不断发展，现代液相色谱仪也发展得更加符合实验室工作要求。在液相色谱仪的组成当中，高压输液泵、色谱柱以及检测器占有非常重要的位置，具体如下所述：
液相色谱仪之高压输液泵。由于高压输液泵具有耐高压、输出流量比较稳定以及流量精度极高等特点，其在液相色谱分析中应用极为广泛，它通过柱塞泵电机驱动凸轮运转，将柱塞杆往液缸内部反复搅动，使泵腔内部的液体周期性的以高压状态排出，从而使样品进入色谱柱当中，让样品从色谱柱填料与流动相分离开来。
液相色谱仪之色谱柱。液相色谱仪色谱分离是根据样品的不同成分之间的配比系数，通过色谱柱实现多次吸附和分析，从而将样品混合物分离出来。其中，色谱柱一般由色谱柱头螺丝、色谱柱筛板、色谱柱管、色谱柱填料以及色谱柱堵头组成，其内壁一般由直形不锈钢管材料制作，这种材料都是经过高度抛光处理的材料，可用于有机溶剂以及水溶性缓冲盐液等。另外，为了更好的实现样品混合物质分离，液相色谱固定相基质一般采用无机基质和有机基质两种，无机基质可以通过样品物质表面引入多个功能基因进行不同程度的分离，有机基质化学物质相对稳定，可以保证样品混合物质分离的准确性和高精度性。
液相色谱仪之检测器。
在液相色谱仪中，除了色谱柱和高压输液泵是非常重要的分析仪器之外，检测器同样也具有非常重要的作用。检测器主要用于检测样品混合物在经过色谱柱分离之后其成分浓度的变化，为定量分析提供相应的数据。其中，检测器主要分为UVD（紫外线吸收检测器）、FLD（荧光检测器）以及电化学检测器等等。UVD（紫外线吸收检测器）是以上三种检测器中应用范围最为广泛的检测器，它利用自身紫外线光可以吸收的特点来检测样品混合物质浓度，灵敏性非常高，并且不具有破坏性。FLD（荧光检测器）可以吸收一定长度的波长的光，可以用来做梯度分析，虽然没有UVD（紫外线吸收检测器）应用的范围广，但是作为选择性的检测器还是非常不错的。至于电化学检测器，这是一种灵敏度极强的选择器，它的固体工作电极主要是使用玻璃碳电极材料制作，寿命较其他检测器极长。
液相色谱技术在定量分析中的預处理技术
由于天然样品的构成非常复杂，实验室液相色谱工作人员在进行天然样品成分分析时，都需要进行预处理，将天然样品的组成成分进行提取，再进一步纯化浓缩，才能得到准确的检测结果。在下文中，笔者讲为大家介绍一些常用的天然样品预处理方法，以供大家分析研究。
预处理技术之沉淀提取。沉淀提取在预处理技术中是一种比较传统的提取方法，它具有操作简单以及经济适用的特点。它主要是通过在天然样品中添加沉淀剂，让天然样品中的大分子在不进行分析的情况下就可以沉淀出来，然后再通过离心操作，选取上清液分析天然样品成分。这种方法非常适合生理体液和组织体液样品的定量分析，不仅节约了检测成本，还能使检验结果更加准确。
预处理技术之溶剂萃取。溶剂萃取是指将天然样品的成分进行提取、浓缩。往往在天然样品中添加的萃取剂越多，提取被测物质的次数也就越多，但是相对应的萃取率也就更高。这种方法一般用于血浆药物的浓度分析。
预处理技术支持固相萃取。据调查显示，固相萃取是当前预处理技术中应用最多的方法，它主要用于生物材料的药物提取以及活性物质提取。液相色谱工作者将需要检测的物质放入常压色谱柱当中去除杂质，然后再用相应的溶剂进行洗脱，将被测物质纯化。在这个过程中，常会用到氧化铝以及树脂等固定相。
预处理技术之超临界流体萃取。进行超临界流体萃取操作一般要在固定的温度以及压力下进行，通过特殊装置，将固体样品用超临界的二氧化碳流体进行提取。由于超临界流体萃取方法扩散速度非常快，分离操作不仅环保而且省时，常用于提取一些脂溶性物质。
液相色谱技术在定量分析中的仪器实验技术
仪器实验技术在液相色谱技术中占有非常重要的位置，它主要涉及流动相配置、色谱柱使用方法以及检测器使用技术三个方面，具体如下所述：
流动相配置。实验室液相色谱工作者在进行流动相配置时，必须使用符合有关规定和要求的溶剂和纯水。另外，为了保证流动相配置的质量，配置所使用的溶剂必须使用达到液相色谱纯度的溶剂，配置所用的纯水则必须使用电阻率为18欧姆米。配置完成之后还需要注意通过0.14微米的过滤膜过滤，这样不仅能有效保证流路管道通畅，还能防止溶剂被污染。除此之外，在进行液相色谱系统之前，工作人员需要对流动相进行脱气操作，防止气体溶解在溶剂中，破坏溶剂的纯度。
色谱柱使用方法。色谱柱作为液相色谱仪进行分离的重要组成部分，液相色谱工作者要注意保持色谱柱的效果以及延长色谱柱的寿命，如果色谱柱出现以上两个任一问题，对待测样品的检测结构都非常不利。因此，在使用色谱柱时，要在进样阀和色谱柱中间使用相应的过滤器，如在线过滤器，还要避免使用对固定相具有强侵蚀性的流动相组合，从而延长色谱柱的使用时间。
检测器使用技术。在液相色谱仪中，有三种常用的检测仪器，不同的检测器有不同的使用方法，检测器的好坏直接关系到液相色谱在定量分析中的应用，因此，必须对每一种检测器都有所了解，并掌握主要的三种检测仪器。
紫外检测器在使用时需要注意周围环境，一定要在固定的温度和压力下进行，否则会影响检测结果的准确度。荧光检测器相比紫外检测器灵敏度要高出很多，在使用时不能使用不稳定或具有较强吸收力的溶剂来作为流动相，并且在进行荧光检测时，待检测的样品需要配成低于0.000006g/mL浓度的样品。电化学检测器一般用于痕量分析，这种检测器对电极精密度要求非常高，因此，平时要注意对工作电极的保护，保证电化学检测器的灵敏度。另外，在使用电化学检测器时，需要注意消除气泡，减少金属离子干扰被测样品。
综上所述，液相色谱技术在定量分析中应用应该注意预处理技术和仪器实验技术的使用，为了保证样品定量分析结果的准确度，在使用预处理技术时需要根据样品的属性选择科学合理的预处理方法，并且按照相关规定和要求使用检测仪器。
随着我国科学技术的不断发展进步，色谱分离柱等低噪音高灵敏的检测器和数据处理系统也随之出现，据相关研究表明，液相色谱技术方法非常稳定，能够快速分离检测物质，并且检验结果十分准确，在实验室中非常受到液相色谱工作者的青睐，液相色谱技术已经成为实验室中应用最为广泛的技术。比如：液相色谱工作者常常把液相色谱技术应用到定量分析中，包括我们日常生活中所食的食品营养素含量分析、血和药浓度检测以及生物活性物质分析等等。在本文中，笔者将对液相色谱技术在定量分析中的应用进行研究探讨。
液相色谱仪的组成
液相色谱仪是一种对混合物质进行分离的分析鉴定仪器，随着科学技术的不断发展，现代液相色谱仪也发展得更加符合实验室工作要求。在液相色谱仪的组成当中，高压输液泵、色谱柱以及检测器占有非常重要的位置，具体如下所述：
液相色谱仪之高压输液泵。由于高压输液泵具有耐高压、输出流量比较稳定以及流量精度极高等特点，其在液相色谱分析中应用极为广泛，它通过柱塞泵电机驱动凸轮运转，将柱塞杆往液缸内部反复搅动，使泵腔内部的液体周期性的以高压状态排出，从而使样品进入色谱柱当中，让样品从色谱柱填料与流动相分离开来。
液相色谱仪之色谱柱。液相色谱仪色谱分离是根据样品的不同成分之间的配比系数，通过色谱柱实现多次吸附和分析，从而将样品混合物分离出来。其中，色谱柱一般由色谱柱头螺丝、色谱柱筛板、色谱柱管、色谱柱填料以及色谱柱堵头组成，其内壁一般由直形不锈钢管材料制作，这种材料都是经过高度抛光处理的材料，可用于有机溶剂以及水溶性缓冲盐液等。另外，为了更好的实现样品混合物质分离，液相色谱固定相基质一般采用无机基质和有机基质两种，无机基质可以通过样品物质表面引入多个功能基因进行不同程度的分离，有机基质化学物质相对稳定，可以保证样品混合物质分离的准确性和高精度性。
液相色谱仪之检测器。
在液相色谱仪中，除了色谱柱和高压输液泵是非常重要的分析仪器之外，检测器同样也具有非常重要的作用。检测器主要用于检测样品混合物在经过色谱柱分离之后其成分浓度的变化，为定量分析提供相应的数据。其中，检测器主要分为UVD（紫外线吸收检测器）、FLD（荧光检测器）以及电化学检测器等等。UVD（紫外线吸收检测器）是以上三种检测器中应用范围最为广泛的检测器，它利用自身紫外线光可以吸收的特点来检测样品混合物质浓度，灵敏性非常高，并且不具有破坏性。FLD（荧光检测器）可以吸收一定长度的波长的光，可以用来做梯度分析，虽然没有UVD（紫外线吸收检测器）应用的范围广，但是作为选择性的检测器还是非常不错的。至于电化学检测器，这是一种灵敏度极强的选择器，它的固体工作电极主要是使用玻璃碳电极材料制作，寿命较其他检测器极长。
液相色谱技术在定量分析中的預处理技术
由于天然样品的构成非常复杂，实验室液相色谱工作人员在进行天然样品成分分析时，都需要进行预处理，将天然样品的组成成分进行提取，再进一步纯化浓缩，才能得到准确的检测结果。在下文中，笔者讲为大家介绍一些常用的天然样品预处理方法，以供大家分析研究。
预处理技术之沉淀提取。沉淀提取在预处理技术中是一种比较传统的提取方法，它具有操作简单以及经济适用的特点。它主要是通过在天然样品中添加沉淀剂，让天然样品中的大分子在不进行分析的情况下就可以沉淀出来，然后再通过离心操作，选取上清液分析天然样品成分。这种方法非常适合生理体液和组织体液样品的定量分析，不仅节约了检测成本，还能使检验结果更加准确。
预处理技术之溶剂萃取。溶剂萃取是指将天然样品的成分进行提取、浓缩。往往在天然样品中添加的萃取剂越多，提取被测物质的次数也就越多，但是相对应的萃取率也就更高。这种方法一般用于血浆药物的浓度分析。
预处理技术支持固相萃取。据调查显示，固相萃取是当前预处理技术中应用最多的方法，它主要用于生物材料的药物提取以及活性物质提取。液相色谱工作者将需要检测的物质放入常压色谱柱当中去除杂质，然后再用相应的溶剂进行洗脱，将被测物质纯化。在这个过程中，常会用到氧化铝以及树脂等固定相。
预处理技术之超临界流体萃取。进行超临界流体萃取操作一般要在固定的温度以及压力下进行，通过特殊装置，将固体样品用超临界的二氧化碳流体进行提取。由于超临界流体萃取方法扩散速度非常快，分离操作不仅环保而且省时，常用于提取一些脂溶性物质。
液相色谱技术在定量分析中的仪器实验技术
仪器实验技术在液相色谱技术中占有非常重要的位置，它主要涉及流动相配置、色谱柱使用方法以及检测器使用技术三个方面，具体如下所述：
流动相配置。实验室液相色谱工作者在进行流动相配置时，必须使用符合有关规定和要求的溶剂和纯水。另外，为了保证流动相配置的质量，配置所使用的溶剂必须使用达到液相色谱纯度的溶剂，配置所用的纯水则必须使用电阻率为18欧姆米。配置完成之后还需要注意通过0.14微米的过滤膜过滤，这样不仅能有效保证流路管道通畅，还能防止溶剂被污染。除此之外，在进行液相色谱系统之前，工作人员需要对流动相进行脱气操作，防止气体溶解在溶剂中，破坏溶剂的纯度。
色谱柱使用方法。色谱柱作为液相色谱仪进行分离的重要组成部分，液相色谱工作者要注意保持色谱柱的效果以及延长色谱柱的寿命，如果色谱柱出现以上两个任一问题，对待测样品的检测结构都非常不利。因此，在使用色谱柱时，要在进样阀和色谱柱中间使用相应的过滤器，如在线过滤器，还要避免使用对固定相具有强侵蚀性的流动相组合，从而延长色谱柱的使用时间。
检测器使用技术。在液相色谱仪中，有三种常用的检测仪器，不同的检测器有不同的使用方法，检测器的好坏直接关系到液相色谱在定量分析中的应用，因此，必须对每一种检测器都有所了解，并掌握主要的三种检测仪器。
紫外检测器在使用时需要注意周围环境，一定要在固定的温度和压力下进行，否则会影响检测结果的准确度。荧光检测器相比紫外检测器灵敏度要高出很多，在使用时不能使用不稳定或具有较强吸收力的溶剂来作为流动相，并且在进行荧光检测时，待检测的样品需要配成低于0.000006g/mL浓度的样品。电化学检测器一般用于痕量分析，这种检测器对电极精密度要求非常高，因此，平时要注意对工作电极的保护，保证电化学检测器的灵敏度。另外，在使用电化学检测器时，需要注意消除气泡，减少金属离子干扰被测样品。
综上所述，液相色谱技术在定量分析中应用应该注意预处理技术和仪器实验技术的使用，为了保证样品定量分析结果的准确度，在使用预处理技术时需要根据样品的属性选择科学合理的预处理方法，并且按照相关规定和要求使用检测仪器。
