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吸烟对稳定期COPD患者Th17/Treg细胞表达的影响及其与血清炎性因子的相关性分析

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叶彩虹王辉陈斯亮咸子超

【摘要】目的研究吸烟对稳定期慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者辅助性T细胞17/调节性T细胞（Th17/Treg）细胞表达的影响及其与血清炎性因子的相关性。方法选取50例稳定期COPD患者作为观察组，根据患者吸烟情况分为吸烟组（15例）、戒烟组（20例）、非吸烟组（15例）;另选取同期体检健康志愿者50例作为对照组。检测并对比两组肺功能指标及实验室指标[第1秒用力呼气容积（FEV1）、第1秒用力呼气容积占用力肺活量比例（FEV1/FVC）、辅助性T细胞17/调节性T细胞（Th17/Treg）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）]，对比吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者FEV1、FEV1/FVC、Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平，采用Pearson相关系数分析FEV1、FEV1/FVC与Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8及Th17/Treg与TNF-α、IL-6、IL-8的相关性。结果观察组FEV1（42.59±7.52）%、FEV1/FVC（43.24±8.26）%均显著低于对照组的（89.40±10.43）%、（90.62±10.33）%，差异有统计学意义（P<0.05）;观察组Th17/Treg（3.11±0.54）%、TNF-α（14.25±6.32）ng/L、IL-6（19.52±8.98）ng/L、IL-8（78.52±7.85）ng/L均顯著高于对照组的（1.06±0.21）%、（5.34±2.40）ng/L、（8.85±5.95）ng/L、（62.43±3.24）ng/L，差异有统计学意义（P<0.05）。吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者的FEV1、FEV1/FVC水平呈升高趋势，组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）;吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者的Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平呈下降趋势，组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）。经相关性分析， FEV1、FEV1/FVC与Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8呈负相关（P<0.05）。经相关性分析， Th17/Treg与TNF-α、IL-6、IL-8呈正相关（r=0.547、0.526、0.634， P=0.000、0.000、0.000<0.05）。结论稳定期COPD患者Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平呈现出高表达，且Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平的上升与吸烟密切相关，患者应当及早戒烟。

【关键词】吸烟;稳定期慢性阻塞性肺疾病;辅助性T细胞17;调节性T细胞;炎性因子

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.15.004

Effect of smoking on Th17/Treg cell expression in stable COPD patients and its correlation with serum inflammatory factors? ?YE Cai-hong， WANG Hui， CHEN Si-liang. Department of Clinical Laboratory， Shenzhen Mental Health Center （Shenzhen Kangning Hospital）， Shenzhen 518000， China

【Abstract】 Objective? ?To study the effect of smoking on helper T cells 17/ regulatory T cells （Th17 / Treg） cell expression in stable chronic obstructive pulmonary disease （COPD） patients and its correlation with serum inflammatory factors. Methods? ?A total of 50 stable COPD patients were selected as the observation group， which were divided into smoking group （15 cases）， smoking cessation group （20 cases） and non-smoking group （15 cases） by smoking status. Another 50 healthy volunteers were selected as the control group. The pulmonary function indexes and laboratory indexes [forced expiratory volume in 1st second （FEV1）， FEV1 / force vital capacity （FVC）， Th17 / Treg， tumor necrosis factor-α （TNF-α）， interleukin-6 （IL-6）， interleukin-8 （IL-8）] were detected and compared between the two groups. The levels of FEV1， FEV1 / FVC， Th17 / Treg， TNF-α， IL-6 and IL-8 in smoking group， smoking cessation group and non-smoking group were compared. Pearson correlation coefficient was used to analyze the correlation between FEV1， FEV1 / FVC and Th17 / Treg， TNF-α， IL-6， IL-8， Th17 /

1. 2. 2 排除标准 ①临床资料不完善;②COPD急性发作期;③严重心肝肾功能障碍或伴有恶性肿瘤;④伴

有其他肺部疾病，如肺结核、肺炎等。

1. 3 方法 ①资料收集：收集两组基础资料（性别、年龄、FEV1、FEV1/FVC）及实验室指标（Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8）。②FEV1、FEV1/FVC检查：分别在患者及志愿者入院2～3 d后使用德国JAEGER公司生产的MS-IOS型肺功能仪检测FEV1、FEV1/FVC。③血清检查：分别在患者及志愿者入院2～3 d后抽取清晨空腹静脉血，离心后送检;制备外周血单个细胞核后使用流式细胞术检测Th17/Treg;TNF-α、IL-6、IL-8使用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测，检测仪器为HY-perionMR酶标仪（美国），试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司生产。

1. 4 观察指标 ①对比两组肺功能指标及实验室指标，包括FEV1、FEV1/FVC、Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8。②对比吸烟、戒烟、非吸烟COPD患者肺功能指标及实验室指标，包括FEV1、FEV1/FVC、Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8。③相关性分析：以Pearson相关系数分析FEV1、FEV1/FVC与Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8及Th17/Treg与TNF-α、IL-6、IL-8的相关性。

1. 5 统计学方法采用SPSS19.0统计学软件对数据进行处理。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示，两组比较采用t检验，多组比较采用方差分析;计数资料以率（%）表示，采用χ2检验;相关性分析以Pearson系数检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2. 1 两组肺功能指标及实验室指标对比观察组FEV1、FEV1/FVC均低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;观察组Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2. 2 吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者肺功能指标及实验室指标对比吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者的FEV1、FEV1/FVC水平呈升高趋势，组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）;吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者的Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平呈下降趋势，组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2. 3 FEV1、FEV1/FVC与Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8相关性分析经相关性分析， FEV1、FEV1/FVC与Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8呈负相关（P<0.05）。见表3。

2. 4 Th17/Treg与TNF-α、IL-6、IL-8相关性分析

经相关性分析， Th17/Treg与TNF-α、IL-6、IL-8呈正相关（P<0.05）。见表4。

3 讨论

COPD是以持续性、进行性气流受限为特征的一种疾病，罹患群体多为40岁以上人群，发病后常见有慢性咳嗽、咳痰、喘息等一系列症状，不利于患者健康，严重者甚至可导致患者死亡[7]。目前临床上对COPD的具体发病机制尚未明确，但众多临床医师普遍认为与环境及个体因素密切相关，如吸烟及粉尘、化学物质吸入等[8]。本次研究對COPD吸烟患者Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平进行观察，尝试探讨吸烟对Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平的影响，旨在为该疾病的临床治疗工作提供帮助。

本次研究结果显示，观察组FEV1、FEV1/FVC水平均显著低于对照组， Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平均显著高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）;表明稳定期COPD患者发病后肺功能下降，此时患者Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平呈现出高表达。COPD是一种呼吸系统受损疾病，可导致肺功能下降，本次研究中，稳定期COPD患者FEV1、FEV1/FVC明显低于健康者，与既往相关研究结果相符[9， 10]。

COPD发病后会引起免疫功能低下及全身炎症反应，导致TNF-α、IL-6、IL-8水平上升。Th17是新发现的亚

群，与炎症反应密切相关，能够清除机体病原微生物， Terg也是新发现的T淋巴细胞亚群，具有免疫抑制作用，能够抑制炎症反应，避免过度的炎症反应对机体产生损伤，而Th17/Treg处于平衡时不仅能够清除机体病原微生物，还能避免炎症反应对机体产生损伤，对维持机体免疫平衡具有重要意义[11， 12]。本次研究中，观察组Th17/Treg水平明显上升，分析原因可能与患者体内炎症因子异常表达有关， Th17/Treg平衡受到破坏，导致Th17/Treg水平提高。与张占强等[13]研究结果基本相符。

本次研究结果中，吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者的FEV1、FEV1/FVC水平呈升高趋势，组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）;吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者的Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平呈下降趋势，组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）。表明吸烟可导致患者肺功能降低， Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平高表达。可能与香烟中的某些物质促进炎症表达及影响肺部微生态有关[14， 15]， Th17与炎症反应密切相关，当Th17释放更多的炎症因子时Treg无法抑制过度的炎症反应，导致Th17/Treg平衡被打破，因此患者体内Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8异常升高。

为明确吸烟与COPD患者Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8间的关系，本文就FEV1、FEV1/FVC与Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8相关性及Th17/Treg与TNF-α、IL-6、IL-8相关性进行分析，证实FEV1、FEV1/FVC与Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8呈负相关（P<0.05）， Th17/Treg与TNF-α、IL-6、IL-8呈正相关（P<0.05），表明Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平的上升与吸烟密切相关，与上述研究结果一致。因此，稳定期COPD患者应当重视吸烟对COPD的影响，应及早戒烟。

综上所述，稳定期COPD患者Th17/Treg、TNF-α、

IL-6、IL-8水平呈现出高表达，且Th17/Treg、TNF-α、

IL-6、IL-8与FEV1、FEV1/FVC呈现出负相关，患者吸烟可导致炎症反应加重，不利于疾病的治疗。

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[收稿日期：2020-02-17]

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