微生态制剂对河蟹养殖成活率的影响

    贾秋红+白海锋+张星朗+问思恩+冯小丽+高志

    

    摘 要：为了进行河蟹生态健康养殖技术的示范推广，研究了一种微生态制剂对河蟹养殖池塘水质及河蟹成活率的影响。结果显示，使用含浓缩复合芽孢杆菌的微生态制剂（主要成分为枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌）的试验池水质优于对照池。与对照池相比，水体透明度增加26.1%，溶解氧降低22.6%，pH下降5.5%，电导率下降26.0%，氨氮含量降低75.1%，亚硝酸盐含量减少51.4%，河蟹养殖成活率提高了11.5%，河蟹养成规格提高25.0%。研究表明，浓缩复合芽孢杆菌微生态制剂对养蟹池塘的水质具有一定的净化效果，并可通过调节河蟹免疫系统减少病害发生，提高河蟹养殖成活率。

    关键词：河蟹；微生态制剂；水质调节；成活率

    河蟹学名中华绒螯蟹Eriocheir sinensis ，在分类学上属节肢动物门（Arthropoda）甲壳纲（Crustacea）十足目（Decapoda）方蟹科（Grapsidae）绒螯蟹属Eriocheir[1]。河蟹肉味鲜美，营养价值高，是我国特有的珍贵水产养殖品种，同时也是出口创汇水产品之一。 河蟹的适应性强，饵料来源广，养殖技术较容易，生产投资少、见效快，养殖前景广阔。但是随着养殖规模化、集约化程度的不断提高，养殖环境不断恶化，种质资源逐渐退化，使得河蟹小型化和病害的发生率越来越大[2]。此外，近年来河蟹养殖生产中出现的水体富营养化以及大量抗生素、激素、防腐剂、喹乙醇、喹诺酮等化学药物的滥用，不仅对河蟹的品质造成了影响，而且还导致了严重的环境污染问题。

    微生态制剂（Microecologics），是一种活菌制剂，通过改善动物自身及其周围的微生物群落来提高饲料利用率以及营养价值，具有增强动物对疾病的应答能力，提高其健康水平和保护环境的功能[3]。微生态制剂通常包括益生菌、益生元和合生素三种，其中芽孢杆菌是水产养殖中常用的益生菌种类。芽孢杆菌是一类好气或兼性厌氧细菌革兰氏阳性菌，目前在水产养殖生产中，比较常用的有三种，分别是枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis以及蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus [4]。近些年随着人民大众生活质量的迅速提高，以及对生态环境保护意识的增强、对食品质量安全的日益广泛关注，人们越来越重视食品的绿色化、饲料的绿色化、环境的绿色化以及生态文明的绿色化，这致使河蟹养殖必须走可持续发展的健康、生态之路。微生态制剂在水产养殖上被公认为是众多抗生素类药物最有潜力的替代品，主要是因其具有绿色环保、无残留、无污染、无任何毒副作用，而且不产生抗性、无记忆性和作用范围广等优点[5]。为此，2016年笔者在陕西黄河滩地进行了河蟹生态健康养殖试验，旨在为陕西地区河蟹生态健康养殖模式的示范与推广提供参考依据。

    1 材料与方法

    1.1 池塘条件

    在陕西大荔黄河蟹养殖基选取4口较为相似的池塘进行试验，其中2口塘为实验池，2口塘为对照池。池塘形状均为长方形，东西走向，池底平坦，坡比1：2.6，池塘面积均为0.33 hm2，水深1.2～1.5 m，池底淤泥小于10 cm，防逃及排灌设备齐全，试验用水取自黄河水。

    1.2 试验材料及实验设计

    试验幼蟹购于江苏高淳，选择体质健壮、活动敏捷、附肢齐全，规格整齐，大小为160～200只/kg，运输成活率大于95%。微生态制剂选择使用超浓缩复合芽孢杆菌（Bacillaceae），复合芽孢杆菌主要成分为枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌等多种有益微生物活菌。活体有益菌总数≥1×1011个/g。试验池塘使用微生态制剂，水深1 m时微生态制剂用量为50～60 g/亩，每10～15 d沿池边泼洒一次，同时饲料中添加量2～3 g/kg，对照池塘不使用微生态制剂。

    1.3 池塘消毒、肥水

    池塘冬季排干水后对池塘进行清整，清除多余淤泥后晒塘冻土。蟹苗放养前7～10 d，采用生石灰消毒，用量2 400～3 000 kg/hm2。在生石灰药效消失后，使用生物有机肥525～750 kg/hm2，促进生物饵料生长繁衍。

    1.4 种草移螺

    2月底全池种植伊乐藻，面积控制在全池的25%左右，水位保持在30～40 cm。3月初移栽金鱼藻和轮叶黑藻，种植面积控制在40%左右，水位保持在50～60 cm。至高温季节，水草覆盖率保持在80%左右。4月初，开始全池均匀投放活螺蛳，投放7 500～9 000 kg/hm2。

    1.5 苗种投放

    3月上旬开始投放蟹种，放养密度为30 000～45 000只/hm2，分别混养青虾虾苗（1 000～2 000尾/kg）75～150 kg/hm2。蟹苗在放入池塘前要进行消毒处理，用食盐水（3%～4%）浸洗3～5 min。蟹苗投放时间选择在晴天水温较高时，进行多点投放，让蟹苗自行爬入水中。

    1.6 日常管理

    在养殖过程中，饲料的投喂以全价配合饲料为主，搭配一些动物性饵料（例如新鲜的小鱼小虾和冰鲜的鱼虾等）和植物性饲料（例如浸泡的小麦、玉米、高粱、菜类等），坚持两头精、中间粗的投喂原则，日投饵量控制在3%～5%。每天早、中、晚巡塘3次，及时掌握水位变动和水质变化情况，以及河蟹的晚上摄食和活动情况，做好防逃、防盗以及防敌害工作，坚持每日做巡塘记录。视水温定期加注新水，保持水体透明度在30～40 cm，高温季节5 d加水 1次，保持水位在1.3～1.5 m。定期（15～20 d）对池塘进行水质调节和改良，具体方法是用150～225 kg/hm2的生石灰化浆全池泼洒，生石灰的使用不仅有利于疾病预防，更有利于水体中钙离子的增加，能够有效促进河蟹的蜕壳 。

    1.7 水环境指标测定

    试验期间， 每10～15 d对各个池塘的水温（T）、水深（D）、透明度（SD）、溶解氧（DO）、pH值、电导率（EC）、氨氮（NH4+-N）、亚硝态氮（NO2--N）等水质理化指标进行跟踪测定，从4月1日至7月1日共测定6次，每次采样监测时间固定在上午8：00-9：00，每口池塘设置4个固定监测点。

    2 结果

    2.1 水环境变化

    经过6次水质理化指标测定，对照池塘与试验池塘除水温（变化范围为12.0～21.5 ℃），和水深（变化范围为0.5～1.4 m）无差异外，其他水环境参数变化差异见表1。试验池透明度相比对照池增加26.1%，溶解氧减低22.6%，pH下降5.5%，电导率下降26.0%，氨氮含量降低75.1%，亚硝酸盐含量减少51.4%。

    2.2 河蟹规格及成活率

    从3月10日开始放苗，经过4个月的对比试验，7月10日分塘时，统计出对照塘蟹苗养殖平均成活率为56.3%，平均规格为30.8 g/只，蟹苗生长参数：壳长平均为40.5 mm，壳宽平均为44.6 mm。试验池塘蟹苗养殖平均成活率为67.8%，相比对照池提高了11.5%，平均规格为38.5 g/只，相比对照池提高了25.0%，壳长平均为45.2 mm，壳宽平均为48.7 mm。

    3 讨论

    3.1 微生态制剂与水质调控

    陕西大荔黄河滩地为陕西省最大的盐碱地，其水体pH值相对较高，导致养殖池塘水体酸碱度波动较大。本试验结果中微生态试验池的pH值低于对照池，而且变化幅度较小，这说明微生态制剂对降低和均衡水体pH值有显著作用，这与白丹利等研究结果相一致[6]。浓缩复合芽孢杆菌是多种复合型有益活菌，由繁殖速度快、竞争能力强，净水、脱氮效果好的多种功能的芽孢杆菌浓缩而成，是目前常用的一种水质调节剂。由于芽孢杆菌属于需氧型微生物，其在水中繁殖和分解有机化合物都需要消耗大量的溶解氧，导致实验池溶解氧低于对照池。但是从养殖过程来看，试验池的平均溶解氧在5.0 mg/L以上，对河蟹的生长无显著影响。在河蟹养殖水体中，投饵、施肥以及河蟹自身的排泄物均会产生大量的氨氮，对河蟹产生毒害作用，其毒性不但与水温有关，而且与水体pH的关系密切，当其在水中浓度累积到一定程度，将会引起河蟹出现病状，导致其死亡。氨氮的毒害作用不仅出现在河蟹养殖中，在养鱼池中对养殖对象的毒害作用也已经见到很多报道[7-8]。微生态制剂中的一些益生菌可直接利用池塘中的有机质、氨氮和硫化氢等物质进行光合作用，并通过生物颉颃和生物絮凝作用，抑制浮游生物的生长，提高水体透明度。同时又能通过转化铁、汞等有毒物质以及进行硝化和反硝化作用改善水质，营造和稳定养殖池塘良性生态循环[5]。

    3.2 微生态制剂与病害防控

    目前，微生态制剂在动物病害防治上表现出的生态效果已有很多研究，例如有学者在用微生态制剂提高鱼虾免疫力的研究显示，复合芽孢杆菌中的一些非致病菌群，通过在鱼虾的肠道内和体表定植和扩繁，形成规模有益菌群落，通过促进该部位有益菌的迅速生长繁殖，竞争性地抑制体内和体表病原菌滋生，从而达到提高养殖动物免疫力的效果[9]。本试验中，试验池塘河蟹发病率较低，其成活率高出对照池塘11.5%，分析认为在水体中使用和在饲料中添加微生态制剂，其大部分在扩繁进程中分泌大量酶（包括淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶等），这些酶针对性地迅速将池塘中残留的饲料和河蟹排泄物中的淀粉、蛋白和脂肪等有机质降解成水和二氧化碳，减少了水体负荷，从而净化水质。

    有研究报道[10]，在虾池中使用以芽孢杆菌为主的复合微生态制剂后，增加了沉积物好氧菌数量，从而抑制了有害弧菌类的繁殖和生长，减少了虾的细菌性疾病发生率。此外，通过促进底泥异养细菌的生长和繁殖，加速了池塘有机质的降解进程，维持并调节了系统的微生态平衡，有效促进了虾池水质的自我净化。此外，微生态制剂中的有益菌通过产生非特异性免疫调节因子等，剌激免疫系统，产生免疫抗体，从而增强机体免疫功能，抑制病害发生[11]。

    3.3 微生态制剂应用前景

    尽管我国微生态制剂应用于水产养殖业比较晚（20世纪90年代），而且自身存在诸如菌体稳定性差、活性很难维持、与抗生素的使用存在矛盾、对突发病作用效果不显著、难于示范推广等缺点，但是微生态制剂在病害防治途径上，与一些方法相比至今仍然是绿色、环保、安全的生物药物。虽然目前在水产养殖生产上微生态制剂的使用还要考虑到水域生态安全以及自然生态平衡等众多环境问题，但是近年来随着水产微生态理论的发展以及分子生物学技术的迅速应用，特异性新菌株的培育技术不断获得突破，同时微生物制剂的稳定性得到大幅度提高，水产动物微生态制剂将作为抗生素、化学促生素等的替代物而成为饲料工业和养殖业中最具潜力的添加剂之一[12]。微生态制剂的推广应用目前是世界性的生态安全需求，通过广泛使用可有效提高动物产品的无公害化，实现环境友好、生态平衡的目标，对我国水产养殖的生态健康可持续发展具有重大意义。

    参考文献：

    [1] 王克行. 虾蟹类增养殖学[M].北京：中国农业出版社，1997

    [2] 王武，李应森.河蟹生态养殖[M].北京：中国农业出版社，2010

    [3] Laurent Verschere，Geert Rombaut， Patrick Sorgeloos， et al. Probiotic Bacteria as Biological Control Agents in Aquaculture [J]. Microbiol. Mol. Biol. Rev. Dec 2000，64：655-671

    [4] 付天玺，魏开建，许国焕.芽孢杆菌在水产养殖中的研究和应用概况[J].水生态学杂志，2007，27（3）：102-104

    [5] 王亚敏，王印庚.微生态制剂在水产养殖中的作用机理及应用研究进展[J].动物医学进展，2008，29（6）：72-75.

    [6] 白丹利，王海.复合芽孢杆菌对养鱼池塘水质因子影响的试验研究[J].渔业现代化，2015，42（3）：8-11

    [7] 黄秀梨.微生物学（2版）[M].北京：高等教育出版社，2003

    [8] 秋天宝，金红星，王刚等.三种水质改良剂对水中三态氮降解效果初步测试[J].水产养殖，2007 （4）：16-18

    [9] Thimmalapura N D， Fatimah M Y， Mohamed S. Changes in bacterial populations and shrimp production in ponds treated with commercial microbial products[J].Aquaculture，2002，206：245-256

    [10] 李卓佳，郭志勋，冯娟，等.应用芽孢杆菌调控虾池微生态的初步研究[J].海洋科学，2006，30（11）：28-31

    [11] 陈永青，林亮，杨莺莺，等.微生态制剂在水产养殖中的应用[J].生态科学，2005，24（1）：80-83

    [12] 许金花，肖克宇.微生态制剂在水产养殖中的应用及前景[J].河北渔业，2006，（2）：1-4

    （收稿日期：2016-08-24）