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正相高效液相色谱测定万寿菊中玉米黄质和叶黄素方法研究

范文

王红梅张琳

摘要 [目的]建立正相高效液相色谱（NP-HPLC）同时测定万寿菊中玉米黄质和叶黄素含量的方法。[方法]色谱柱Inertsil SIL-100A（4.6 mm×250 mm，3 μm），流动相为正己烷∶乙酸乙酯=70∶30（V∶V），检测波长446 nm，柱温30 ℃。[结果]玉米黄质在5～50 μg/mL呈线性关系（r=0.997），加标回收率为97.5%（n=5），检出限为0.055 μg/mL;叶黄素在10～100 μg/mL呈线性关系（r=0.999），加标回收率为97.3%（n=5），检出限为0.085 μg/mL。[结论]建立的正相HPLC方法快速、稳定，能够为检测万寿菊中叶黄素和玉米黄质含量提供有效方法。

关键词正相高效液相色谱;叶黄素;玉米黄质;万寿菊

中图分类号 R284.2文献标识码 A文章编号 0517-6611（2021）02-0186-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.02.050

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Determination of Zeaxanthin and Lutein in Marigold by Normal Phase HPLC

WANG Hongmei1，ZHANG Lin2

（1.Tianjin Rianlon Corporation，Tianjin 300384;2.School of Chinese Materia Medica，Tianjing Univerisity of Traditional Chinese Medicine，Tianjin 301617）

Abstract [Objective] To establish a method for the simultaneous determination of lutein and zeaxanthin in marigold by normal phase high performance liquid chromatography （NPHPLC）. [Method]The column， Inertsil SIL100A （4.6 mm × 250 mm， 3 μm）， mobile phase， nHexane∶ethyl acetate = 70∶30 （V∶V）， detection wavelength 446 nm， column oven temperature 30 ℃. [Result]Zeaxanthin showed a linear relationship between 5-50 μg/mL （r = 0.997）， the recovery rate was 97.5% （n=5）， the detection limit was 0.055 μg/mL， lutein showed a linear relationship between 10-100 μg/mL （r = 0.999）， the recovery rate was 97.3% （n= 5）， the detection limit was 0.085 μg/mL. [Conclusion] The established HPLC method is rapid and stable， and can provide an effective method for the determination of lutein and zeaxanthin in marigold.

Key words NPHPLC;Lutein;Zeaxanthin;Marigold

葉黄素（lutein）和玉米黄质（zeaxanthin）为天然的植物色素，多存在于植物果实、蔬菜、花卉及藻类植物中，属于较为基本的天然色素，具有提高人和动物免疫力以及抗氧化的作用。叶黄素能够预防眼睛的视网膜黄斑，延缓失明症和视力退化等眼部的疾病。近年来研究表明，叶黄素具有调节动物免疫力、加强巨噬细胞活性、遏制肿瘤等功能[1-4]。玉米黄质也具有抗氧化性，分子中含多个共轭双键，可阻断自由基的链式传递。在生物体中，虽然玉米黄质不能转化成为维生素A，不具其活性，但也是人体可直接利用的强抗氧化剂。同时玉米黄质的化学结构中带有羟基，增强了其抗氧化能力。人体中，叶黄素和玉米黄质主要分布在肝脏、肾脏、胰脏、卵巢、眼、脾脏等组织器官中，并且人体和动物均不能自身合成2种物质，只能通过摄取食物或相关制剂获得。叶黄素和玉米黄质的食物来源主要有黄玉米、橙汁、桃子和鸡蛋黄等[5-8]。

万寿菊的花中含有丰富的玉米黄质和叶黄素。从20世纪70年代起，美国从万寿菊中规模化提取叶黄素，用作鸡饲料添加剂。在化妆品、医药、水产品等行业中，玉米黄质和叶黄素有应用。天然色素具有广泛的应用前景，其相关产品市场需求将会不断增大，对万寿菊中叶黄素和玉米黄质的提取工艺和检测方法的准确性也会有更高的要求[9-16]。

高效液相色谱法（HPLC）是有效测定玉米黄质和叶黄素含量的首选方法[17-19]。黄小春等[20]利用高效液相色谱法测定鸡蛋黄中的叶黄素。由于玉米黄质与叶黄素互为同分异构体，化学结构极为相似，属异戊二烯类化合物，因此在载碳量较低的C18柱上实现其基线分离较为困难。惠伯棣等[21]在YMC C30柱上实现玉米黄质和叶黄素基线分离，测得玉米黄质和叶黄素含量分别为54.2和12.8 mg/kg。上述文献表明，由于两者结构相似，在C18柱上仅限于单独检测叶黄素或玉米黄质，当两者均存在时难以实现基线分离;在C30柱上虽然能够实现基线分离，但C30柱价格较高，通用性不强，不利于推广和普及。因此，在正相硅胶色谱柱（NP-HPLC）上建立同时快速测定相关农产品的叶黄素和玉米黄质含量具有重要意义。

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