多壁碳纳米管净化-气相色谱法测定瓜菜中六六六和滴滴涕残留研究

    李解 樊磊

    

    

    

    摘要 ? ?本文建立了超声波提取、固相萃取净化、气相色谱-电子捕获检测器法(GC-ECD)同时测定瓜菜中α-六六六、β-六六六、γ-六六六、δ-六六六、p.p′-DDE、p.p′-DDD、p.p′-DDT和o.p′-DDT等8种有机氯农药残留的方法。样品用丙酮+正己烷(体积比1∶1)混合溶液超声提取,采用自制多壁碳纳米管/弗罗里硅土固相萃取柱净化,GC-ECD测定,外标法定量。结果表明,8种有机氯农药在0.5~500.0 μg/L浓度范围内线性關系良好,相关系数r均大于0.999;添加水平在1.25~100.00 μg/kg时,回收率在81.5%~113.2%之间,相对标准偏差(n=5)在2.29%~14.48%之间,检出限为0.1~0.6 μg/kg,定量限为1.25~5.00 μg/kg。该方法操作简单,前处理净化效果好,具有较好的准确度、精密度和灵敏度,适用于同时测定瓜菜中8种有机氯农药。

    关键词 ? ?多壁碳纳米管;固相萃取;气相色谱法;滴滴涕;六六六;瓜菜

    中图分类号 ? ?S481+.8 ? ? ? ?文献标识码 ? ?B

    文章编号 ? 1007-5739(2020)19-0110-04

    六六六和滴滴涕属有机氯类农药,曾作为高效广谱杀虫剂在全球范围内广泛使用。但此类化合物毒性强,具有“三致”毒性以及免疫、神经、内分泌干扰等多种毒性效应[1],虽然20世纪70年代后期在全世界范围内禁用,由于很难降解,至今在土壤[2]、水体[3]、大气[4]、食物样品[5]等多种介质中仍频繁检出,部分地区残留量仍然较高,严重威胁人类健康。因此,开展此类农药残留的检测研究意义重大。

    在六六六和滴滴涕农药残留分析方法中,样品的前处理是其检测的关键,常用的前处理技术有索氏提取[6]、QuEChERS[7]、加速溶剂萃取[8]、固相萃取[5-6]、固相微萃取[9]等,其中,固相萃取是目前应用较多的前处理技术之一。由于固相萃取的效果显著受萃取填料性质的影响,因而发现和应用新型萃取材料是该技术研究重点之一。碳纳米管是一种新型纳米碳材料,具有独特的中空结构和大比表面积等特征[10],近年来在农产品质量安全检测领域广泛应用[11],并获得了优异的效果,但在瓜类蔬菜中滴滴涕和六六六残留检测上的研究报道较少。本文以黄瓜为瓜菜样品代表,采用多壁碳纳米管作为固相萃取主要填料,与气相色谱-电子捕获检测器法(GC-ECD)联用,建立了同时准确测定4种六六六(α-六六六、β-六六六、γ-六六六、δ-六六六)和4种滴滴涕(p.p′-DDE、p.p′-DDD、p.p′-DDT、o.p′-DDT)残留量的方法。该方法各项技术指标均满足检测要求,为瓜菜中8种有机氯农药的同时检测提供了参考方法。

    1 ? ?材料与方法

    1.1 ? ?仪器与试剂

    主要试验仪器:7890A气相色谱仪,配电子捕获检测器(ECD)及Chemstation工作站(美国Agilent公司),KQ-500DE超声波清洗器(昆山超声仪器公司),HSC-24B氮吹仪(天津恒奥科技公司)。

    主要试剂:农药标准溶液α-六六六、β-六六六、γ-六六六、δ-六六六、p.p′-DDE、p.p′-DDD、p.p′-DDT、o.p′-DDT,质量浓度均为100 mg/L,购于农业农村部环境保护科研监测所。多壁碳纳米管(长度为10~30 μm,外径为10~20 nm)(南京先丰纳米材料科技有限公司);弗罗里硅土(农残级)(美国ROE公司);正己烷(色谱纯,瑞典欧普森);氯化钠、丙酮(分析纯,上海国药集团);无水MgSO4(分析纯),使用前于620 ℃下灼烧4 h。试验用水为去离子水。

    1.2 ? ?试验方法

    1.2.1 ? ?标准溶液配制。根据8种待测农药在ECD检测器上的响应值,取p.p′-DDE、β-六六六单标溶液各0.5 mL,o.p′-DDT、p.p′-DDT单标溶液各1.0 mL,其余农药单标溶液各0.25 mL于10 mL容量瓶中,用正己烷定容,得混合标准储备液,放置于4 ℃冰箱待用。使用时,分别用正己烷、空白基质提取液逐级稀释,配制不同质量浓度的溶剂和基质匹配标准工作溶液。

    1.2.2 ? ?固相萃取小柱制备。弗罗里硅土填料经620 ℃烘烧4 h后冷却备用,使用前经130 ℃烘烧2 h,然后加入5%水去活化。采用干法装柱,取6 mL固相萃取小柱,由下至上依次装入筛板、1 g弗罗里硅土和0.03 g多壁碳纳米管填料、筛板,压实,小柱待用。

    1.2.3 ? ?样品前处理。样品按四分法取样,匀浆后备用。

    提取:准确称取试样3.0 g至50 mL塑料离心管中,加入7.5 mL丙酮+正己烷(体积比1∶1)溶液和1 g氯化钠,涡旋2 min,超声波法提取15 min,加入2 g无水MgSO4,涡旋2 min,于8 000 r/min下离心4 min,移取上清液于另一洁净的离心管中,样品残渣按上述操作重复提取1次,合并2次提取液,准确移取5 mL氮吹浓缩至约1 mL,待净化。

    净化:将固相萃取小柱用10 mL丙酮+正己烷(体积比1∶9)溶液预淋洗后,弃去流出液,加入待净化样品溶液,重力过柱。用10 mL丙酮+正己烷(体积比为1∶9)溶液洗涤溶解样品的离心管,并淋洗小柱,收集全部流出液,在70 ℃水浴下氮吹至近干,用正己烷定容至1 mL,混匀,过0.22 μm滤膜后,供GC-ECD测定。

    1.2.4 ? ?气相色谱条件。色谱柱为DB-1701(30.00 m×0.32 mm×0.25 μm);进样口温度为250 ℃;升温程序为150 ℃保持0.5 min,然后以8 ℃/min升温至240 ℃,再以3 ℃/min升至260 ℃保持2 min;ECD检测器温度为300 ℃;载气为高纯氮气,流速为1.7 mL/min;进样量为1.0 μL,不分流进样。

    2 ? ?结果与分析

    2.1 ? ?色谱条件选择

    根据待测农药的性质,通过改变色谱柱种类(DB-1701、HP-5)、进样口温度(220、230、240、250 ℃)、载气流速(1.0、1.2、1.5、1.7 mL/ min)、升温程序等条件,观察各农药的信号强度和分离分析情况,最终选择1.2.4气相色谱条件。在此色谱条件下,标准溶液和实际样品溶液色谱图如图1所示。可以看出,8种农药在15 min内能够完全分离且峰型较好,组分出峰处没有明显的干扰杂峰,表明色谱条件选择合适。

    2.2 ? ?前處理条件选择

    超声法操作简单,可实现多个样品同步处理,故选择该方式提取样品。有机氯农药属于弱极性化合物,适合用非极性的正己烷为提取剂,同时加入适量的丙酮,可增强对样品的渗透性,提高萃取效率。比较了丙酮+正己烷(体积比1∶1)、丙酮+正己烷(体积比1∶2)作为提取剂对8种有机氯农药加标回收率的影响。结果显示,采用上述2种提取剂时,8种农药的回收率分别为85.6%~110.2%、76.3%~95.5%,故选择丙酮+正己烷(体积比1∶1)为提取剂;进一步试验了其用量分别为15 mL和30 mL时对待测农药加标回收率的影响(图2),发现两者的回收率相差不大,分别为89.8%~114.7%、89.7%~112.7%,均满足农药残留检测的要求[12],为减少溶剂的消耗,选择提取剂用量为15 mL。

    采用固相萃取小柱净化样品,比较了商品化的弗罗里硅土柱和自制的多壁碳纳米管/弗罗里硅土柱对样品提取液的净化效果。试验发现,提取液通过商品化弗罗里硅土柱净化,洗脱液呈淡黄色,存在色素干扰;通过自制多壁碳纳米管/弗罗里硅土柱净化,色素类物质被多壁碳纳米管吸附,洗脱液澄清透明,有效减少了色素干扰,故选择自制的多壁碳纳米管/弗罗里硅土柱进行固相萃取净化。比较10 mL体积比分别为1∶1和1∶9的丙酮+正己烷混合溶液作为洗脱剂对8种有机氯农药洗脱效果的影响。从图3可以看出,采用体积比分别为1∶1和1∶9的丙酮+正己烷混合溶液洗脱剂洗脱,8种有机氯农药的回收率分别为81.9%~108.0%、89.9%~108.7%,后者总体优于前者,故选择10 mL丙酮+正己烷(体积比1∶9)混合溶液作为洗脱剂。

    2.3 ? ? 基质效应分析

    取1.2.1中不同质量浓度的溶剂和基质匹配标准工作溶液进行测定,通过比较2条标准曲线的斜率判断基质效应(ME)的强弱。当|ME|<20%时,为弱基质效应,无须采取补偿措施;当20%≤|ME|≤50%时,为中等程度基质效应,需采取措施补偿基质效应;当|ME|>50%时,为强基质效应,需采取措施补偿基质效应[13]。计算公式如下:

    ME(%)=(基质匹配标准曲线斜率/溶剂标准曲线斜率-1)×100

    从表1可以看出,8种待测农药的|ME|值均在20%以内,为弱基质效应。因此,本方法采用纯溶剂配制标准溶液进行定量分析。

    2.4 ? ?方法线性范围、检出限及定量限

    按本方法色谱条件,对8种待测农药的溶剂标准工作溶液进行测定,以各农药组分的峰面积(y)对质量浓度(x)绘制标准曲线,线性范围、回归方程和相关系数见表1。结果表明,8种农药在各自浓度范围内线性良好,相关系数在0.999 1~0.999 9之间。对最低添加水平的样品进行前处理和测定,以色谱图中信噪比的3倍确定各农药的检出限,以最小添加浓度确定其定量限(表1)。

    2.5 ? ?方法的回收率及精密度

    以空白黄瓜为代表基质,在高、中、低3个水平下进行添加回收试验,每个添加水平做5次平行,分别测得回收率及相对标准偏差。8种待测农药的平均回收率为81.5%~113.2%,相对标准偏差为2.29%~14.48%(表2), 表明方法可靠、稳定。

    2.6 ? ?样品测定

    从当地超市购买黄瓜、西葫芦、丝瓜等瓜菜样品,按本试验方法进行测定,未检出待测农药残留。同时分别添加中等水平的8种农药标准溶液进行添加回收试验,结果见表3。8种农药的添加回收率在85.9%~116.6%之间,相对标准偏差在3.05%~15.80%之间,符合农药残留分析的要求[12],说明该方法具有一定的普及性。

    3 ? ?结论

    本文以新型纳米材料多壁碳纳米管和弗罗里硅土为填料,通过自制固相萃取小柱,与GC-ECD法联用测定瓜菜中8种典型有机氯农药的残留量,获得了较好的分析结果。在优化的检测条件下,方法的回收率为81.5%~113.2%,相对标准偏差(n=5)小于14.5%,检测限为0.1~0.6 μg/kg,定量限为1.25~5.00 μg/kg,具有较好的准确度、精密度和灵敏度,适用于瓜菜中8种有机氯农药同时准确测定。

    4 ? ?参考文献

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