不规则抗体阳性和部分稀有血型样本库的建立和应用

    李京 徐群 吕红娟

    【摘要】目的 为帮助输血实验室准确鉴定不规则抗体和稀有血型，避免输血反应的发生，建立了不规则抗体阳性和稀有血型样本练习库。方法 对样本做血型、不规则抗体筛选和鉴定。结果 检出了ABO、Rh、MNSs、Leawis、P、kell、Duffy等系统的血型及其特异性抗体，并将样本置于室温或冰冻保存，记录结果，按照时间或抗体特异性，录入微机系统建成数据库。结论 建立的样本库，结果可靠，具有可持续性，部分样本已用于全省血型室间质控，效果良好。

    【关键词】 红细胞血型;稀有血型;不规则抗体阳性;样本库;建立应用

    【中图分类号】R446.6 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095.6681.2020.24..02

    【Abstract】Objective In order to help the transfusion laboratory to identify irregular antibody and rare blood group accurately and to avoid the occurrence of blood transfusion reaction， an irregular antibody positive and rare blood group sample bank was set up.Methods Blood type， irregular antibody screening and identification were performed on the samples.Results The blood types and specific antibodies of ABO， Rh， MNS， Leawais， P， kell and Duffy were detected. The samples were stored at room temperature or frozen， and the results were recorded.Conclusion The results are reliable and sustainable， and some samples have been used in the quality control of blood group in the whole province，and showed well results.

    【Key words】Red cell blood groups;Rare blood;Irregular antibody;Sample bank;Establishment and application

    随着输血事业的发展，各输血实验室的仪器设备更加标准化，方法也更加敏感，不规则抗体阳性和正反定型不符样本检出率大大提高，只有准确地鉴定血型和抗体特异性，并有针对性的输血，才能提高输血治疗效果。本室常年开展新生儿溶血病、疑难血型鉴定和疑难配血等红细胞血型和血型抗体检测，积累了丰富的临床经验，同时也收集了一些常见和部分罕见的有临床意义的不规则抗体阳性和正反定型不符样本。通过整理，拟建立一个不规则抗体阳性和稀有血型样本库，供大家观摩、模拟和练习，从而能尽快提高实验者的操作技能。报告如下。

    1 资料与方法

    1.1 样本

    部分来自临床送检患者，部分来自本中心献血员。

    1.2 试剂和仪器

    抗A、抗B、抗AB、抗H、抗A1、抗D（IgM、IgG、IgM+IgG）、IgM型抗C、抗c、抗E、抗e、抗M、抗N、抗P1、抗Lea、抗Leb 抗 Jka、抗Jkb、IgG型抗Fya、抗Fyb、A1细胞、A2细胞、A2B细胞、B细胞、O细胞、筛选细胞、谱细胞、抗球蛋白（IgG、IgG+C3d、C3d）、凝聚胺、微柱凝胶卡分别来自上海血液生物医药有限责任公司、Sanquin公司Diamed公司。离心机选用 KUBOTA公司的KA-2200型和HITACHI公司的himac MC450 Blood cell washing Centrifuge。

    1.3 方法

    均采用试管法和微柱凝胶方法。

    1.3.1 ABO血型

    首先用抗A、抗B、抗AB血清、A1细胞、B细胞做正反定型，如发现不符，则用抗A1、抗H血清、A2细胞、A2B细胞检测是否具有亚型特点，同时用抗A或抗B血清对红细胞做吸收放散实验，以证实红细胞上是否具有较弱A或B抗原，用O型红细胞检测血清中是否存在IgM型不规则抗体，并放置室温、4°C、37°C，比较不同温度下的反应情况，或选择不同厂家的试剂进行比较，如果条件允许，可以做唾液血型物质检测。

    1.3.2 RH血型

    首先用IgM抗D血清和红细胞在盐水介质中检测，如结果为阴性，再用IgG抗D或IgM+IgG抗D采用抗球蛋白方法检测，以排除弱D或部分D血型。RH表现型选用IgM型C、c、E、e、抗血清和红细胞，在室溫和37°C盐水介质中检测。

    1.3.3 其他血型

    M、N、S、P1、Lea、Leb、Jka、Jkb抗原均采用盐水试管法，s、Fya、Fyb抗原均采用抗球蛋白法。

    1.3.4 直接抗球蛋白试验

    用IgG+C3d、IgG、C3d试剂检测，其中IgG+C3d采用试管和微柱凝胶法，IgG、C3d均采用试管法。

    1.3.5 不规则抗体筛选

    用国内和国外一套或两套筛选细胞（每套3个细胞），采用盐水、抗球蛋白（试管、微柱凝胶）、凝聚胺等方法，并做自身对照。

    1.3.6 不规则抗体鉴定

    选用国内和国外一套或两套谱细胞（每套10～16个细胞），按3.5的方法，同时做针对性抗原检测，以证实抗体鉴定的准确性。