标题 | 枸杞的组织培养技术 |
范文 | 陈淑华 刘冬梅 冷志巍 叶雅玲 本文对宁杞1号进行了组织培养实验,实验结果显示,适合枸杞的初代分生培养基为MS+6-BA0.1 +IAA0.5苗的质量最好;用MS+6-BA0.1+NAA0.01+IAA0.2继代效果最好;生根培养基 1/2MS+NAA0.01+IAA0.3为最佳,生根率达到90%以上。 枸杞(lycuon? chinense)又名枸杞子、红果子,茄科多年生落叶灌木,高0.8-2米,多分枝。我国各地均有栽培,主要分布于甘肃、青海等地。果实甘甜,可直接食用性滋补润肺。近年来枸杞又发展为保健饮料和食品的加工原料,枸杞的需求量日益增加。本试验采用组织培养扩繁,具有原材料节省、遗传性稳定、繁殖系数高等优点。 一、试验材料及方法 1、试验试材 采用结实量大、色泽鲜红、果肉口感好的枸杞优株树上的嫩茎尖作外植体。 2、配置培养基 试验采用改良的MS配方为基本培养基,并附加植物激素(8种对比)配好后装瓶121℃~126℃条件下灭菌15㏕。 3、外植体灭菌与接种 将外植体浸入吐温浸泡15~25min,自來水冲洗至无泡,移至超净台中切成2~3㎝小段,浸入75%酒精3~5s,再用0.1%Hgcl2液浸泡4~10min,并不断搅动,无菌水清洗4~5次,最后将小段两端各剪掉一部分,用无菌滤纸吸干表面水分接种,每瓶一块外植体。 4、培养基和培养条件 采用改良的MS﹙大量元素为原来的3/4﹚,诱导丛生芽培养基含蔗糖2.8%,生根培养基含蔗糖1.5%,所有培养基中均含琼脂0.5% PH6.4。高压灭菌30min,培养温度25~28℃,光照周期16/8h,光照强度1500~1600lux,培养室湿度55%~70%。 二、结果和分析 1、不同激素组合对芽诱导的影响 将试材接种于3/4MS培养基,附加蔗糖28mg/L,如表1所示激素配比,5d左右分化愈伤,1周后外植体开始分化。 2、不同激素组合对宁杞1号芽分化阶段的影响 将丛生芽在切割成小试材接种于下列几种培养基中,试验在不同浓度配比外加激素NAA、与 6-BA时,对宁杞1号继代增殖的影响。 在未染菌的试材中选出的粗壮的单芽切下,转接到以上8种培养基中,每瓶2株,每种组合接10瓶。 三、结论与讨论 1、初代培养 由表1可以看出,在不同的激素组合中,MS+6-BA0.3+IAA0.5的启动天数最短,为5d但初代分生玻璃化现象严重,苗无法继续使用,放弃;6-BA0.3+NAA0.04和6-BA0.3+IAA0.3两种激素组合启动天数为6,但都有玻璃化现象伴随,苗无法继代使用,放弃;综合8种激素组合对比,6-BA0.1+IAA0.5愈伤组织较多,丛生芽粗壮,为最佳的初代分生培养基。 2、继代增殖 由表2的结果分析得出,枸杞继代培养中,当6-BA的浓度在0.1mg/L、0.3mg/L同一浓度水平时随着NAA浓度的增加,丛生芽增加,愈伤组织增多,但NAA达到0.05以后,出现玻璃化现象;当6-BA浓度在0.3mg/L以下时,NAA浓度越大,丛生芽的数量越多,其中4号培养基中的苗高度小,侧芽分生更少;实验表明,用MS+6-BA0.1+NAA0.01+IAA0.2培养基比较适合枸杞的继代培养。 3、生根培养 如表所示,用3号培养基进行生根培养只需10天,而且根粗壮,生根率达到90%,2号培养基虽8d出根,但根细弱;而1号培养基15天出根,生根率为75%~85%,综合试验,生根培养基为1/2MS+NAA0.01+IAA0.3为最佳培养基。 综上所述,宁杞1号初代分生培养基为MS+6-BA0.1+IAA0.5分生率最高,苗的质量最好;用MS+6-BA0.1+NAA0.01+IAA0.2继代效果最好,生根培养基中1/2MS+NAA0.01+IAA0.3培养基为最佳,生根率达到90%以上。 (作者单位:137000 吉林省白城市林业科学研究院) |
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