饲料中添加速大肥及高稳胺对皇冠鱼生长及抗氧化能力的影响
于宏 孙学亮 陈书奇
摘?要：为了解速大肥和高稳胺对皇冠鱼生长及抗氧化能力的影响，以皇冠鱼（Aequidens rivulatus）为试验对象，在其基础饲料中添加0.5%的速大肥和高稳胺，进行对照试验，投喂30 d后测定其生长情况及肝脏过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的含量。结果表明，0.5%速大肥添加量对皇冠鱼的生长起促进作用，降低了饲料系数，增强了机体抗氧化能力。高稳胺对皇冠鱼的抗氧化能力有显著作用。投喂高稳胺饲料后机体SOD活性与MDA含量均有所提高，其对皇冠鱼的生长起增益效果。因此，速大肥和高稳胺可用作皇冠鱼饲料添加剂大幅提高皇冠鱼产量。
关键词：速大肥;高稳胺;皇冠鱼（Aequidens rivulatus）;抗氧化
皇冠鱼（Aequidens rivulatus），英文名Green Terror，隶属硬骨鱼纲，辐鳍亚纲，鲈形总目，鲈亚目，慈鲷科。主要分布在南美洲、非洲、东南亚等地区的热带淡水水域中[1]。自1999年从南美输入到我国香港，不久便传至广州、北京、天津等地，该鱼体态壮硕威武，性成熟后，尤其是雄鱼，色彩较为艳丽，加之容易饲养且容易繁殖，所以有不少水族爱好者非常喜欢饲养[2]。成年雄鱼攻击性强，背鳍、臀鳍末端尖长，头部高耸外突，特别像戴着皇冠，给人一种长寿富贵的感觉，是一种极具观赏价值的中高档热带淡水观赏鱼[3]。
速大肥是一种抗生素类促生长饲料添加剂，其有效成份是维吉尼亚霉素（virginiamycin），又称为纯霉素或高杆霉素，是动物专用的饲料添加剂。速大肥用于猪、鸡和鸭的研究较多，使用效果十分显著[4-6]。但用在水产动物中的研究还比较薄弱。由于速大肥具有优良的特性，在国内外已被逐渐尝试添加于水产饲料中[7]。高稳胺，其主要成分为半胱胺盐酸盐。半胱胺盐酸盐具有显著提高瘦肉率和消化液的分泌，显著提高生长速度，降低饲料系数等特性，其稳定性好，吸收性好，颗粒均匀，无静电，流动性好，与其他营养素直接混合不发生拮抗，不易吸湿，易于保存。近年来，高稳胺在畜牧业的发展得到了大幅提升，特别是其主要成分半胱胺及其盐酸盐在畜牧业中已有相对广泛的研究与应用[8-9]。目前为止，速大肥和高稳胺这类药物在鱼类尤其是皇冠鱼方面的试验及应用极为少见。本研究探讨速大肥和高稳胺对皇冠鱼生长及抗氧化能力的影响，旨在为以后水产养殖用药提供理论基础。
1?材料与方法
1.1?试验用鱼
本试验用鱼为天津市金海马水产养殖有限责任公司所购买的皇冠鱼，随机选取鱼体强壮，活力好，摄食正常，表面无损伤，无寄生虫以及其它病害的个体运送到天津市西青区青泊洼凯润农业园渔场进行试验。鱼体重21.35 g±5.00 g，体长7.16 cm±1.0 cm。
1.2?试验饲料
皇冠鱼基础饲料购自天津市大洋饲料有限公司，蛋白含量32%。常温碾磨成粉末后，分别添加0.5%的速大肥和高稳胺，再重新制作成4 mm粒径的颗粒饲料，置干燥通风处晾干后装袋，并存放于阴凉干燥处备用。
1.3?试验试剂与仪器
速大肥和高稳胺（杭州高成生物营养有限公司）、考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒、过氧化氢酶（CAT）测定试剂盒、丙二醛（MDA）测定试剂盒和超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒（试剂盒均购自南京建成科技有限公司）、无水乙醇、冰乙酸、双蒸水、生理盐水（0.9%）（天津市北方天医化学试剂厂）等。
试管、烧杯，移液管（天津市北方玻璃仪器制造厂）、移液枪（eppendorf）、离心机（eppendorf Centrifuge5810R，3 500 r/min）、岛津紫外可见光分光光度计（UVmini-1240）、电子天平（赛多利斯科学仪器北京有限公司，BSA224S-CW）、电热恒温鼓风干燥箱（上海博讯实业有限公司医疗设备厂，GZX-9240MBE）、水浴锅（江苏沙沙医疗器械厂，WSZ-133-75）、饲料粉碎机（9FQ36-25，枣庄市山亭区海成机械厂）和联轴器饲料颗粒机（KSP350，枣庄市山亭区海成机械厂）等。
1.4?试验方法
1.4.1?试验鱼分组与养殖?皇冠鱼经过暂养后，选出健康的540尾进行随机分组，本试验共3个处理组（一个对照组、两个试验组），每组设3个重复，每个重复60尾鱼。皇冠鱼驯养一周后用于试验，试验期间，按体重3%左右确定投喂量（以饲料吃完为准），每天投喂3次（时间分别为：09：00、13：00、17：00）。试验池24 h曝气，每3 d换水30%左右，在试验开始前一天及试验数据采集当天停食。水质环境为：水温26 ℃±1 ℃，pH值 8.0～8.2，溶解氧6.5 mg/L±0.5 mg/L，氨氮1.2～1.3 mg/L，水质符合渔业水质标准。
1.4.2?组织样品的提取?饲养30 d后分别将鱼捞出，先测定体长和体重，之后解剖鱼体，取出肝脏，置于-80 ℃冰箱中冷冻保存备用。组织测定指标前，先将肝脏用电动匀浆机（DY89-Ⅱ）研磨（1 000 r/min），将匀浆液倒入离心管中，于4 ℃离心30 min后吸取上清液进行各指标的测定。在正式试验前，先进行预试验，确定组织匀浆的最佳取样浓度及最佳取样量。
1.4.3?皇冠鱼生长指标的计算?试验开始前后分别测量初始和结束的体重及体长等指标，根据测定的体重、体长和食用的饲料量计算其生长指标，计算公式如下：
1.4.4?皇冠鱼抗氧化指标的测定?根據预试验得到组织匀浆的最佳取样浓度及最佳取样量。按照试剂盒说明书用分光光度计分别进行考马斯亮蓝蛋白、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和丙二醛（MDA）的测定，计算方法及公式如下：
1.5?数据处理
试验结果利用SPSS 13.0 进行分析处理。经方差分析后，通过T检验分析试验结果的差异显著性（P<0.05）。
2?结果与分析
2.1?不同药物对皇冠鱼生长指标的影响
皇冠鱼养殖30 d后，各试验组皇冠鱼的增重率、增长率、存活率和饲料系数的情况见表1-表4。
试验组增重率较对照组显著升高（P<0.05），添加0.5%高稳胺组增重率更显著（P<0.05），见表1。
对照组体长生长不显著，试验组体长增长显著（P<0.05），添加0.5%高稳胺组比对照组体长增长更显著（P<0.05），见表2。
添加0.5%速大肥和高稳胺的平均存活率分别为92.5%和94%，对照组的平均存活率为85.33%，试验组平均存活率显著高于对照组（P<0.05），见表3。
所有试验组饲料系数较对照组显著降低（P<0.05），见表4。
2.2?不同药物对皇冠鱼抗氧化性指标的影响
如表5所示，所有试验组CAT较对照组显著（P<0.05）;试验组SOD较对照组显著（P<0.05）;试验组MDA较对照组显著（P<0.05）。
3?讨论
3.1?速大肥和高稳胺对皇冠鱼生长指标的影响
维吉尼亚霉素（速大肥）和高稳胺作为添加剂在观赏鱼养殖上应用很少，但在其它水产动物中已经有相关报道。AHMAD T.S 等[10]研究了维吉尼亚霉素对尼罗罗非鱼的健康状况及表现的影响，研究表明，试验鱼投喂8周不同速大肥剂量的基础日粮，能促进尼罗罗非鱼的生长。叶元土[11]研究维吉尼亚霉素对鲤鱼、斑点叉尾鮰的生长促进作用等，向高蛋白和低蛋白中各添加維吉尼亚霉素，进行了为期10周的试验，结果表明，高蛋白组明显比低蛋白组在增长率和饵料利用率上有明显改善。韩如正等[12]关于鲤鱼种饲料中添加维吉尼亚霉素的研究表明，将含量为50%的维吉尼亚霉素以50 mg/kg添加在鲤鱼种饲料中，可提高鲤鱼生长效率，并降低饲料系数，提高亩产量和亩效益，表明在鲤鱼种饲料中添加维吉尼亚霉素是可行的。同时，林黑着等[4]对凡纳滨对虾饲料中的速大肥应用进行研究，结果表明，投喂速大肥添加剂的对虾生长性能明显优于对照组。张红梅等[13]研究了半胱胺盐酸盐对哺乳类的抗氧化指标的影响，结果表明，半胱胺盐酸盐能够有效快速增加动物体重，胴体品质也会被大大提高。这些研究结果与本试验研究结果一致。在本试验中，对照组体重正常增长，试验组鱼体重、体长比对照组增长显著，能增加皇冠鱼的存活率，这与谭青松等[14]研究的结果相符。综上所述，速大肥和高稳胺可以用做皇冠鱼的饲料添加剂，对皇冠鱼的生长有明显促进作用。
3.2?速大肥和高稳胺对皇冠鱼抗氧化指标的影响
3.2.1?速大肥和高稳胺对皇冠鱼机体过氧化氢酶活力的影响?过氧化氢酶（CAT）是一种普遍存在于动物、植物和好氧微生物中的氧还原酶，其主要功能是催化H2O2分解为H2O和O2，使得H2O2不至于与O2-在铁螯合物作用下反应生成有害的-OH，便可削减自由基和过氧化脂质的形成，能对机体起重要的保护作用。因此，过氧化氢酶也成为水产动物的重要抗氧化防御性功能因子，成为机体内活性氧自由基的天然清除剂[15]。速大肥和高稳胺作为饲料添加剂主要应用于畜牧动物，对于作为水产动物的饲料添加剂的相关报道较少。高婷婷[16]对半胱胺添加对生长猪（Susscrofa domesticus）的抗氧化的影响研究表明，其对CAT有显著提高的趋势，显著降低了MDA的含量。这与本试验的研究结果一致，本试验结果表明，添加0.5%速大肥组和添加0.5%高稳胺组的CAT值均比对照组有显著提高，表明两者都可以提高机体的免疫力。
3.2.2?速大肥和高稳胺对皇冠鱼机体超氧化物歧化酶活力的影响?超氧化物歧化酶（SOD）活力的定义是每毫升反应液中SOD抑制率达到50%的时候所对应的SOD量为1个SOD活力单位（U）。超氧化物歧化酶SOD可以将有害超氧阴离子自由基歧化为H2O2，存在于机体内的过氧化物酶体的CAT催化H2O2等生成水和氧气，防止自由基对细胞的毒害[17]。因此，SOD和CAT的活性变化在一定程度上可反映出机体的免疫力[18]。速大肥作为一种抗生素，被广泛用作家禽、猪、牛等的饲料添加剂，有研究表明抗生素做为水产动物饲料添加剂可以提高其抗氧化能力。卢彤岩[19]等研究表明，连续投喂施氏鲟（Acipenser scherensckii）达氟沙星，其机体SOD值明显增大，显著提高了施氏鲟机体的免疫力。张彩凤等[20]研究表明，乳酸菌和酵母菌复合制剂及其与维吉尼亚霉素联合使用对肉仔鸡（Gallus）血清总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性显著升高，血清丙二醛（MDA）含量显著降低。本试验添加0.5%速大肥组和添加0.5%高稳胺组的SOD值均明显大于对照组，表明可以提高皇冠鱼机体的免疫力。
3.2.3?速大肥和高稳胺对皇冠鱼机体丙二醛含量的影响?丙二醛（MDA）是自由基脂质过氧化代谢产物，是广泛应用于检测机体组织中自由基水平的指标。机体经过酶系统与非酶系统产生自由基，后者引发脂质过氧化作用，从而能够引起细胞的损伤，所以测试MDA的量常常可以反映机体内脂质过氧化程度，间接地反映细胞损伤的程度。Gu等[21]的研究发现，在小鼠（Mus musculus）的日粮中添加半胱胺，小鼠十二指肠中T-AOC显著升高，MDA含量显著下降。王海梅[22]的研究结果表明，在肉仔鸡的日粮中添加半胱胺，发现肉仔鸡血浆中的MDA含量显著减少，验证了半胱胺的抗氧化作用。本试验中添加0.5%速大肥组的MDA含量明显低于对照组，表明速大肥和高稳胺可以减少皇冠鱼的细胞损伤。
4?结论
速大肥和高稳胺作为一种促生长类饲料添加剂已被普遍应用于家禽养殖中，它的抗菌作用、增强免疫力功能以及促生长机制等已经被养殖业广泛认可。本试验研究表明：速大肥和高稳胺作为皇冠鱼的饲料添加剂，可以提高皇冠鱼的增重率，显著提高皇冠鱼机体的过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的活性，并降低丙二醛的含量，提高皇冠鱼相关生产性能，降低饲料系数，并增强机体免疫力。
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