邵阳学院周边餐馆一次性餐盒使用前微生物污染情况
冯波++欧阳娟++鹿炎++吴胜利++夏阿林
随着人们生活节奏的加快，一次性餐盒开始被人们广泛的使用。然而一次性餐盒在使用之前可能存在一定的安全隐患。经过调查统计，100名同学中有83位同学在使用一次性餐盒之前没有进行清洗，因此我们对邵阳学院周边餐馆一次性餐盒使用前的微生物污染情况进行调查，其中包括菌落总数的测定以及大肠埃希氏菌群的测定。测定一次性餐盒的菌落总数是用来检测一次性餐盒在使用前的细菌污染程度的一个重要指标。大肠埃希氏菌群主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价一次性餐盒的卫生质量，具有广泛的卫生学意义，它反映了一次性餐盒是否被粪便污染，同时间接地指出食品是否有肠道致病菌污染的可能性。
材料和方法
材料
一次性餐盒样品取自邵阳学院周边的小型餐馆、个体饮食摊点临使用前的样本30份，分两个批次采集。每一份样品10个餐盒，取好样品后均放入未拆封的购物袋中，12h内检测。
培养基为牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂20g、加入1000ml去离子水中，调节pH=7.0±7.2，分装于锥形瓶中，121℃，高压灭菌20min。
乳糖单料管：按GB/T 4789.28-2013中4.9规定。
方法
菌落总数的测定。样液的制备：从每份样品中抽取三个待检样品，在超净工作台用无菌水浸湿的无菌棉签擦拭样本，擦拭面积为2×2.5cm，每个样本擦拭五个点，使每份试样的擦拭面积为75cm?，擦拭后将棉签置于75ml无菌水中充分摇匀，制备1：1的原样。
采用十倍稀释法，用无菌吸量管吸取1ml原样，放入装有9ml无菌水的试管中。每一次稀释，吸量管都不能伸入试管中，并且每一次稀释都需要更换一支移液管。根据污染程度，选择合适稀释梯度即原液、10-1、10-2三个稀释梯度。
每一个稀释梯度制备三个培养皿，即从三个稀释梯度中用无菌移液管吸取0.5ml样液，加入到制作好的无菌平皿中，用涂布器将样液涂匀，动作要轻以减少机械损伤。将灭菌过后的一份样本采用相同的方法制备三个平皿作为对照。培养：将涂布好的平皿倒置放入37℃；的恒温培养箱中培养48h±2h。
计数：菌落计数以菌落形成单位（CFU）为计数单位。选取平皿上的菌落数为10-100CFU计数为适宜，用菌落平均数进行计算。
大肠埃希氏菌群的测定。在超净工作台用无菌吸量管将样液1ml加入到乳糖单料管中，经37℃、24h培养后观察杜氏小管中否有气泡以及单料管是否有颜色变化，如有上述变化则按GB 4789.3-2010 6.2的规定进行实验，如没有变化，则说明大肠埃希氏菌群未检出。
结果与分析
样品中菌落总数和大肠埃希氏菌群的测定
按照上述方法对邵阳学院周边的小型餐馆、个体饮食摊点的一次性餐盒使用前的微生物进行测定，实验采样时分为两批春季和秋季，菌落总数结果见表1、2。计数图片见图1。
由表1可知3、6、7、8、11、15号餐馆远高于总体平均值40 CFU/cm?。由采样时的记录可知这些餐馆菌落总是远高于总体平均值可能是由于一次性餐盒暴露在外面的时间过长、餐馆卫生状况不达标导致。因为我们采样的这几家餐馆的一次性餐盒都是直接暴露在空气中，没有用塑料袋装好，也没有倒扣着。相比4、12、13号餐馆在这些方面就做得好。餐盒没有使用时都用塑料袋装起来，餐馆卫生也保持较好。
表2中，各餐馆的菌落总是都低于平均值，这一批餐馆卫生总体都较前一批好，其中12号餐馆未检出菌落总数，这并不是说明12号餐馆没有细菌污染，只能说明该餐馆的卫生保持很好，对一次性餐盒的管理也很到位，还有我们的实验可能存在误差。由检测数据可知两批样本所检测出来的菌落总数有明显差异，春季菌落总数明显高于秋季，于陈少博等人的实验结果有相似之处。
通过实验，无论是春季还是秋季，大肠埃希氏菌群均未检出秋季采集前校门餐馆的一次性餐盒，春季采集后校门及其校内一些个体饮食摊点的一次性餐盒。由数据分析可知，秋季前校门一次性餐盒中的菌落总数明显高于春季后校门一次性餐盒中的菌落总数。主要是因为前校门人流量车流量大，空气中的菌落总数要略高于后校门，这也与被检测的餐馆、个体饮食摊点的卫生保持程度密切相关；也与邵阳地区在去年秋季和今年春季的温度有关，因为去年秋季温度要高于今年春季温度，而且温度对细菌和大肠埃希氏菌群的生长也会有明显的影响；也与我们采样时一次性餐盒暴露在外面的时间有关；还有与我们的实验时的操作方法有关。
讨论
随着一次性餐盒的广泛使用，人们对一次性餐盒卫生情况的关注度也越来越高，因为一次性餐盒的卫生情况直接影响着人们的健康。
通过实验，我们发现邵阳学院周边一次性餐盒检测的30份样品中，秋季菌落总数明显高于春季。虽然样品中未检出大肠埃希氏菌群，但是样品中仍可能存在有大肠埃希氏菌群。因为此次检测的样品总量并不是很大，实验操作上可能也会存在一定的误差，所以對于不合格的小型餐馆、个体饮食摊点的一次性餐盒，建议有关部门加强对一次性餐盒生产质量的监管，从源头上降低一次性餐盒微生物的污染。
商家可以使用干净的保鲜袋将一次性餐盒封存好，只在使用时开袋，或是使用消毒的瓷器餐具、不锈钢餐具供顾客使用。
大家可以在使用一次性餐盒之前进行清洗以减少微生物对人体的危害。像我们的实验中，也检测出菌落总数符合标准的餐馆。说明在卫生方面保持好，并且使用合适的一次性餐盒保存方法还是能起到降低菌落总数的作用。
随着人们生活节奏的加快，一次性餐盒开始被人们广泛的使用。然而一次性餐盒在使用之前可能存在一定的安全隐患。经过调查统计，100名同学中有83位同学在使用一次性餐盒之前没有进行清洗，因此我们对邵阳学院周边餐馆一次性餐盒使用前的微生物污染情况进行调查，其中包括菌落总数的测定以及大肠埃希氏菌群的测定。测定一次性餐盒的菌落总数是用来检测一次性餐盒在使用前的细菌污染程度的一个重要指标。大肠埃希氏菌群主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价一次性餐盒的卫生质量，具有广泛的卫生学意义，它反映了一次性餐盒是否被粪便污染，同时间接地指出食品是否有肠道致病菌污染的可能性。
材料和方法
材料
一次性餐盒样品取自邵阳学院周边的小型餐馆、个体饮食摊点临使用前的样本30份，分两个批次采集。每一份样品10个餐盒，取好样品后均放入未拆封的购物袋中，12h内检测。
培养基为牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂20g、加入1000ml去离子水中，调节pH=7.0±7.2，分装于锥形瓶中，121℃，高压灭菌20min。
乳糖单料管：按GB/T 4789.28-2013中4.9规定。
方法
菌落总数的测定。样液的制备：从每份样品中抽取三个待检样品，在超净工作台用无菌水浸湿的无菌棉签擦拭样本，擦拭面积为2×2.5cm，每个样本擦拭五个点，使每份试样的擦拭面积为75cm?，擦拭后将棉签置于75ml无菌水中充分摇匀，制备1：1的原样。
采用十倍稀释法，用无菌吸量管吸取1ml原样，放入装有9ml无菌水的试管中。每一次稀释，吸量管都不能伸入试管中，并且每一次稀释都需要更换一支移液管。根据污染程度，选择合适稀释梯度即原液、10-1、10-2三个稀释梯度。
每一个稀释梯度制备三个培养皿，即从三个稀释梯度中用无菌移液管吸取0.5ml样液，加入到制作好的无菌平皿中，用涂布器将样液涂匀，动作要轻以减少机械损伤。将灭菌过后的一份样本采用相同的方法制备三个平皿作为对照。培养：将涂布好的平皿倒置放入37℃；的恒温培养箱中培养48h±2h。
计数：菌落计数以菌落形成单位（CFU）为计数单位。选取平皿上的菌落数为10-100CFU计数为适宜，用菌落平均数进行计算。
大肠埃希氏菌群的测定。在超净工作台用无菌吸量管将样液1ml加入到乳糖单料管中，经37℃、24h培养后观察杜氏小管中否有气泡以及单料管是否有颜色变化，如有上述变化则按GB 4789.3-2010 6.2的规定进行实验，如没有变化，则说明大肠埃希氏菌群未检出。
结果与分析
样品中菌落总数和大肠埃希氏菌群的测定
按照上述方法对邵阳学院周边的小型餐馆、个体饮食摊点的一次性餐盒使用前的微生物进行测定，实验采样时分为两批春季和秋季，菌落总数结果见表1、2。计数图片见图1。
由表1可知3、6、7、8、11、15号餐馆远高于总体平均值40 CFU/cm?。由采样时的记录可知这些餐馆菌落总是远高于总体平均值可能是由于一次性餐盒暴露在外面的时间过长、餐馆卫生状况不达标导致。因为我们采样的这几家餐馆的一次性餐盒都是直接暴露在空气中，没有用塑料袋装好，也没有倒扣着。相比4、12、13号餐馆在这些方面就做得好。餐盒没有使用时都用塑料袋装起来，餐馆卫生也保持较好。
表2中，各餐馆的菌落总是都低于平均值，这一批餐馆卫生总体都较前一批好，其中12号餐馆未检出菌落总数，这并不是说明12号餐馆没有细菌污染，只能说明该餐馆的卫生保持很好，对一次性餐盒的管理也很到位，还有我们的实验可能存在误差。由检测数据可知两批样本所检测出来的菌落总数有明显差异，春季菌落总数明显高于秋季，于陈少博等人的实验结果有相似之处。
通过实验，无论是春季还是秋季，大肠埃希氏菌群均未检出秋季采集前校门餐馆的一次性餐盒，春季采集后校门及其校内一些个体饮食摊点的一次性餐盒。由数据分析可知，秋季前校门一次性餐盒中的菌落总数明显高于春季后校门一次性餐盒中的菌落总数。主要是因为前校门人流量车流量大，空气中的菌落总数要略高于后校门，这也与被检测的餐馆、个体饮食摊点的卫生保持程度密切相关；也与邵阳地区在去年秋季和今年春季的温度有关，因为去年秋季温度要高于今年春季温度，而且温度对细菌和大肠埃希氏菌群的生长也会有明显的影响；也与我们采样时一次性餐盒暴露在外面的时间有关；还有与我们的实验时的操作方法有关。
讨论
随着一次性餐盒的广泛使用，人们对一次性餐盒卫生情况的关注度也越来越高，因为一次性餐盒的卫生情况直接影响着人们的健康。
通过实验，我们发现邵阳学院周边一次性餐盒检测的30份样品中，秋季菌落总数明显高于春季。虽然样品中未检出大肠埃希氏菌群，但是样品中仍可能存在有大肠埃希氏菌群。因为此次检测的样品总量并不是很大，实验操作上可能也会存在一定的误差，所以對于不合格的小型餐馆、个体饮食摊点的一次性餐盒，建议有关部门加强对一次性餐盒生产质量的监管，从源头上降低一次性餐盒微生物的污染。
商家可以使用干净的保鲜袋将一次性餐盒封存好，只在使用时开袋，或是使用消毒的瓷器餐具、不锈钢餐具供顾客使用。
大家可以在使用一次性餐盒之前进行清洗以减少微生物对人体的危害。像我们的实验中，也检测出菌落总数符合标准的餐馆。说明在卫生方面保持好，并且使用合适的一次性餐盒保存方法还是能起到降低菌落总数的作用。
