富血小板纤维蛋白对牙龈缺损软组织修复及再生能力的影响
戴莹 宋砚斌
[摘要]目的：探讨富血小板纤维蛋白（Platelet-rich fibrin，PRF）对牙龈缺损软组织修复及再生能力的影响。方法：按照随机数字表法将2019年1月-12月笔者医院收治的80例牙龈软组织缺损患者分为观察组与对照组，每组40例。两组分别在软组织缺损位置植入PRF膜与海奥口腔修复膜，比较两组的愈合时间及术后第5天、第10天的愈合率及创面分泌物中胶原酶-1水平;术后第5天，对两组患者的创面疼痛、肿胀及出血进行评分。结果：观察组的愈合时间明显短于对照组（P<0.05）;观察组在术后第5天、第10天的愈合率均明显高于对照组（P<0.05）;观察组术后第5天、第10天的创面分泌物中胶原酶-1水平均明显高于对照组（P<0.05）;观察组术后第5天的创面疼痛、肿胀及出血评分均明显低于对照组（P<0.05）。结论：PRF能够诱导牙龈缺损软组织的修复及再生。
[关键词]牙龈软组织缺损;富血小板纤维蛋白;修复;再生;胶原酶-1
[中图分类号]R781.5? ? [文献标志码]A? ? [文章编号]1008-6455（2020）12-0109-03
Effects of Platelet-rich Fibrin on Soft Tissue Repair and Regeneration of Periodontal Defects
DAI Ying，SONG Yan-bin
（Department of Stomatology， the First People's Hospital of Huai'an City， Huai'an 223300，Jiangsu，China）
Abstract： Objective? To discuss the effects of platelet-rich fibrin（PRF） on soft tissue repair and regeneration of periodontal defects. Methods According to the random number method， 80 patients with periodontal tissue defects who were divided into the observation group and the control group in our hospital from January to December 2019， with 40 patients in each group. PRF membrane and Haio oral repair membrane was implanted in the site of soft tissue defect in the observation group and the control group， respectively. The healing time was compared between the two groups. Thealing rate and collagenase-1 level of wound secretions were compared between the two groups at the 5th and 10th day after surgery. The wound pain， swelling and bleeding was scored in two groups at the 5th day after surgery. Results The healing time in the observation group was significantly shorter than that in the control group（P<0.05）. At the 5th and 10th day after surgery， the healing rate in the observation group was significantly higher than that in the control group（P<0.05）， the healing rate and collagenase-1 level of wound secretions in the observation group was significantly higher than that in the control group（P<0.05）. At the 5th day after surgery， the wound pain， swelling and bleeding scores in he observation group were significantly lower than that in the control group（P<0.05）. Conclusion? PRF could induce the soft tissue repair and regeneration of periodontal defects.
Key words：periodontal tissue defects; platelet-rich fibrin; repair; regeneration; collagenase-1
牙齦软组织缺损常由外伤、肿瘤及感染等因素导致，寻找一种能够使牙龈软组织黏膜的功能与形态接近理想状态的修复方法是口腔临床实践中研究的热点。邻近黏膜转移是一种比较理想的修复方式，但是供区及种植范围有限，缝合难度较大，且可能对术区周围组织产生影响[1]，不利于预后。随着生物材料学的不断发展，各种新型组织修复材料逐渐得到应用。富血小板纤维蛋白（Platelet-rich fibrin，PRF）是一种自体的白细胞和富血小板纤维生物材料，往往制备成膜状，用于创面的修复[2]。本研究旨在探讨PRF对牙龈缺损软组织修复及再生能力的影响，以期为临床治疗方案的制定提供参考。
1? 资料和方法
1.1 一般资料：选取2019年1月-12月笔者医院收治的80例牙龈软组织缺损患者为研究对象。按照随机数字表法将患者分为观察组和对照组，每组40例。观察组：男24例，女16例，年龄20～66岁，平均年龄（45.28±7.30）岁，缺损面积0.8mm×1.6mm～4.5mm×4.9mm;对照组：男22例，女18例，年龄22～65岁，平均年龄（44.96±7.11）岁，缺损面积0.9mm×1.5mm～4.8mm×5.0mm，两组患者的性别构成、年龄及缺损面积比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 纳入和排除标准：纳入标准：①由各种原因导致的牙龈软组织缺损;②软组织的缺损面积超过5mm×5mm;③年龄≥18岁;④本研究申报伦理审查并获得批准，患者均知情并签署知情同意书。排除标准：①伴有影响牙龈组织愈合的疾病;②伴有自身免疫性疾病、凝血功能异常及贫血等;③依从性较差者;④孕妇及哺乳期女性。
1.3 方法：术前对口腔进行清洗与消毒，将牙龈沟切开并将牙龈进行分离，将患牙拔除并将肉芽组织进行刮除，在窝洞内植入骨替代材料，平齐牙槽嵴顶。对照组采用海奥口腔修复膜（烟台正海生物科技股份有限公司）覆盖于骨替代材料表面，原膜的边缘超出骨替代材料植入区2mm，距离切口2～3mm，光学取模，严密拉拢缝合，关闭创口;观察组采用PRF膜覆盖于骨替代材料表面，方法同对照组。PRF膜的制备：取9ml静脉血加入抗凝血剂，进行离心（2 700r/min）12min，中间层即为PRF凝块（见图1），清除过多的细胞浆液及红细胞，置于PRF成型处理设备制成PRF膜。
1.4 观察指标：①记录两组的愈合时间及术后第5天、第10天的愈合率;②于术后第5天、第10天，采用酶联免疫吸附试验测定两组的创面分泌物中胶原酶-1水平，严格按照试剂盒操作规程进行操作;③于术后第5天，对两组的创面疼痛、肿胀、出血进行评分，采用视觉模拟评分法对创面疼痛进行评分，评分越高表示越疼痛;④依据文献[3]的分级评分方法对创面肿胀、出血进行评分，评分越高表示肿胀、出血越严重。
1.5 统计学分析：应用SPSS 22.0统计软件对数据进行分析，计量资料采用均数±标准差（x?±s）表示，组间比较采用t检验;计数资料采用[n（%）]表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。
2? 结果
2.1 两组愈合时间及愈合率的比较：两组之间愈合时间及术后第5天、第10天愈合率的比较，差异均具有统计学意义（P<0.05），见表1。
2.2 两组胶原酶-1水平的比较：两组术后第5天、第10天创面分泌物中胶原酶-1水平的比较，差异均具有统计学意义（P<0.05），见表2。
2.3 两组创面疼痛、肿胀及出血评分的比较：两组创面疼痛、肿胀及出血评分的比较，差异均具有统计学意义（P<0.05），见表3。
3? 讨论
血小板是由骨髓中成熟的巨核细胞胞质裂解脱而来的具有生物活性的小块胞质，最重要的功能是凝血以及止血，但也能够促进血管的形成、创面的愈合。PRF2001年由法国科学家Choukroun等发现，是继富血小板血浆后第二代血小板浓缩制品，是一种自体血液经过离心处理的富血小板纤维生物材料，无排斥及过敏反应[4]。PRF有三大主要组成部分：①细胞组分：PRF中不但含有丰富的血小板，还有少量白细胞和红细胞;②临时细胞外基质：一种由血液中自体纤维蛋白，包括纤维蛋白和玻连蛋白组成的三维支架;③生物活性分子：多达100余种的生物活性蛋白因子[5-6]。
有动物实验研究表明[7]，使用自体PRF能够促进上颌窦穿孔形成连续的新生上皮组织，效果优于胶原膜。一项犬口腔种植体植入的研究中[8]，采用PRF对创面进行覆盖，发现缺损的黏膜及骨缺得到很快愈合。王灿莉等[9]的研究发现PRF能够提高人牙龈成纤维细胞增殖活性;孙中毅[10]使用PRF膜对口腔软组织缺损位置植入进行覆盖，发现PRF能够促进缺损软组织的修复，促进创面的愈合。本研究比较了PRF与海奥口腔修复膜修复缺损牙龈软组织的效果，结果显示，PRF修复的创面愈合时间短于海奥口腔修复膜，不同观察时间点的创面愈合率明显高于海奥口腔修复膜，差异具有统计学意义（P<0.05）。PRF的三维纤维蛋白支架结构能够为组织修复提供场所，还能够保证细胞因子的稳定释放[11]，在促进创面愈合方面更具优势。PRF修复在不同观察时间点的创面分泌物中胶原酶-1水平明显高于海奥口腔修复膜，差异具有统计学意义（P<0.05）。胶原酶-1参与了牙龈成纤维细胞的增殖及细胞外基质合成，胶原酶-1水平增高使得成纤维细胞细胞提前进入增殖期，促进软组织的再生[12-13]。PRF修复的创面疼痛、肿胀及出血评分明显低于海奥口腔修复膜，差异具有统计学意义（P<0.05）。说明PRF中的大量细胞因子能够促进炎症细胞发生趋化，减轻炎症发应，PRF的白细胞及膜结构能够形成一种防御屏障，能够抵御外界致病因子的侵入，利于改善創面情况[14-15]。
综上所述，PRF能够诱导牙龈缺损软组织的修复及再生，改善创面状态，增加胶原酶-1水平，具有较好的临床价值。
[参考文献]
[1]董露，肖琼，孙勇.口腔软组织缺损修复的研究进展[J].西南国防医药，2015，43（2）：218-220.
[2]唐一月，余占海.富血小板纤维蛋白对软组织修复与再生影响的研究进展[J].中华口腔医学研究杂志（电子版），2019，13（2）：124-128.
[3]张占国，张倩.颊脂垫在口腔缺损修复中的应用[J].中国药物与临床，2020，20（1）：98-99.
