竹鼠沙门氏菌与葡萄球菌混合感染的诊断及防治

    胡辉 罗世民 苏五珍 张光友 郭青春

    

    摘要:对某竹鼠养殖场的死亡竹鼠进行了临床检查和实验室检查,通过病理剖检、细菌分离培养与鉴定、生化试验等,诊断竹鼠的死亡是由沙门氏菌和葡萄球菌混合感染引起的。药敏试验结果表明,菌株对头孢他啶、环丙沙星、庆大霉素极度敏感;对氨苄青霉素、恩诺沙星等中度敏感;对诺氟沙星、新霉素等低敏敏感;对强力霉素、氨苄西林等耐药。

    关键词:竹鼠;沙门氏菌;葡萄球菌;药敏试验

    中图分类号:S858.92? ? ? ? 文献标识码:A? ? ? ? 文章编号:1007-273X(2019)09-0021-02

    竹鼠又名竹狸、冬毛老鼠、竹根猪等,因主要取食竹子而得名。在生物分类学中属于脊椎动物亚门、哺乳纲、啮齿目、竹鼠科、竹鼠属,是一种较大的啮齿类动物。竹鼠以竹子、植物的根茎和农作物秸秆为主食,驯化后能以各种植物秸秆为食,至今已经成为经济效益和开发价值高、市场需求量大、风险低的新型特种养殖业[1]。

    由于缺乏竹鼠营养标准、环境标准和品种标准等,在饲养竹鼠时饲喂营养比例不当、笼舍设计不合理等问题,导致竹鼠发育不良,抵抗力下降,各类疾病随之增多,严重影响了竹鼠养殖业的发展[2]。沙门氏菌、葡萄球菌广泛分布于自然界中,如饮水、地面、空气、饲料及物体表面,常常引起各种肠炎、化脓性疾病、败血症等。某养鼠场发生了以痢疾和皮肤紫绀为主要特征且传播迅速的一种疾病,使用庆大霉素、卡那霉素治疗后,短期内得到有效控制,但随后又迅速复发,再次使用庆大霉素、卡那霉素后不能有效控制。从病鼠脏器内分离出葡萄球菌后,改用青霉素、链霉素治疗,取得良好效果[3]。本试验通过临床检查、病理剖检、细菌分离鉴定、生化试验及药敏试验等为竹鼠沙门氏菌和葡萄球菌混合感染诊断提供参考。

    1? 发病情况

    3只病竹鼠来自湖南省怀化市某竹鼠养殖场,该竹鼠养殖场规模约有800只。送检时已有2只死亡。据主诉近日养殖场竹鼠开始出现少食,部分食欲废绝、精神萎靡、毛发粗乱,随后腹泻、渐渐消瘦、脱水,甚至死亡。死前没有进行任何药物治疗。不食、少动、腹部皮肤紫绀,拉腥臭痢疾后迅速死亡,6月呈流行性发生,感染113只,死亡30多只,使用青霉素、链霉素后,病情有所控制,但效果不佳。

    2? 临床症状

    对送检的3只发病竹鼠(其中2只已死亡)进行临床观察,病鼠外观表现精神沉郁,嗜睡、消瘦、食欲减少或废绝;体温40~41 ℃,呼吸急迫,喷嚏,部分发出怪叫声;皮毛粗乱、腹部、全身皮肤没有出血点,腹泻和下痢,粪便腥臭,肛门周围有粪便,继而出现尿失禁;腹部皮肤有大小不等的紫绀斑块,少部溃烂结痂,腹围增大,触之痛感明显。视诊病鼠体表并未发现寄生虫及寄生虫卵等。

    3? 病理剖检

    解剖1只病鼠和2只死鼠,尸僵完全,腹水增多,呈黄色胶冻样;心外膜有白色囊状物;肝脏肿大且有针尖大黄白色坏死灶,黄褐色;脾有出血性坏死灶;肾脏肿大;肺肿大出血;肠鼓气、肠黏膜出血,肠系膜淋巴肿大出血,大小肠水肿呈紫色等病变。

    4? 实验室检查

    4.1? 病料

    来自怀化市某竹鼠养殖场的3只病鼠,对竹鼠分别编号1,2,3。

    4.2? 主要药品、工具和仪器设备

    普通肉汤、麦康凯培养基、LB培养基、普通琼脂培养基、细菌微量生化管、药敏纸片、工业用盐、新洁尔灭、手术剪、手术刀、镊子、无菌口罩、记号笔、橡胶手套、手术器械托盘、自封袋、解剖托盘、载玻片、玻璃棒、小瓶(青霉素瓶)、瓷盆、小烧杯、过滤网、超净工作台、恒温培养箱、恒温摇床、显微镜等。

    4.3? 实验室检查

    用病死鼠的肝脏涂片,革兰氏染色,镜检可见革兰氏阴性,两端稍钝圆的细长杆菌。取死亡竹鼠肝、脾、肠同时涂片,革兰氏染色后镜检,有大量呈葡萄状的蓝紫色圆形葡萄球菌。

    细菌培养:取病死鼠的肝、脾等组织分别接种于普通肉汤、SS琼脂、亚硒酸钠琼脂和普通营养琼脂。置于培养箱培养24 h后观察,可见肉汤浑浊均匀一致,在SS琼脂上长有直径1.0~1.5 mm透明或半透明、中心黑色菌落;在亚硒酸钠琼脂上的菌落为黑色有金属光泽,菌落周围培养基为黑色或棕色;在普通营养琼脂上生成圆形或近圆形、光滑、半透明、边缘整齐的菌落。有的菌落2~3 mm,隆起的圆形菌落表面湿润[4]。

    取病料接种于普通琼脂平板37 ℃恒温培养24 h后,形成不透明湿润、光滑、隆起的圆形菌落,菌落颜色初呈灰白色,继而为淡黄色或金黄色,且放置时间越长,菌落黄色越深,为典型金色葡萄球菌菌落,直接进行涂片,革兰氏染色后,镜检可见大量呈葡萄串状排列、蓝紫色的葡萄球菌。

    细菌生化试验:挑取可疑单菌分别接种于葡萄糖、乳糖、甘露醇、麦芽糖、硫化氢、VP、吲哚等微量生化反应管中,37 ℃恒温培养箱培养18~24 h[5],观察结果。

    藥敏试验:将增菌培养的菌种混合后用涂布法接种于LB培养基,取10种药敏纸片做药敏试验,37 ℃恒温培养18~24 h,观察结果。

    4.4? 结果

    4.4.1? 生化试验结果? 根据生化特性鉴定(表1),可以确定为沙门氏菌(A)、葡萄球菌(B)。

    4.4.2? 药敏试验结果? 由表2可知,分离得到的菌株对头孢他啶、环丙沙星、庆大霉素高度敏感;对氨苄青霉素、恩诺沙星等中度敏感;对诺氟沙星、新霉素等低敏敏感;对强力霉素、氨苄西林等耐药。

    5? 讨论

    随着竹鼠养殖业的发展,养殖竹鼠所需要面对的疾病挑战也越来越多,特别是长时间饲养后不再是单一感染,而是呈混合式以及继发式感染,防治难度也越来越大。通过临床观察、病理解剖、细菌镜检、生化试验及药敏试验、体内外寄生虫检查等确认该竹鼠是沙门氏菌和葡萄球菌混合感染。

    在臨床上抗沙门氏菌的首选药物是头孢类药物,药敏试验结果中氨苄西林、强力霉素等有耐药性,和以前报道不一致,可能与养殖过程中用药有关系,让菌株产生了耐药性,也可能是菌株发生了变异,使其有了耐药性[6]。

    根据药敏试验结果,建议该养殖场选用头孢类药物进行沙门氏菌感染的治疗。养殖户亦应做好对竹鼠非传染型和传染型疾病的预防,减少发病及死亡[7]。

    葡萄球菌病的发生和流行与各种诱发因素有密切关系,如环境恶劣、饲养管理条件差、污染严重、有并发病存在使机体抵抗力减弱等。从送检养鼠场卫生状况看,场内经常不消毒或消毒不彻底(导致细菌浓度过高)、打扫不及时导致氨气浓度过高(刺激尿道口皮肤黏膜)可能是诱发感染的病因[8]。

    6? 防治

    6.1? 预防

    厩舍保持通风、干燥、清洁,使空气清新,全场用高浓度石灰水和病毒杀交替喷施消毒,全群添加环丙沙星混饲预防。

    6.2? 治疗

    采取抗菌消炎为主的治疗原则,辅以维生素制剂,具体方法:隔离病鼠并且肌肉注射头孢吡肟;在鼠群全天饮水中加入庆大霉素2万U/只,每天更换,让其自由饮用,同时辅以VC 2 mL/只肌注,2次/d。清理病鼠腹部皮肤上的痂块,涂擦医用龙胆紫药水。通过3 d一个疗程的治疗后病鼠好转,全场未再出现新病例[9]。

    7? 小结

    通过临床观察、病理剖检、细菌培养、染色镜检、生化试验、体内外寄生虫检查及药敏试验等确定发病竹鼠为沙门氏菌和葡萄球菌混合感染。药敏试验结果表明,分离的菌种对头孢他啶、环丙沙星、庆大霉素高度敏感,对氨苄西林、强力霉素等耐药。随着竹鼠养殖业的发展,造成竹鼠疾病的因素也越来越多,除了病原性因素,还有养殖环境和饲养条件等。保持环境的清洁和饲养管理的合理性是必要的,做好疾病早发现早治疗,采取综合措施防治疾病,最大程度的降低养殖风险及减少损失[10]。

    加强饲养管理,消除发病诱因,保持饲料和饮水的清洁、卫生。添加含抗生素的饲料添加剂,但应注意地区抗药菌株的出现,如发现对某种药物产生抗药性,应换药,或先做药敏试验,采用敏感药物。

    葡萄球菌对外界的抵抗力较强,是不产生芽孢的细菌中抵抗力最强的一种,对部分抗生素类药物能产生抗药性、感染痊愈后,不产生明显的免疫力,可再次感染,故在疫情扑灭后仍不能放松[11]。

    参考文献:

    [1] 黄良宗,张学兴,王淑敏,等.竹鼠沙门菌病的诊治[J].黑龙江畜牧兽医,2011(24):110.

    [2] 邹圣红,石胜军.竹鼠葡萄球菌病的诊治[J].贵州畜牧兽医,2012,36(3):45-46.

    [3] LUO S M,HUANG G Z,SU W Z,et al.Diagnosis and treatment of a disease caused by mixed infection of Esoherichia coli and Arthrinium saccharicola in bamboo rats[J].Agricultural science & technology,2015,16(12):2842-2844.

    [4] 朱晓燕,罗? 敏,王秀明.竹鼠养殖技术要点[J].中国畜牧兽医文摘,2014,30(11):92-93.

    [5] 朱小龙,唐利燕,张? 岳,等.竹鼠养殖的七个关键技术措施[J].江西畜牧兽医杂志,2017(3):51-52.

    [6] 刘升军,赵德丰,漆亚芝,等.一起竹鼠牙齿脱落病例的诊断[J].广西畜牧兽医,2019,35(3):133-134.

    [7] 付? 偲,叶妍琳,张海燕,等.竹鼠腹泻肠道细菌分离鉴定与药敏试验[J].黑龙江畜牧兽医,2016(14):211-213,299.

    [8] 覃波涛.中华竹鼠葡萄球菌病的诊治[J].贵州畜牧兽医,2001(2):24-25.

    [9] 刘? 军,唐朝晖,周笃春,等.我国竹鼠养殖现状与发展对策[J].湖南环境生物职业技术学院学报,2011,17(2):1-5.

    [10] 李? 思,肖超能,周? 娅,等.贵州省竹鼠养殖现状与发展对策[J].贵州畜牧兽医,2013,37(6):24-26.

    [11] 王? 璇,史开志,徐? 媛,等.竹鼠感染葡萄球菌的诊治[J].上海畜牧兽医通讯,2013(3):61.

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