有机磷农药残留在果蔬中的快速检测技术研究
赵媛
农药在果蔬种植发挥着重要的作用，促进农業种植行业发展，使果蔬免受病虫危害。有机磷农药是近年来运用最为广泛的农药，果农们通过喷洒农药，果蔬种植受到全方位的农药保护，虽然杜绝了虫害，但广覆盖式地农药喷洒在一定程度带来了消极影响。近年来，有机磷农药的含量超标，导致超标农药流入市场，威胁着人民的生活健康，同时残留农药流入土壤，破坏可耕层的土壤结构，对水文特征的稳定性也有不同程度的影响。基于有机磷农药的隐性的消极影响，对果蔬残留的有机磷农药进行快速检测是现代农业的必经趋势，对果蔬市场的维护和百姓的生命安全有着积极的现实意义。
有机磷农药的概述
果蔬种植过程易受到虫害，同时杂草的影响导致果蔬生长，因此使用农药抑制虫害和杂草的生长。农药的正确使用能够提高果蔬种植的产量，对我国的农业发展有促进作用。传统的农药采用的是有机氯农药，有机氯杀虫剂对果蔬的虫害抑制效果不明显，活性较低，因此有机磷杀虫剂应运而生，配合使用的有机磷农药成为了果蔬种植中使用最多的农药。该种农药对果蔬虫害的防治效果显著，并且果蔬的害虫成活性较低，但有机磷农药的剧性和毒性非常严重，有些浓度较高的杀虫剂已经在市场禁止投入了，同时浓度高的有机磷农药也被限制在农用了。
有机磷农药快速检测技术的重要性
有机磷农药使用不规范或者使用量超标，对果蔬种植生长有严重影响，若有机磷农药超标的果蔬流入市场，人体摄入了有机磷农药物质将给人们的生命安全造成威胁。对大气环境也有严重的污染，由于现代的农药使用技术多是喷洒方式，并且多是采用多使用直升机喷洒，空气中农药运动分子飘散到空中污染大气。农药间接进入土壤，对土壤的可耕层造成了土壤性能破坏，且土壤的微生物对农药的分解周期长，时间过长，降低了土壤的再循环利用率。农药流入河流，对地下河的水体造成污染，由于农药具有高度的溶解性和挥发性，有机磷农药融入水体，而水是生命之源，受到有机磷污染的水体流入生产生活领域，将带来化学性的生命安全威胁。因此，对果蔬种植使用的有机磷农药残留进行快速检测，有利于对有机磷农药残留做出正确的防范措施，避免有机磷对生产生活带来消极影响。
我国的有机磷农药残留检测技术现状
我国传统的残留有机磷农药成本较低，但是效率不高，对大部分的残留农药是能检测的，但检测效果不佳。主要方法是：乙腈提取果蔬残留农药样品，通常使用剂量是五十毫升，如果样品中存在水分可以采用无水氯化钠吸干，吸干后静止样品，并保持确匀混状态， 样品随着时间出现分层现象后，提取最上层的乙腈相，并在接近八十度的水浴，用氮气对分层样品进行晾干，最后加上丙酮进行容量固定，得出的数据使用气相色谱进行测定。传统的此种方法对乙腈的使用加大了化学品剧毒性对人体的危害，检测操作复杂，回收率低。随着经济的发展和现代化学的应用，对果蔬的农药残留有了新的检测技术，检测效果更好，且检测率达到百分之八十以上。常见新型的残留物快速检测两种方法为酶剂分析法和免疫分析法。
酶是一种催化性很强的物质，且专一度很高，对生化检测的作用明显，是快速检验残留有机磷农药的一种方法。常用的酶剂为胆碱酯酶和植物酶。胆碱酯酶受到有机磷农药的抑制会出现正常功能失效，活性存活率低，并且有机磷农药的浓度与抑制率呈现正比的关系，有机磷浓度越高，抑制率就越高，存活性就越差。一般来说，酶剂对神经中枢的传导的代谢产物是乙酰胆碱，在乙酰胆碱加入显色剂使其发生反应，反应物为黄色的物质，用分光光度计测试抑制率从而判断有机磷农药的残留率。
免疫分析法主要是利用抗体来检测残留农药，抗体对酶等化合物进行检测，采用的是抗原抗异性识别，酶标记的的抗体保存期限越长，敏感度越高，并采用光谱分析对显示结果进行测验，对有机磷农药的定性定量检测有积极的作用。
酶剂方法和免疫法都是应用最为广泛的两种方法，酶剂方法操作简便更易应用，因此下面对酶式剂法的某个例子的具体应用进行论述。
酶剂方法的配制
运用此种方法注意三个方面的配制。第一，缓冲溶液的配制。缓冲溶液配制达到的ph值是到8。如果选择1000毫升的蒸馏水就需要11.9克的无水磷氢二纳和3，2克的磷酸二氢钠配制。第二，显色剂的配制。显色剂成分是二硫代二硝基本基苯甲酸和碳酸氢钠配制，需要取20毫升的缓冲液且在4度的温度下作为溶解。二硫代二硝基本基苯甲酸和碳酸氢钠配制克数分别为160毫克和15.6毫克。第三，底物的配制。底物配制需要硫代乙酰胆碱和蒸馏水混合，分别是25毫克和35毫升，温度条件要求4度。第四，乙酰胆碱的配制。吸光度的变化值在合理范围内，通常3分钟的变化值不低于0.3。
酶剂方法的使用仪器
使用的仪器型号为PR-203-6T，生产的的厂商为厦门市信仪科技有限公司。该仪器使用前有个预热过程，并有参数的设定过程，15分钟的预热后，选择正确的参数后，在9分钟以内的显色时间，能检测出仪器6个通道各自的光能量。在测试对照显色，按下“对照”按键；第1通道区别其他通道放置的是对照试样，其他放置的是样品试样，按下“样品”键后，仪器测试样品。
残留农药的测试
这个测试环节主要有三个环节：对照测试，样品提取，样品测试。首先，果蔬农药的对照测试需要酶液和缓冲液进行搅混，分别是100微升和2.5毫升，并把混合液放入比色皿中，同时放入显色剂和底物混合液，均取100微升。将四种液体充分混合倒入仪器，按下对照按键测试。参数设置透光度为100。接着，进行样本提取，果蔬样品注意样本的次生植物对酶试验的产生假阳性的消极影，因此在样本提取之前，把须根等次生植物剔除，特别是针对叶绿素含量高的果蔬。2克的果蔬需要吸收10毫升的缓冲液并在2分钟后过滤才能成为等待测试的样品。过滤瓶选择三角瓶，能够充分震荡摇匀。特殊的含植物须根的果蔬测试需要的吸取的缓冲液是是其整体质量的5倍。最后，样品测试，需要酶液、待测液、显色剂、底物这几样的材料，分别采用的是100微升、2.5毫升、100微升、100微升。需要的装置仪器是容积为1厘米的比色皿。充分摇匀并震荡，10分钟的静止时间后把混合液放入仪器中，按下样品键进行测试。注意的事项：酶反映的速度必须在合适的温度条件下，通常在37度以上，若低于此度数，混合液的反映时间延长因此放置的时间需相应延长，在达到以下的条件才能继续测试样品：胆碱酯酶的空白对照时间3分钟的吸光变化值不能低于0.3。
结果的检测判断
样品测试没有其他因素的影响下，阳性结果表示是富含高度有机磷农药，通常检测出酶的抑制率达到百分之50以上。显示阳性的测试结果的果蔬样品必须经过重复测试，才能得出正确的检测判断，通常重复测试的次数不能低于2次。
酶剂方法的检测是目前运用最为普遍的快速检测果蔬中残留有机磷农药的方法，对影响乙酰胆碱酯酶的活性的因素，如底物的浓度、显色剂量、缓冲溶液的ph值、温度条件，实施合理的控制，确保酶发生反应的在最佳反映条件下。这种检测方法灵敏度高，满足了对果蔬中有机磷农药残留的快速检测的要求。
农药在果蔬种植发挥着重要的作用，促进农業种植行业发展，使果蔬免受病虫危害。有机磷农药是近年来运用最为广泛的农药，果农们通过喷洒农药，果蔬种植受到全方位的农药保护，虽然杜绝了虫害，但广覆盖式地农药喷洒在一定程度带来了消极影响。近年来，有机磷农药的含量超标，导致超标农药流入市场，威胁着人民的生活健康，同时残留农药流入土壤，破坏可耕层的土壤结构，对水文特征的稳定性也有不同程度的影响。基于有机磷农药的隐性的消极影响，对果蔬残留的有机磷农药进行快速检测是现代农业的必经趋势，对果蔬市场的维护和百姓的生命安全有着积极的现实意义。
有机磷农药的概述
果蔬种植过程易受到虫害，同时杂草的影响导致果蔬生长，因此使用农药抑制虫害和杂草的生长。农药的正确使用能够提高果蔬种植的产量，对我国的农业发展有促进作用。传统的农药采用的是有机氯农药，有机氯杀虫剂对果蔬的虫害抑制效果不明显，活性较低，因此有机磷杀虫剂应运而生，配合使用的有机磷农药成为了果蔬种植中使用最多的农药。该种农药对果蔬虫害的防治效果显著，并且果蔬的害虫成活性较低，但有机磷农药的剧性和毒性非常严重，有些浓度较高的杀虫剂已经在市场禁止投入了，同时浓度高的有机磷农药也被限制在农用了。
有机磷农药快速检测技术的重要性
有机磷农药使用不规范或者使用量超标，对果蔬种植生长有严重影响，若有机磷农药超标的果蔬流入市场，人体摄入了有机磷农药物质将给人们的生命安全造成威胁。对大气环境也有严重的污染，由于现代的农药使用技术多是喷洒方式，并且多是采用多使用直升机喷洒，空气中农药运动分子飘散到空中污染大气。农药间接进入土壤，对土壤的可耕层造成了土壤性能破坏，且土壤的微生物对农药的分解周期长，时间过长，降低了土壤的再循环利用率。农药流入河流，对地下河的水体造成污染，由于农药具有高度的溶解性和挥发性，有机磷农药融入水体，而水是生命之源，受到有机磷污染的水体流入生产生活领域，将带来化学性的生命安全威胁。因此，对果蔬种植使用的有机磷农药残留进行快速检测，有利于对有机磷农药残留做出正确的防范措施，避免有机磷对生产生活带来消极影响。
我国的有机磷农药残留检测技术现状
我国传统的残留有机磷农药成本较低，但是效率不高，对大部分的残留农药是能检测的，但检测效果不佳。主要方法是：乙腈提取果蔬残留农药样品，通常使用剂量是五十毫升，如果样品中存在水分可以采用无水氯化钠吸干，吸干后静止样品，并保持确匀混状态， 样品随着时间出现分层现象后，提取最上层的乙腈相，并在接近八十度的水浴，用氮气对分层样品进行晾干，最后加上丙酮进行容量固定，得出的数据使用气相色谱进行测定。传统的此种方法对乙腈的使用加大了化学品剧毒性对人体的危害，检测操作复杂，回收率低。随着经济的发展和现代化学的应用，对果蔬的农药残留有了新的检测技术，检测效果更好，且检测率达到百分之八十以上。常见新型的残留物快速检测两种方法为酶剂分析法和免疫分析法。
酶是一种催化性很强的物质，且专一度很高，对生化检测的作用明显，是快速检验残留有机磷农药的一种方法。常用的酶剂为胆碱酯酶和植物酶。胆碱酯酶受到有机磷农药的抑制会出现正常功能失效，活性存活率低，并且有机磷农药的浓度与抑制率呈现正比的关系，有机磷浓度越高，抑制率就越高，存活性就越差。一般来说，酶剂对神经中枢的传导的代谢产物是乙酰胆碱，在乙酰胆碱加入显色剂使其发生反应，反应物为黄色的物质，用分光光度计测试抑制率从而判断有机磷农药的残留率。
免疫分析法主要是利用抗体来检测残留农药，抗体对酶等化合物进行检测，采用的是抗原抗异性识别，酶标记的的抗体保存期限越长，敏感度越高，并采用光谱分析对显示结果进行测验，对有机磷农药的定性定量检测有积极的作用。
酶剂方法和免疫法都是应用最为广泛的两种方法，酶剂方法操作简便更易应用，因此下面对酶式剂法的某个例子的具体应用进行论述。
酶剂方法的配制
运用此种方法注意三个方面的配制。第一，缓冲溶液的配制。缓冲溶液配制达到的ph值是到8。如果选择1000毫升的蒸馏水就需要11.9克的无水磷氢二纳和3，2克的磷酸二氢钠配制。第二，显色剂的配制。显色剂成分是二硫代二硝基本基苯甲酸和碳酸氢钠配制，需要取20毫升的缓冲液且在4度的温度下作为溶解。二硫代二硝基本基苯甲酸和碳酸氢钠配制克数分别为160毫克和15.6毫克。第三，底物的配制。底物配制需要硫代乙酰胆碱和蒸馏水混合，分别是25毫克和35毫升，温度条件要求4度。第四，乙酰胆碱的配制。吸光度的变化值在合理范围内，通常3分钟的变化值不低于0.3。
酶剂方法的使用仪器
使用的仪器型号为PR-203-6T，生产的的厂商为厦门市信仪科技有限公司。该仪器使用前有个预热过程，并有参数的设定过程，15分钟的预热后，选择正确的参数后，在9分钟以内的显色时间，能检测出仪器6个通道各自的光能量。在测试对照显色，按下“对照”按键；第1通道区别其他通道放置的是对照试样，其他放置的是样品试样，按下“样品”键后，仪器测试样品。
残留农药的测试
这个测试环节主要有三个环节：对照测试，样品提取，样品测试。首先，果蔬农药的对照测试需要酶液和缓冲液进行搅混，分别是100微升和2.5毫升，并把混合液放入比色皿中，同时放入显色剂和底物混合液，均取100微升。将四种液体充分混合倒入仪器，按下对照按键测试。参数设置透光度为100。接着，进行样本提取，果蔬样品注意样本的次生植物对酶试验的产生假阳性的消极影，因此在样本提取之前，把须根等次生植物剔除，特别是针对叶绿素含量高的果蔬。2克的果蔬需要吸收10毫升的缓冲液并在2分钟后过滤才能成为等待测试的样品。过滤瓶选择三角瓶，能够充分震荡摇匀。特殊的含植物须根的果蔬测试需要的吸取的缓冲液是是其整体质量的5倍。最后，样品测试，需要酶液、待测液、显色剂、底物这几样的材料，分别采用的是100微升、2.5毫升、100微升、100微升。需要的装置仪器是容积为1厘米的比色皿。充分摇匀并震荡，10分钟的静止时间后把混合液放入仪器中，按下样品键进行测试。注意的事项：酶反映的速度必须在合适的温度条件下，通常在37度以上，若低于此度数，混合液的反映时间延长因此放置的时间需相应延长，在达到以下的条件才能继续测试样品：胆碱酯酶的空白对照时间3分钟的吸光变化值不能低于0.3。
结果的检测判断
样品测试没有其他因素的影响下，阳性结果表示是富含高度有机磷农药，通常检测出酶的抑制率达到百分之50以上。显示阳性的测试结果的果蔬样品必须经过重复测试，才能得出正确的检测判断，通常重复测试的次数不能低于2次。
酶剂方法的检测是目前运用最为普遍的快速检测果蔬中残留有机磷农药的方法，对影响乙酰胆碱酯酶的活性的因素，如底物的浓度、显色剂量、缓冲溶液的ph值、温度条件，实施合理的控制，确保酶发生反应的在最佳反映条件下。这种检测方法灵敏度高，满足了对果蔬中有机磷农药残留的快速检测的要求。
