西藏部分地区藏猪弓形虫血清检测报告

    高文勋++李坤++韩照淸++汪小强++王蕾++张+辉++兰彦芳++刘鑫宇++李家奎

    

    摘要：应用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay， ELISA）对2014-2015年间采集于西藏部分地区的454份藏猪血清进行了弓形虫血清学检测。结果显示，2015年检测出阳性血清116份，阳性率为25.6%。统计数据表明，西藏地区藏猪猪群中存在弓形虫感染。该研究旨在掌握西藏地区藏猪群中弓形虫感染的情况，为制定该病的预防及防治提供参考依据。

    关键词：西藏；藏猪；弓形虫；ELISA

    中图分类号：S858.28 文献标识码：A 文章编号：1007-273X（2016）03-0005-02

    弓形虫病（Toxoplasmosis）又称弓形体病，是由刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）所引起的人畜共患病，该病呈世界性分布。据统计，全球约有三分之一人口感染弓形虫，各地流行情况从10%～70%不等，并且温暖潮湿地区的流行率较其他地区稍高。在不同地区，弓形虫还表现出明显的遗传多样性，亦有报道证实在我国同样存在高度的弓形虫基因多样性。我国人群弓形虫感染率低于世界平均水平，但呈现逐年上升趋势。在动物中，猪的感染率为3.32%～66.39%，牛的感染率为2.41%～67.46%，羊的感染率为27.50%～33.33%，犬的感染率为0.66%～40.00%，猫的感染率为14.06%～78.00%[1]。目前，弓形虫病调查、诊断的方法有病原学方法、免疫学方法、分子生物学方法，但免疫学方法仍是进行弓形虫感染调查、弓形虫病诊断的常用方法。动物感染弓形虫往往发生流产、不孕、死胎，而人同样对弓形虫易感，尤其是免疫缺陷或低下者、癌症患者、孕妇及幼儿等。孕妇感染弓形虫除可导致流产、早产、畸胎、死胎、弱智儿外，其妊娠中毒症、产后出血及子宫内膜炎的发生率均可见升高[2]。为摸清西藏藏猪群的弓形虫感染情况，笔者于2015年2月应用酶联免疫吸附试验（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）方法对西藏地区藏猪进行了弓形虫血清学检测。

    1 材料与方法

    1.1 被检血清

    本研究从2014年11月至2015年1月在西藏林芝地区的林芝县、米林县、工布江达县的屠宰场采集藏猪血液454份，室温血液自然凝固20 min，在3 000 r/min的离心条件下离心20 min。收集血清，于-20 ℃冰箱中保存，备用。

    1.2 试剂及试验方法

    猪弓形虫间接ELISA检测试剂盒购自中国农业科学院兰州兽医研究所。检测步骤按照猪弓形虫间接ELISA检测试剂盒说明书进行。

    2 结果与分析

    表1结果表明，2014年西藏地区藏猪弓形虫阳性率为25.6%，其中林芝县、工布江达县、米林县藏猪弓形虫阳性率分别为21.8%、29.7%、25.4%：米林县藏猪弓形虫血清阳性率略高于林芝县，略低于工布江达县，表明西藏地区藏猪确实存在弓形虫感染，且感染程度不低。

    表2结果表明，2014年西藏地区公猪弓形虫阳性率为25.1%，母猪阳性率为27.8%，未知藏猪弓形虫阳性率为6.3%，由此说明西藏地区藏猪公猪与母猪弓形虫感染率相近，弓形虫感染与藏猪性别没有明显关系。

    3 讨论

    弓形虫是一种危害性严重的人畜共患病。1908年，Nicolle和Manceaux在北非突尼斯一种仓鼠样啮齿类动物刚地梳趾鼠（Ctenoductylus gundaa）的肝脾单核细胞中，首次发现并描述了弓形虫。1959年我国首次检测出弓形虫病后，随着后来越来越多的动物被报道感染弓形虫，我国兽医工作者也加大了对弓形虫病的重视。近二十年来世界各地陆续发现和报告了大量临床及隐性感染的猪弓形虫病[3]，2008年，陈永军等[4]通过间接血凝的方法检测上海市猪血清822份，阳性71份，阳性率为8.63%；2010年，洪尼宁等[5]通过间接血凝的方法检测贵州省9个市（州、地）猪血清2 906份，最终通过IHA检测177份猪弓形虫血清，阳性49份，阳性率为27.68%。本次调查中西藏藏猪的血清检测结果高于陈永军等[4]报道的上海市猪血清阳性率，但略低于洪尼宁等[5]报道的贵州省猪血清阳性率。本次检测结果表明西藏地区藏猪弓形虫感染较为严重，应该引起我国动物医学研究足够的重视。

    弓形虫病是一种危害严重的人畜共患病。它可以通过多种传染源进行传染，污染过的土壤、饲料、饲草、饮水等，患病和带虫动物的唾液、痰、粪便、乳汁、蛋、腹腔液、眼分泌物、肉、内脏淋巴结、流产胎儿体内、胎盘和流产物中以及急性病例的血液中都可能含有滋养体。弓形虫可通过消化道吞食含有包囊或滋养体的肉类和被感染性卵囊污染的食物、饲料、饲草、饮水而感染；滋养体还可经口腔、鼻腔、呼吸道黏膜、眼结膜和皮肤感染，母体胎儿还可通过胎盘感染。许多昆虫（食粪甲虫、嶂螂、污蝇等）可以机械地传播卵囊，吸血昆虫和蟀类可通过吸血传播病原[6]。一般来说，弓形虫病流行没有严格的季节性，但秋冬季和早春发病率最高，可能与动物机体抵抗力降低有关。饲养管理条件可影响动物弓形虫感染率[7]。

    多种动物对弓形虫都有一定的免疫力，感染后往往不表现临床症状，弓形虫可在组织内形成包囊后而转为隐性感染[8]。包囊是弓形虫在中间宿主体内的最终形式，可存活数月甚至终生。因此某些地区家畜弓形虫感染率虽然比较高，但急性发病却不多。所以即使猪场等没有弓形虫的病史，仍然不可忽视对该病的防治工作[9]。弓形虫防治的根本手段是使用方便的疫苗，但由于其生活史复杂，感染传播途径繁多，还可以形成包囊避免宿主的免疫攻击，因此，研制弓形虫的疫苗较为困难。所以，对于弓形虫病最佳的防治办法还是预防。

    弓形虫病属于二类动物疫病，牛、羊、猫等多种动物被报道感染弓形虫病，但对于藏猪的弓形虫病却未受到足够的重视和防治。西藏自治区位于青藏高原西南部，平均海拔在4 000 m以上，草原面积辽阔，气候条件复杂多变，藏猪的数量众多。但由于地理环境及试验条件等因素的影响，有关藏猪弓形虫病的调查研究少之又少。所以，为了进一步加强西藏藏猪弓形虫血清学检测，笔者将在今后扩大样本采集的范围，增加样本采集的数量，为更加全面了解西藏藏猪弓形虫感染情况和防治提供参考依据。

    参考文献：

    [1] 张居作，陈汉忠关，徐君飞.我国弓形虫的感染现状[J].动物医学进展，2008，29（7）：101-104.

    [2] 李 坤，姜文腾，韩照清，等.2012～2013年青藏高原地区耗牛弓形虫血清检测报告[J].中国奶牛，2015（8）：26-27.

    [3] DUBEY J P.Toxoplasmosis in pigs-The last 20 years[J].Veterinary Parasitology，2009，164（2-4）：89-103.

    [4] 陈永军，王 权，蒋 蔚，等.上海市猪弓形虫流行病学调查[J].中国动物传染病学报，2010，18（5）：54-58.

    [5] 洪尼宁，钱德兴，张登祥，等.贵州省猪弓形虫病的血清学调查[J].中国动物传染病学报.2010，18 （4）：68-70.

    [6] 宁康健.猪弓形虫病的诊断与防治[J].畜牧与饲料科学，2009，30（7-8）：164-167.

    [7] 朱继斌.河北省猪弓形虫感染情况调查[J]. 河北北方学院学报（自然科学版），2006， 22（2）：46-48.

    [8] 米晓云，巴音查汗，李文超.新疆猪、牛、羊弓形虫病的血清学调查[J].中国兽医寄生虫病，2007，15（2）：2-24

    [9] 李 坤，韩照清，高建峰，等.西藏部分地区黄牛弓形虫血清检测报告[J].中国奶牛.2014（18）：24-26.