不同产地铁皮石斛水提物的抗疲劳作用研究
谢唐贵 陈敬民 李燕婧
摘要：目的 探讨不同产地铁皮石斛水提物的抗疲劳作用。方法 取4个产地铁皮石斛制备水提取物，进行小鼠负重游泳及游泳疲劳实验，测定力竭游泳时间、血乳酸及肝糖原含量，评价铁皮石斛其抗疲劳作用。结果 铁皮石斛水提取物显著延长小鼠力竭游泳时间、降低疲劳小鼠血清乳酸含量及增加疲劳小鼠肝糖原含量。结论 铁皮石斛水提取物具有抗疲劳作用。
关键词：铁皮石斛;水提物;游泳时间;乳酸;抗疲劳
中图分类号：R965 文献标志码：A 文章编号：1007-2349（2018）08-0066-02
Study on Anti-fatigue Effect of Aqueous Extracts from Dendrobium
Candidum in Different Producing Areas
XIE Tang-gui1，2，CHEN Jing-min LI Yan-jing1，2
（1.Guangxi Institute of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica，Nanning 530022，China;
2.Key Laboratory of Quality Standards of Traditional Chinese Medicine of Guangxi，Nanning 530022，China）
【Abstract】Objective：To study the anti-fatigue effect of aqueous extracts of Dendrobium candidum produced in different areas.Methods：Aqueous extracts of Dendrobium candidum in four areas were selected to prepare aqueous extracts.The mice were subjected to weight-bearing swimming and swimming fatigue tests.The exhaustive swimming time，blood lactate and hepatic glycogen content were determined to evaluate the anti-fatigue effect of Dendrobium candidum.Results：The aqueous extracts of Dendrobium candidum significantly prolonged the swimming time of the mice，reduced the serum lactic acid content of fatigued mice and increased the liver glycogen content of fatigued mice.Conclusion：The aqueous extracts of Dendrobium candidum have anti-fatigue effect.
【Key words】Dendrobium candidum，aqueous extract，swimming time，lactic acid，anti-fatigue
鐵皮石斛[1]是兰科石斛属多年附生植物Dendrobium offcinale Kinura et Migo的干燥茎，主要分布于西南和江南各省，具有滋阴清热、益胃生津、延缓衰老、免疫调节等功效，用于阴伤津亏，口干烦渴，食少干呕，病后虚热，目暗不明等症。由于其全面的滋阴补益作用和广泛的保健功效，铁皮石斛被视为滋阴珍品，在民间素有“救命仙草”之称。近年对铁皮石斛的药理作用研究[2]表明，铁皮石斛具有抗疲劳、抗氧化、抗肿瘤、增强免疫、保肝及促消化等药理作用。铁皮石斛其野生资源已濒临灭绝，被国家列为重点保护的药用植物之一，广西不同地域进行了大量人工培植，本研究选择抗疲劳作用药效指标开展药理实验，对不同产地铁皮石斛进行内在功效评价。
1 材料
1.1 药物 铁皮石斛，分别来源于云南、广西桂林、广西凌云及广西容县，经广西中医药研究院中药所黄云峰副研究员鉴定为Dendrobium offcinale Kimura et Migo。由中药所提取成水提物，使用前用蒸馏水配成所需浓度。
1.2 动物 KM小鼠，18～22 g，SPF级，由广西医科大学实验动物中心提供（动物合格证号：SCXK桂2014-0002）;饲养于SPF级环境，温度（25±2）℃，湿度（60±10）%。
1.3 试剂 乳酸测试盒，批号：20150910、肝糖原测试盒，批号：20150910，南京建成生物工程研究所出品。
1.4 仪器 TDL-5-A低速离心机，上海安亭科学仪器厂;B11500-BS电热恒温培养箱，上海跃进医疗器械有限公司;1510酶标仪，Thermo Fisher Scientific Oy。
1.5 统计学方法 数据为（x±s），进行组间t检验。
2 方法
2.1 对负重游泳小鼠游泳时间的影响[3] 选取昆明种小鼠，♀♂各半，随机分组，即空白对照组、铁皮石斛提取物组，每组10只。空白对照组小鼠给予蒸馏水，其余各组按1.633 g生药/kg剂量给予各铁皮石斛提取物，每天1次，连续10 d。于末次给药后1 h，将小鼠置于游泳箱[水深40 cm，水温（25±1.0）℃]中游泳，小鼠尾根部负荷5%体质重铅块，记录小鼠开始游泳到体力耗尽沉入水面8 s不能浮出水面为止的时间，该时间为小鼠力竭游泳时间。以游泳时间作为判定小鼠耐力的指标，比较各组的差异。
2.2 对游泳疲劳小鼠血乳酸及肝糖原的影响[4] 选取昆明种小鼠，♀♂各半，随机分组，即空白对照组、铁皮石斛提取物组，每组10只。空白对照组小鼠给予蒸馏水，其余各组按1.633 g生药/kg剂量给予各铁皮石斛提取物，每天1次，连续10 d。于末次给药后1 h，将小鼠置于游泳箱[水深40 cm，水温（30±1.0）℃]中不负重游泳90 min]，分别于游泳前0 min、游泳结束0 min及20 min时间点眼球取血，制备血清，利用试剂盒检测测血清乳酸（LD），末次取血后脱颈椎处死，取肝脏置于冰培养皿上，经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，制备肝组织匀浆，按照试剂盒说明书测定肝糖原含量。以血清乳酸、肝糖原作为小鼠抗疲劳作用指标，比较各组的差异。
3 结果
3.1 对负重游泳小鼠游泳时间的影响 不同产地铁皮石斛水提物均可显著延长小鼠负重力竭性游泳的游泳时间，与空白对照组均有极显著性差异（P<0.01）。结果见表1。
表1 铁皮石斛对负重游泳小鼠游泳时间的影响（n=10）
注：与空白对照组比较，*P<0.01
3.2 对游泳疲劳小鼠血乳酸及肝糖原的影响 不同产地铁皮石斛水提物均显著降低游泳疲劳小鼠血清乳酸含量，其中云南、凌云及容县铁皮石斛与对照组比较有显著性差异 （P<0.05），桂林铁皮石斛有极显著性差异（P<0.01）;不同产地铁皮石斛水提物均显著增加游泳疲劳小鼠肝糖含量，其中桂林铁皮石斛与对照组比较有显著性差异（P<0.05），云南铁皮石斛有极显著性差异（P<0.01），凌云及容县铁皮石斛均有非常显著性差异（P<0.001）。结果见表2。
表2 铁皮石斛对游泳疲劳小鼠血清乳酸及肝糖原的影响
注：与空白对照组比较，*P<0.05，△P<0.01，▲P<0.001
4 结论
铁皮石斛能显著延长小鼠负重力竭性游泳的游泳时间，说明铁皮石斛具有提高运动耐力、延缓运动疲劳的作用;在生化层面上，机体内血清乳酸含量的上升反映机体疲劳程度，肝糖原含量增加反映机体疲劳时供能的能力，本实验铁皮石斛明显降低疲劳小鼠乳酸含量、增加肝糖原含量，表明铁皮石斛具有显著的抗疲劳作用。从实验结果可知，不同产地铁皮石斛水提取物均具有抗疲劳作用，但不同产地的铁皮石斛药理作用略有区别。
参考文献：
[1]国家药典委员会.中华人民共和國药典[M].北京：中国医药科技出版社，2015：282-283.
[2]吕圭源，颜美秋，陈素红，等.铁皮石斛功效相关药理作用研究进展[J].中国中药杂志，2013，38（4）：489-493.
[3]俞浩，张成孜，毛斌斌.滁菊多糖抗疲劳耐缺氧作用效果观察[J].食品工业科技，2014，35（12）：365-367，372.
[4]肖云峰，王玉华，丛丽华，等.羊外肾胶囊抗疲劳作用机制研究[J].中医药导报，2015，21（13）：46-48.
（收稿日期：2018-03-19）
摘要：目的 探讨不同产地铁皮石斛水提物的抗疲劳作用。方法 取4个产地铁皮石斛制备水提取物，进行小鼠负重游泳及游泳疲劳实验，测定力竭游泳时间、血乳酸及肝糖原含量，评价铁皮石斛其抗疲劳作用。结果 铁皮石斛水提取物显著延长小鼠力竭游泳时间、降低疲劳小鼠血清乳酸含量及增加疲劳小鼠肝糖原含量。结论 铁皮石斛水提取物具有抗疲劳作用。
关键词：铁皮石斛;水提物;游泳时间;乳酸;抗疲劳
中图分类号：R965 文献标志码：A 文章编号：1007-2349（2018）08-0066-02
Study on Anti-fatigue Effect of Aqueous Extracts from Dendrobium
Candidum in Different Producing Areas
XIE Tang-gui1，2，CHEN Jing-min LI Yan-jing1，2
（1.Guangxi Institute of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica，Nanning 530022，China;
2.Key Laboratory of Quality Standards of Traditional Chinese Medicine of Guangxi，Nanning 530022，China）
【Abstract】Objective：To study the anti-fatigue effect of aqueous extracts of Dendrobium candidum produced in different areas.Methods：Aqueous extracts of Dendrobium candidum in four areas were selected to prepare aqueous extracts.The mice were subjected to weight-bearing swimming and swimming fatigue tests.The exhaustive swimming time，blood lactate and hepatic glycogen content were determined to evaluate the anti-fatigue effect of Dendrobium candidum.Results：The aqueous extracts of Dendrobium candidum significantly prolonged the swimming time of the mice，reduced the serum lactic acid content of fatigued mice and increased the liver glycogen content of fatigued mice.Conclusion：The aqueous extracts of Dendrobium candidum have anti-fatigue effect.
【Key words】Dendrobium candidum，aqueous extract，swimming time，lactic acid，anti-fatigue
鐵皮石斛[1]是兰科石斛属多年附生植物Dendrobium offcinale Kinura et Migo的干燥茎，主要分布于西南和江南各省，具有滋阴清热、益胃生津、延缓衰老、免疫调节等功效，用于阴伤津亏，口干烦渴，食少干呕，病后虚热，目暗不明等症。由于其全面的滋阴补益作用和广泛的保健功效，铁皮石斛被视为滋阴珍品，在民间素有“救命仙草”之称。近年对铁皮石斛的药理作用研究[2]表明，铁皮石斛具有抗疲劳、抗氧化、抗肿瘤、增强免疫、保肝及促消化等药理作用。铁皮石斛其野生资源已濒临灭绝，被国家列为重点保护的药用植物之一，广西不同地域进行了大量人工培植，本研究选择抗疲劳作用药效指标开展药理实验，对不同产地铁皮石斛进行内在功效评价。
1 材料
1.1 药物 铁皮石斛，分别来源于云南、广西桂林、广西凌云及广西容县，经广西中医药研究院中药所黄云峰副研究员鉴定为Dendrobium offcinale Kimura et Migo。由中药所提取成水提物，使用前用蒸馏水配成所需浓度。
1.2 动物 KM小鼠，18～22 g，SPF级，由广西医科大学实验动物中心提供（动物合格证号：SCXK桂2014-0002）;饲养于SPF级环境，温度（25±2）℃，湿度（60±10）%。
1.3 试剂 乳酸测试盒，批号：20150910、肝糖原测试盒，批号：20150910，南京建成生物工程研究所出品。
1.4 仪器 TDL-5-A低速离心机，上海安亭科学仪器厂;B11500-BS电热恒温培养箱，上海跃进医疗器械有限公司;1510酶标仪，Thermo Fisher Scientific Oy。
1.5 统计学方法 数据为（x±s），进行组间t检验。
2 方法
2.1 对负重游泳小鼠游泳时间的影响[3] 选取昆明种小鼠，♀♂各半，随机分组，即空白对照组、铁皮石斛提取物组，每组10只。空白对照组小鼠给予蒸馏水，其余各组按1.633 g生药/kg剂量给予各铁皮石斛提取物，每天1次，连续10 d。于末次给药后1 h，将小鼠置于游泳箱[水深40 cm，水温（25±1.0）℃]中游泳，小鼠尾根部负荷5%体质重铅块，记录小鼠开始游泳到体力耗尽沉入水面8 s不能浮出水面为止的时间，该时间为小鼠力竭游泳时间。以游泳时间作为判定小鼠耐力的指标，比较各组的差异。
2.2 对游泳疲劳小鼠血乳酸及肝糖原的影响[4] 选取昆明种小鼠，♀♂各半，随机分组，即空白对照组、铁皮石斛提取物组，每组10只。空白对照组小鼠给予蒸馏水，其余各组按1.633 g生药/kg剂量给予各铁皮石斛提取物，每天1次，连续10 d。于末次给药后1 h，将小鼠置于游泳箱[水深40 cm，水温（30±1.0）℃]中不负重游泳90 min]，分别于游泳前0 min、游泳结束0 min及20 min时间点眼球取血，制备血清，利用试剂盒检测测血清乳酸（LD），末次取血后脱颈椎处死，取肝脏置于冰培养皿上，经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，制备肝组织匀浆，按照试剂盒说明书测定肝糖原含量。以血清乳酸、肝糖原作为小鼠抗疲劳作用指标，比较各组的差异。
3 结果
3.1 对负重游泳小鼠游泳时间的影响 不同产地铁皮石斛水提物均可显著延长小鼠负重力竭性游泳的游泳时间，与空白对照组均有极显著性差异（P<0.01）。结果见表1。
表1 铁皮石斛对负重游泳小鼠游泳时间的影响（n=10）
注：与空白对照组比较，*P<0.01
3.2 对游泳疲劳小鼠血乳酸及肝糖原的影响 不同产地铁皮石斛水提物均显著降低游泳疲劳小鼠血清乳酸含量，其中云南、凌云及容县铁皮石斛与对照组比较有显著性差异 （P<0.05），桂林铁皮石斛有极显著性差异（P<0.01）;不同产地铁皮石斛水提物均显著增加游泳疲劳小鼠肝糖含量，其中桂林铁皮石斛与对照组比较有显著性差异（P<0.05），云南铁皮石斛有极显著性差异（P<0.01），凌云及容县铁皮石斛均有非常显著性差异（P<0.001）。结果见表2。
表2 铁皮石斛对游泳疲劳小鼠血清乳酸及肝糖原的影响
注：与空白对照组比较，*P<0.05，△P<0.01，▲P<0.001
4 结论
铁皮石斛能显著延长小鼠负重力竭性游泳的游泳时间，说明铁皮石斛具有提高运动耐力、延缓运动疲劳的作用;在生化层面上，机体内血清乳酸含量的上升反映机体疲劳程度，肝糖原含量增加反映机体疲劳时供能的能力，本实验铁皮石斛明显降低疲劳小鼠乳酸含量、增加肝糖原含量，表明铁皮石斛具有显著的抗疲劳作用。从实验结果可知，不同产地铁皮石斛水提取物均具有抗疲劳作用，但不同产地的铁皮石斛药理作用略有区别。
参考文献：
[1]国家药典委员会.中华人民共和國药典[M].北京：中国医药科技出版社，2015：282-283.
[2]吕圭源，颜美秋，陈素红，等.铁皮石斛功效相关药理作用研究进展[J].中国中药杂志，2013，38（4）：489-493.
[3]俞浩，张成孜，毛斌斌.滁菊多糖抗疲劳耐缺氧作用效果观察[J].食品工业科技，2014，35（12）：365-367，372.
[4]肖云峰，王玉华，丛丽华，等.羊外肾胶囊抗疲劳作用机制研究[J].中医药导报，2015，21（13）：46-48.
（收稿日期：2018-03-19）
