酱油与白酒中邻苯二甲酸二甲酯的化学发光酶免疫分析方法研究
朱彬等
摘 要 本研究以邻苯二甲酸二甲酯(DMP)为研究目标,以4氨基邻苯二甲酸二甲酯为半抗原,通过重氮化法偶联载体蛋白并免疫动物,制备针对DMP的特异性兔多克隆抗体。通过棋盘滴定法和单因素实验确定最佳的实验参数,即包被原浓度为50 μg/L,一抗浓度为92.5 μg/L,二抗浓度为1 μg/mL,药物稀释液为pH 6.0的纯水,竞争反应时间为40 min,基于此建立了间接竞争化学发光酶联免疫分析法检测DMP。本方法对DMP的检出限为0.29 μg/L,线性检测范围为0.74~30.32 μg/L,与13种结构和功能类似物的交叉反应率均<5%,通过倍比稀释降低白酒、酱油样品基质干扰,对样品的平均回收率在80.2%~116.0%之间,平均相对标准偏差<3.6%,结果与GCMS法的测定结果相符。本方法适用于食品样品中DMP的快速检测。
摘 要 本研究以邻苯二甲酸二甲酯(DMP)为研究目标,以4氨基邻苯二甲酸二甲酯为半抗原,通过重氮化法偶联载体蛋白并免疫动物,制备针对DMP的特异性兔多克隆抗体。通过棋盘滴定法和单因素实验确定最佳的实验参数,即包被原浓度为50 μg/L,一抗浓度为92.5 μg/L,二抗浓度为1 μg/mL,药物稀释液为pH 6.0的纯水,竞争反应时间为40 min,基于此建立了间接竞争化学发光酶联免疫分析法检测DMP。本方法对DMP的检出限为0.29 μg/L,线性检测范围为0.74~30.32 μg/L,与13种结构和功能类似物的交叉反应率均<5%,通过倍比稀释降低白酒、酱油样品基质干扰,对样品的平均回收率在80.2%~116.0%之间,平均相对标准偏差<3.6%,结果与GCMS法的测定结果相符。本方法适用于食品样品中DMP的快速检测。