待定模板印迹聚合物对高丰度鸡蛋清蛋白质的脱除

杨春 栾新杰 刘国峰 周兴璐 王建 胡效亚
1引言
在蛋白质组学研究中,人们已经积累了大量关于已知蛋白质的数据。 目前的研究重点主要集中在发现具有新功能、或与疾病诊断和治疗相关的蛋白质方面\[1\]。为了从复杂样品里提取和鉴定未知的低丰度蛋白质,样品分离或高丰度蛋白质的脱除是十分必要的\[2~4\]。在各种蛋白质脱除方法中,使用抗体、染料或者配基的亲和技术是最常用的方法\[5~10\],其它方法还包括多维分离\[11\]、限进介质(Restrictedaccess)材料\[12\]或者集成方法\[13,14\]。
印迹材料广泛涉及分子识别、分离及催化等领域\[15~21\],其中,冰胶(Cryogel)聚合物是一种大孔亲水性材料,具有良好的稳定性及传质性能,适于大分子(如蛋白质)的印迹研究,也可用于高丰度蛋白质的脱除\[22\]。本研究组曾报道了处理复杂样品的冰胶材料,其中“待定模板”印迹聚合物起着关键作用,印迹位点的种类及数量可通过改变模板的浓度进行调节\[23,24\]。这类聚合物可将样品拆分为两部分。一部分吸附在聚合物上,一部分保留在溶液中。根据这种方法,理论上可用n个聚合物将复杂样品分成任意n+1份,充分降低样品的复杂性,从而有利于蛋白质组学研究或生物标记物的发现。
本研究合成了4个冰胶聚合物,其中3个印迹聚合物均显示出高丰度蛋白质的脱除能力。在去除部分高丰度组分之后,流出液仍有3组蛋白质的信号。硼酸吸附实验表明,它们可能是糖基化成分。“待定模板”印迹聚合物在脱除高丰度蛋白质的同时,能够保留从而富集翻译后修饰蛋白质(如糖蛋白等)。
2实验部分
2.1材料与试剂
1引言
在蛋白质组学研究中,人们已经积累了大量关于已知蛋白质的数据。 目前的研究重点主要集中在发现具有新功能、或与疾病诊断和治疗相关的蛋白质方面\[1\]。为了从复杂样品里提取和鉴定未知的低丰度蛋白质,样品分离或高丰度蛋白质的脱除是十分必要的\[2~4\]。在各种蛋白质脱除方法中,使用抗体、染料或者配基的亲和技术是最常用的方法\[5~10\],其它方法还包括多维分离\[11\]、限进介质(Restrictedaccess)材料\[12\]或者集成方法\[13,14\]。
印迹材料广泛涉及分子识别、分离及催化等领域\[15~21\],其中,冰胶(Cryogel)聚合物是一种大孔亲水性材料,具有良好的稳定性及传质性能,适于大分子(如蛋白质)的印迹研究,也可用于高丰度蛋白质的脱除\[22\]。本研究组曾报道了处理复杂样品的冰胶材料,其中“待定模板”印迹聚合物起着关键作用,印迹位点的种类及数量可通过改变模板的浓度进行调节\[23,24\]。这类聚合物可将样品拆分为两部分。一部分吸附在聚合物上,一部分保留在溶液中。根据这种方法,理论上可用n个聚合物将复杂样品分成任意n+1份,充分降低样品的复杂性,从而有利于蛋白质组学研究或生物标记物的发现。
本研究合成了4个冰胶聚合物,其中3个印迹聚合物均显示出高丰度蛋白质的脱除能力。在去除部分高丰度组分之后,流出液仍有3组蛋白质的信号。硼酸吸附实验表明,它们可能是糖基化成分。“待定模板”印迹聚合物在脱除高丰度蛋白质的同时,能够保留从而富集翻译后修饰蛋白质(如糖蛋白等)。
2实验部分
2.1材料与试剂
1引言
在蛋白质组学研究中,人们已经积累了大量关于已知蛋白质的数据。 目前的研究重点主要集中在发现具有新功能、或与疾病诊断和治疗相关的蛋白质方面\[1\]。为了从复杂样品里提取和鉴定未知的低丰度蛋白质,样品分离或高丰度蛋白质的脱除是十分必要的\[2~4\]。在各种蛋白质脱除方法中,使用抗体、染料或者配基的亲和技术是最常用的方法\[5~10\],其它方法还包括多维分离\[11\]、限进介质(Restrictedaccess)材料\[12\]或者集成方法\[13,14\]。
印迹材料广泛涉及分子识别、分离及催化等领域\[15~21\],其中,冰胶(Cryogel)聚合物是一种大孔亲水性材料,具有良好的稳定性及传质性能,适于大分子(如蛋白质)的印迹研究,也可用于高丰度蛋白质的脱除\[22\]。本研究组曾报道了处理复杂样品的冰胶材料,其中“待定模板”印迹聚合物起着关键作用,印迹位点的种类及数量可通过改变模板的浓度进行调节\[23,24\]。这类聚合物可将样品拆分为两部分。一部分吸附在聚合物上,一部分保留在溶液中。根据这种方法,理论上可用n个聚合物将复杂样品分成任意n+1份,充分降低样品的复杂性,从而有利于蛋白质组学研究或生物标记物的发现。
本研究合成了4个冰胶聚合物,其中3个印迹聚合物均显示出高丰度蛋白质的脱除能力。在去除部分高丰度组分之后,流出液仍有3组蛋白质的信号。硼酸吸附实验表明,它们可能是糖基化成分。“待定模板”印迹聚合物在脱除高丰度蛋白质的同时,能够保留从而富集翻译后修饰蛋白质(如糖蛋白等)。
2实验部分
2.1材料与试剂
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