咸阳市2019年监督抽检小麦粉中过氧化苯甲酰的检测分析
郑欣欣 刘跳跳
摘 ? 要：本研究以过氧化苯甲酰为指标对小麦粉的质量进行分析，通过监督抽检了解辖区内的小麦粉安全状况，为辖区监管部门对小麦粉加工生产过程的监管提供了技术支撑。研究过程中，采用《小麦粉中过氧化苯甲酰的测定 高效液相色谱法》（GB/T 22325-2008）对3个市县的27家小麦粉生产企业共30批次小麦粉进行检测分析，并通过平行实验、加标回收实验、复测实验对不合格的小麦粉进行确认。结果显示，抽检的30批次小麦粉中，合格29批次，不合格1批次，不合格小麦粉的过氧化苯甲酰含量为0.032g/kg。结论为，通过对3个市县的小麦粉生产企业进行监督抽检，有效了解了辖区内小麦粉生产的安全状况，为3个市县的监管部门对小麦粉加工生产过程的监管提供了可靠的依据。
关键词：咸阳市 ?小麦粉 ?过氧化苯甲酰 ?食品安全 ?高效液相色谱法
1 引言
过氧化苯甲酰（benzoyl peroxide，BPO）是一种白色结晶性粉末，稍有气味，具有弱氧化性，其自身转化生成的苯甲酸（benzeneformic acid，BA）可抑制小麦中蛋白质分解酶的活性，进而提高小麦粉的贮氧能力[1]。过氧化苯甲酰具有增强面粉弹性、提升面粉等级等作用，有助于改进面粉品质。但是，过量添加过氧化苯甲酰会使面粉颜色发青，同时破坏其中的维生素，降低面粉质量，严重影响食品卫生指标及食用品质[2]。当前，某些企业为追求巨大的经济利益而忽视标准的规定，致使在市售小麦粉中非法添加过氧化苯甲酰的事件时有发生[3-4]。在食安通食品抽检信息与分析系统中查询到，2012年4月至2019年10月公布的不合格小麦粉共计24批次，且主要集中在2012～2016年之间。其中，2012年不合格小麦粉占25%，主要原因可能是公告执行初期很多生产企业未及时调整工作。但是，近几年小麦粉中过氧化苯甲酰不合格的事件也偶有发生。
现有的文献资料往往注重探讨过氧化苯甲酰检验新方法的验证，如采用分光光度法[5]构建面粉中过氧化苯甲酰的快速检测体系，且多数文献选用高效液相色谱法[6-10]进行检测，但均未被《国家食品安全监督抽检实施细则》所录入，对小麦粉中过氧化苯甲酰监督抽检的研究也少有报道。因此，本研究采用《小麦粉中过氧化苯甲酰的测定 高效液相色谱法》（GB/T 22325-2008）[11]对陕西省咸阳市3个市县的小麦粉生产企业进行监督抽检，检测其小麦粉中的过氧化苯甲酰含量，以期为3个市县的监管部门对小麦粉加工生产过程的监管提供可靠的依据，进而帮助监管部门和人民群众了解小麦粉生产的安全状况。
2 材料與方法
2.1 实验材料
2.1.1 仪器
高效液相色谱仪，岛津;电子天平，岛津制作所;旋涡混合器，海门市其林贝尔仪器制造有限公司;溶剂过滤器，天津市津腾实验设备有限公司。
2.1.2 试剂
甲醇：色谱纯;碘化钾溶液：50%水溶液，质量浓度;苯甲酸：纯度为99.96%，LGC;乙酸铵缓冲溶液（0.02mol/L），苯甲酸标准贮备溶液（1mg/mL）。
2.1.3 材料
30批次小麦粉为2019年咸阳市县级监督抽检样品，全部从3个市县的小麦粉生产企业抽取，其中，彬州市17批次、长武县6批次、旬邑县7批次。
2.2 实验方法
2.2.1 方法原理
由甲醇提取的过氧化苯甲酰以碘化钾为还原剂将其还原为苯甲酸，通过高效液相色谱仪分离，在230nm下检测，最低检出限为0.5mg/kg。
2.2.2 样品前处理
称取5g样品置于50mL具塞比色管中，加10.0mL甲醇，在旋涡混合器上混匀1min，静置5min;加50%碘化钾水溶液5.0mL，在旋涡混合器上混匀1min，放置10min;加水至50.0mL，混匀，静置，吸取上清液通过0.22μm滤膜，滤液置于样品瓶中，备用。
2.2.3 色谱条件
检测器：紫外检测器;色谱柱：Shim-pack GIST C18;规格：4.6mm×250mm×5μm;检测波长：230nm;流动相：甲醇︰水（含0.02mol/L乙酸铵）为10︰90（体积分数）;流速：1.0mL/min;进样量：10.0μL。
2.2.4 标准溶液的制备
称取0.025g苯甲酸标准品，用甲醇溶解并定容至25mL容量瓶中，得到1000μg/mL标准贮备液。准确移取苯甲酸标准贮备液0.05、0.10、0.20、0.40、0.60mL，分别置于5个50mL容量瓶中，并分别加入甲醇至50.0mL，配备成浓度分别为1.0、2.0、4.0、8.0、12.0μg/mL的苯甲酸标准系列溶液。
2.2.5 计算方法
按 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 计算样品中的过氧化苯甲酰含量。
式中：D为样品中过氧化苯甲酰的含量，g/kg;c是由工作曲线上查出的试样测定液中相当于苯甲酸的浓度，μg/mL;V为试样提取液的体积，mL;m为样品质量，g;0.992是由苯甲酸换算成过氧化苯甲酰的换算系数。
3 结果与分析
3.1 苯甲酸标准物质分析
苯甲酸标准物质色谱图，如图1所示。以GB/T 22325-2008中附录A苯甲酸标品色谱图的保留时间为7.728min的色谱峰为苯甲酸标品的目标峰，图1与标准中苯甲酸的色谱图一致。
3.2 标准曲线
由图2可知，苯甲酸标准曲线的回归方程为Y=35322.1X+4646.36，相关系数（r2）=0.9999851，拟合度（R2）=0.9999703，标准曲线的相关系数与拟合度都达到了0.9999级别，故符合实验要求。
3.3 不同区域小麦粉质量分析
由图3可知，对3个市县27家面粉厂的30批次小麦粉进行监督抽检，合格29批次、不合格1批次，总体合格率为96.67%、不合格率为3.33%。通过对不同区域分析可知，彬州市和旬邑县的小麦粉全部合格，合格率达到100%;长武县的小麦粉合格5批次，合格率为83.33%，不合格1批次，不合格率为16.67%。结果表明，3个市县的大多数面粉企业都能够遵守卫生部【2011】年第4号公告中“禁止在面粉生产中添加过氧化苯甲酰”的要求，但依然有个别企业未遵守公告要求，造成小麦粉不合格。
3.4 不合格小麦粉样品检测
由图4可知，小麦粉样品色谱图中与苯甲酸标准品目标峰（保留时间为7.728min）对应位置出现色谱峰，其对应的保留时间为7.753min，表明样品中含有过氧化苯甲酰。根据标准曲线和计算公式可知，小麦粉样品中的过氧化苯甲酰含量为0.032g/kg，且平行小麦粉样品同样检出过氧化苯甲酰，含量为0.032g/kg。
3.5 不合格小麦粉加标样品检测
由图5可知，向小麦粉样品中加入浓度为8.0μg/mL、体积为0.4mL的苯甲酸标准品，加标样品色谱图中在与苯甲酸标准品目标峰（保留时间为7.728min）对应位置只出现一个色谱峰，表明样品的色谱峰和标准品的目标峰相重合，其保留时间为7.749min，加标样的色谱峰面积明显增大。根据标准曲线和计算公式可知，加标样的过氧化苯甲酰的含量为0.11g/kg。根据回收率计算公式可得，回收率为98.73%。按照GB/T 27404-2008中对回收率的要求范围为90%～110%，故本实验的回收率满足要求，结果准确可靠。
3.6 不合格小麦粉复测样品检测
由图6可知，由不同检验员再次对小麦粉样品进行复测，得到的样品色谱图中与苯甲酸标准品目标峰（保留时间为7.728min）对应位置出现色谱峰，其对应的保留时间为7.699min，表明复测小麦粉样品中含有过氧化苯甲酰。根据标准曲线和计算公式可知，复测小麦粉样品中相应的过氧化苯甲酰的含量为0.032g/kg。
3.7 实验结果分析
通过平行实验、加标回收实验、复测实验对不合格样品进行检测和再次确认，结果都表明不合格小麦粉中含有过氧化苯甲酰。根据复测数据及过氧化苯甲酰计算公式可得，不合格小麦粉样品中过氧化苯甲酰的含量为0.032g/kg，故确定该小麦粉为不合格产品。
3.8 实验的精密度
依据GB/T 22325-2008中对精密度的要求，重复性是在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过重复性限（r），再现性是再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过再现性限（R）。该标准规定，标准中重复性和再现性公式的适用范围是小麦粉中过氧化苯甲酰的含量在0.00～0.20mg/kg时，而实验测定的不合格小麦粉中的过氧化苯甲酰的含量为32mg/kg，不在适用范围内，故无法计算精密度。通过查询资料，“关于国家标准《小麦粉中过氧化苯甲酰的测定 高效液相色谱法》（GB/T 22325-2008）精密度的问题”[12]中提到两方面的问题，一是方法的最低检出限是0.5mg/kg与精密度要求的范围相互矛盾，采用本法无法检出0.00～0.20mg/kg范围;二是当检测结果超出0.00～0.20mg/kg范围时，重复性和再现性无法衡量。
参考现行有效且适用于小麦粉的检测标准，《出口食品中过氧化苯甲酰的测定 高效液相色谱法》（SN/T 3148-2012）只对回收率有所要求，《小麦粉中过氧化苯甲酰的测定 液相色谱法》（DB22/T 384-2004）中对精密度的要求是两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%，《小麦粉中过氧化苯甲酰的测定方法》（GB/T 18415-2001）中对精密度的要求是双试验测定值的相对偏差不得大于15%。
上述方法与GB/T 22325-2008的共同点都是利用不同还原剂将过氧化苯甲酰还原为苯甲酸，再利用高效液相色谱法进行测定。因此，该方法的精密度参考上述检测标准进行计算如下。
精密度：在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。实验的精密度为，符合精密度要求，实验结果准确可靠。
4 结论与讨论
2019年，本研究对陕西省咸阳市3个市县27家面粉厂的30批次小麦粉进行抽检，并对小麦粉中的过氧化苯甲酰含量进行检测。得出统计结果，30批次小麦粉中合格29批次、不合格1批次，合格率为96.67%。检测中，通过平行实验、加标回收实验、复测实验对不合格产品进行了检测和再次确认，结果均表明不合格小麦粉中含有过氧化苯甲酰，含量为0.032g/kg。
通过分析，小麦粉中含有过氧化苯甲酰可能有两方面原因：一方面，企业在小麦粉生产过程中直接使用了过氧化苯甲酰;另一方面，企业在小麦粉生产过程中使用的小麦粉添加剂中含有过氧化苯甲酰，再由添加剂带入小麦粉中。因此，企业在小麦粉生产过程中不仅要做到不使用过氧化苯甲酰，还要在购买小麦粉添加剂时仔细查看其配料成分是否正规合法。通过对咸阳市3个市县的小麦粉生产企业进行监督抽检，有效了解了小麦粉生产的安全状况，为3个市县的监管部门提供了可靠的依据。
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