HPLC测定不同产地粉萆薢中原薯蓣皂苷和薯蓣皂苷含量
邵岩岩 肖潇 吴玲芳 朱丹 杨光辉 张晓雪 张兰珍
摘要：目的 采用高效液相色谱法（HPLC）测定不同产地粉萆薢中原薯蓣皂苷和薯蓣皂苷含量。方法 采用Agilent C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），以乙腈-水为流动相梯度洗脱，流速0.8 mL/min，检测波长208 nm，柱温30 ℃，进样量20 μL。结果 原薯蓣皂苷在1.73～8.64 μg（r=0.999 1）范围内线性关系良好，平均回收率为101.98%（RSD=1.53%）；薯蓣皂苷在1.03～8.20 μg（r=0.999 6）范围内线性关系良好，平均回收率为101.60%（RSD=2.41%）。10个不同产地粉萆薢中原薯蓣皂苷含量在0.89%～2.24%之间，薯蓣皂苷含量在0.75%～3.22%之间。结论 该方法操作简便，定量准确，重复性好，可作为粉萆薢药材质量控制方法。
关键词：粉萆薢；中药产地；原薯蓣皂苷；薯蓣皂苷；高效液相色谱法
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2016）05-0104-03
Content Determination of Protodioscin and Diosgenin in Dioscoreae Hypoglaucae Rhizoma from Different Habitats by HPLC SHAO Yan-yan， XIAO Xiao， WU Ling-fang， ZHU Dan， YANG Guang-hui， ZHANG Xiao-xue， ZHANG Lan-zhen （Beijing University of Chinese Medicine， Beijing 100102， China）
Abstract： Objective To establish an HPLC method for the content determination of protodioscin and diosgenin in Dioscoreae Hypoglaucae Rhizoma from different habitats. Methods The chromatographic separation was performed on an Agilent C18 column （4.6 mm×150 mm， 5 μm） with mobile phase of acetonitrile-water solution with gradient elution at the flow rate of 0.8 mL/min； the detection wavelength was 208 nm； the column temperature was 30 ℃； the injection volume was 20 μL. Results Protodioscin showed a good linear relationship among the range of 1.73–8.64 ?g （r=0.999 6）， with the average recovery of 101.98% （RSD=1.53%）； Diosgenin showed a good linear relationship among the range of 1.03–8.20 μg （r=0.999 1）， with the average recovery of 101.60% （RSD=2.41%）. The contents of protodioscin and diosgenin in Dioscoreae Hypoglaucae Rhizoma from 10 different habitats were in the range of 0.89%–2.24% and 0.75%–3.22%， respectively. Conclusion The method is simple， accurate and with repeatability， which can be used as quality control method of Dioscoreae Hypoglaucae Rhizoma.
Key words： Dioscoreae Hypoglaucae Rhizoma； place of production （TCD）； protodioscin； diosgenin； HPLC
粉萆薢为薯蓣科植物粉背薯蓣Dioscorea hypoglauca Palibin的干燥根茎，具有利湿祛浊、祛风通痹功效，用于淋病白浊、白带过多，湿热疮毒、腰膝疼痛及风湿顽痹和小便不利等病症[1]。粉萆薢主要分布于浙江临安、淳安、龙泉，湖南沪溪、沅陵、安化及四川、安徽、江西等地。现代药理研究表明，粉萆薢具有降压、抗炎、抗菌、提高免疫、抗肿瘤、杀软体动物等功效[2]。粉萆薢主要含有皂苷、甾体、二芳基庚烷、木脂素、有机酸及脂类等化学成分，其中甾体皂苷类化合物是其主要药效成分。薯蓣皂苷有抗肿瘤、改善心血管、调节免疫、抗血小板聚集、抗炎、
降血糖、预防和治疗骨质疏松作用，原薯蓣皂苷有较好的抗肿瘤作用[4-9]，为粉萆薢的主要药效物质。
2015年版《中华人民共和国药典》尚无粉萆薢的含量测定方法，目前文献报道的粉萆薢含量测定有药材中总皂苷的含量测定[3]和薯蓣皂苷、薯蓣皂苷元的含量测定[10-11]。为了进一步完善粉萆薢的质量控制方法，本试验建立粉萆薢中原薯蓣皂苷和薯蓣皂苷的高效相色谱（HPLC）含量测定方法，并测定和比较不同产地粉萆薢药材中原薯蓣皂苷和薯蓣皂苷的含量，为粉萆薢的质量控制提供依据。
1 仪器与试药
Waters 1525高效液相色谱仪（美国Waters公司），Agilent C18色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm，美国Agilent公司），Sartorious BT 25S电子天平（德国Sartorious公司），KQ-500 DE超声清洗仪（昆山超声仪器有限公司）。
原薯蓣皂苷对照品（购于南京春秋生物有限公司，批号200015，纯度>98%）。薯蓣皂苷对照品，自制，经1H NMR、13C NMR、MS鉴定结构，HPLC归一化法检测，纯度>98%。10个产地药材购于祁州香草堂、亳州中药堂、安国中药材市场，经北京中医药大学中药鉴定系张贵君老师鉴定为薯蓣科植物粉背薯蓣Dioscorea hypoglauca Palibin的干燥根茎，样品保存于北京中医药大学中药化学系。乙腈（Fisher公司，色谱纯），娃哈哈纯净水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备 ①原薯蓣皂苷对照品溶液：精密称取原薯蓣皂苷对照品4.32 mg，置于10 mL棕色量瓶中，用水溶解并稀释到刻度，摇匀，备用。②薯蓣皂苷对照品溶液：精密称取薯蓣皂苷对照品4.10 mg，置于10 mL棕色量瓶中，用甲醇溶解并稀释到刻度，摇匀，备用。
2.1.2 供试品溶液的制备 称取粉萆薢粉末（过60目筛）约300 mg，精密称定，置100 mL具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇30 mL，称定质量，超声提取（功率250 W，频率40 kHz）60 min，过滤，减压回收溶剂，残渣用70%乙醇定容至25 mL棕色量瓶中。用0.45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液，作为供试品溶液，备用。
2.2 色谱条件
2.3 线性关系考察
分别精密吸取原薯蓣皂苷对照品溶液（浓度为0.432 mg/mL）4、8、12、16、20 μL，薯蓣皂苷对照品溶液（浓度为0.410 mg/mL）2.5、5.0、10、15、20 μL，注入高效液相色谱仪，按“2.2”项下色谱条件进行分析，测定峰面积。以对照品量（μg）为横坐标，色谱峰峰面积为纵坐标，进行回归计算，得回归方程分别为：原薯蓣皂苷Y=111 214X-23 782，r=0.999 1；薯蓣皂苷Y=143 558X+1721.9，r=0.999 6。原薯蓣皂苷与薯蓣皂苷量分别在1.73～8.64 μg和1.03～8.20 μg范围内呈良好的线性关系。
2.4 精密度试验
精密吸取同一供试品溶液20 μL，按“2.2”项下色谱条件连续进样6次，测定原薯蓣皂苷、薯蓣皂苷的色谱峰峰面积，分别计算原薯蓣皂苷与薯蓣皂苷的峰面积，结果RSD分别为2.35%、1.61%，表明方法精密度良好。
2.5 稳定性试验
精密吸取同一份供试品溶液20 μL，分别于制备后0、2、4、6、8、24 h进样测定，计算原薯蓣皂苷与薯蓣皂苷峰面积的RSD分别为1.08%、1.14%，结果表明供试品溶液中原薯蓣皂苷与薯蓣皂苷在室温条件下24 h内基本稳定。
2.6 重复性试验
取粉萆薢药材（广西玉林，过60目筛）粉末6份，按“2.1.2”项下方法操作，制得6份供试品溶液，取20 μL注入高效液相色谱仪，测定含量。6份样品中原薯蓣皂苷与薯蓣皂苷的含量平均值分别为1.98%、2.01%，RSD分别为2.04%、1.57%，表明该方法重复性良好。
2.7 加样回收率试验
取粉萆薢（已知原薯蓣皂苷、薯蓣皂苷含量分别为1.98%、2.01%）粉末6份，每份约150 mg，精密称定，分别精密加入原薯蓣皂苷对照品溶液（含原薯蓣皂苷1.8 mg/mL）、薯蓣皂苷对照品溶液（含薯蓣皂苷2.0 mg/mL）各1.5 mL，按“2.1.2”项下方法制备，按“2.2”项下色谱条件测定，计算回收率，结果见表1。
2.8 含量测定
取10个不同产地粉萆薢药材粉末300 mg各3份，精密称定，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.2”项下色谱条件测定峰面积，并用外标法计算样品中原薯蓣皂苷和薯蓣皂苷的含量。10个不同产地粉萆薢药材中原薯蓣皂苷和薯蓣皂苷含量相差较大。薯蓣皂苷含量以湖南沅陵最高，为3.22%；浙江临安最低，为0.75%。原薯蓣皂苷含量以湖北荆州最高，为2.24%；江西宜春最低，为0.89%。二者含量之和由高到低产地依次为：湖南沅陵>湖北荆州>浙江龙泉>安徽亳州>广西玉林>广西南宁>广东广州>浙江临安>湖北宜昌>江西宜春。结果见表2。
3 讨论
本试验考察了波长203、208、210 nm的色谱图，发现在203 nm处噪音干扰较大、210 nm处灵敏度较低，而在208 nm处原薯蓣皂苷与薯蓣皂苷均有吸收且分离良好，且在此波长下同时测定2个成分杂质干扰少、灵敏度高，因此选择208 nm 作为检测波长。
本试验考察了乙腈-水、乙腈-0.2%冰醋酸水、乙腈-0.1%磷酸水等不同比例的流动相进行梯度洗脱，结果表明乙腈-水梯度洗脱的色谱峰峰形好，保留时间适中，灵明度高，可达到较好的分离效果。
由于原薯蓣皂苷在甲醇中不稳定，其C-22-OH容易被甲基化，转变成甲基原薯蓣皂苷，故不选用甲醇做溶剂和流动相。本试验提取溶剂考察了30%、50%、70%、95%乙醇溶剂的提取效率，结果显示70%乙醇提取效率较高。
因原薯蓣皂苷为原皂苷类，在受热的情况下容易水解，失去26-位的葡萄糖基，F-环环合得到相应的次级皂苷类，为避免加热，所以选择超声提取法。提取溶剂用量考察了10、30、50 mL，提取时间考察了20、40、60、80 min，结果表明30 mL的70%乙醇超声提取60 min可提取完全。
参考文献：
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[M].北京：中国医药科技出版社，2015：289.
[2] 高志捷，陈信义，刘江涛，等.薯蓣皂苷体外抑制白血病细胞增殖研究[J].中国中医基础医学杂志，2003，9（8）：17-19.
[3] 李淑青，肖潇，王坤凤，等.不同产地粉萆薢总皂苷含量测定[J].中国实验方剂学杂志，2013，19（12）：118-120.
[4] MA C， WANG W， CHEN Y Y， et al. Neuroprotective and antioxidant activity of compounds from the aerial parts of Dioscorea opposite[J]. Journal of Natural Products，2005，68（8）：1259-1261.
[5] 刘静，吴红，丛恬駪，等.薯蓣皂苷含药血清对大鼠心室肌细胞钠离子通道的影响[J].中草药，2014，45（16）：2370-2374.
[6] 高志捷，陈信义，刘江涛，等.薯蓣皂苷体外抑制肿瘤细胞增殖的研究[J].中国中医药信息杂志，2005，12（7）：33-34.
[7] 斯其连，周达新.薯蓣皂苷抗血小板聚集作用的临床观察[J].中国临床药学杂志，2006，15（4）：238-239.
[8] 孙雪艳，杨丽平，占永立，等.薯蓣皂苷抑制脂多糖刺激的大鼠系膜细胞增殖及对Wnt通路的影响[J].中华中医药杂志，2014，29（3）：871-874.
[9] 汪洋珍，王俊俊，梁继超，等.薯蓣皂苷对大鼠成骨细胞增殖、分化及OPG/RANKL mRNA表达的影响[J].中华中医药杂志，2010，25（1）：134-136.
[10] 金绍刚.HPLC法测定粉萆薢和绵萆薢中薯蓣皂苷元的含量[J].广州化工，2014，42（2）：127-130.
[11] 刘丛彬，王举涛，刘劲松，等.梯度洗脱反相高效液相色谱法测定粉萆薢与绵萆薢中薯蓣皂苷含量[J].安徽中医学院学报，2013，32（6）：81-83.
摘要：目的 采用高效液相色谱法（HPLC）测定不同产地粉萆薢中原薯蓣皂苷和薯蓣皂苷含量。方法 采用Agilent C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），以乙腈-水为流动相梯度洗脱，流速0.8 mL/min，检测波长208 nm，柱温30 ℃，进样量20 μL。结果 原薯蓣皂苷在1.73～8.64 μg（r=0.999 1）范围内线性关系良好，平均回收率为101.98%（RSD=1.53%）；薯蓣皂苷在1.03～8.20 μg（r=0.999 6）范围内线性关系良好，平均回收率为101.60%（RSD=2.41%）。10个不同产地粉萆薢中原薯蓣皂苷含量在0.89%～2.24%之间，薯蓣皂苷含量在0.75%～3.22%之间。结论 该方法操作简便，定量准确，重复性好，可作为粉萆薢药材质量控制方法。
关键词：粉萆薢；中药产地；原薯蓣皂苷；薯蓣皂苷；高效液相色谱法
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2016）05-0104-03
Content Determination of Protodioscin and Diosgenin in Dioscoreae Hypoglaucae Rhizoma from Different Habitats by HPLC SHAO Yan-yan， XIAO Xiao， WU Ling-fang， ZHU Dan， YANG Guang-hui， ZHANG Xiao-xue， ZHANG Lan-zhen （Beijing University of Chinese Medicine， Beijing 100102， China）
Abstract： Objective To establish an HPLC method for the content determination of protodioscin and diosgenin in Dioscoreae Hypoglaucae Rhizoma from different habitats. Methods The chromatographic separation was performed on an Agilent C18 column （4.6 mm×150 mm， 5 μm） with mobile phase of acetonitrile-water solution with gradient elution at the flow rate of 0.8 mL/min； the detection wavelength was 208 nm； the column temperature was 30 ℃； the injection volume was 20 μL. Results Protodioscin showed a good linear relationship among the range of 1.73–8.64 ?g （r=0.999 6）， with the average recovery of 101.98% （RSD=1.53%）； Diosgenin showed a good linear relationship among the range of 1.03–8.20 μg （r=0.999 1）， with the average recovery of 101.60% （RSD=2.41%）. The contents of protodioscin and diosgenin in Dioscoreae Hypoglaucae Rhizoma from 10 different habitats were in the range of 0.89%–2.24% and 0.75%–3.22%， respectively. Conclusion The method is simple， accurate and with repeatability， which can be used as quality control method of Dioscoreae Hypoglaucae Rhizoma.
Key words： Dioscoreae Hypoglaucae Rhizoma； place of production （TCD）； protodioscin； diosgenin； HPLC
粉萆薢为薯蓣科植物粉背薯蓣Dioscorea hypoglauca Palibin的干燥根茎，具有利湿祛浊、祛风通痹功效，用于淋病白浊、白带过多，湿热疮毒、腰膝疼痛及风湿顽痹和小便不利等病症[1]。粉萆薢主要分布于浙江临安、淳安、龙泉，湖南沪溪、沅陵、安化及四川、安徽、江西等地。现代药理研究表明，粉萆薢具有降压、抗炎、抗菌、提高免疫、抗肿瘤、杀软体动物等功效[2]。粉萆薢主要含有皂苷、甾体、二芳基庚烷、木脂素、有机酸及脂类等化学成分，其中甾体皂苷类化合物是其主要药效成分。薯蓣皂苷有抗肿瘤、改善心血管、调节免疫、抗血小板聚集、抗炎、
降血糖、预防和治疗骨质疏松作用，原薯蓣皂苷有较好的抗肿瘤作用[4-9]，为粉萆薢的主要药效物质。
2015年版《中华人民共和国药典》尚无粉萆薢的含量测定方法，目前文献报道的粉萆薢含量测定有药材中总皂苷的含量测定[3]和薯蓣皂苷、薯蓣皂苷元的含量测定[10-11]。为了进一步完善粉萆薢的质量控制方法，本试验建立粉萆薢中原薯蓣皂苷和薯蓣皂苷的高效相色谱（HPLC）含量测定方法，并测定和比较不同产地粉萆薢药材中原薯蓣皂苷和薯蓣皂苷的含量，为粉萆薢的质量控制提供依据。
1 仪器与试药
Waters 1525高效液相色谱仪（美国Waters公司），Agilent C18色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm，美国Agilent公司），Sartorious BT 25S电子天平（德国Sartorious公司），KQ-500 DE超声清洗仪（昆山超声仪器有限公司）。
原薯蓣皂苷对照品（购于南京春秋生物有限公司，批号200015，纯度>98%）。薯蓣皂苷对照品，自制，经1H NMR、13C NMR、MS鉴定结构，HPLC归一化法检测，纯度>98%。10个产地药材购于祁州香草堂、亳州中药堂、安国中药材市场，经北京中医药大学中药鉴定系张贵君老师鉴定为薯蓣科植物粉背薯蓣Dioscorea hypoglauca Palibin的干燥根茎，样品保存于北京中医药大学中药化学系。乙腈（Fisher公司，色谱纯），娃哈哈纯净水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备 ①原薯蓣皂苷对照品溶液：精密称取原薯蓣皂苷对照品4.32 mg，置于10 mL棕色量瓶中，用水溶解并稀释到刻度，摇匀，备用。②薯蓣皂苷对照品溶液：精密称取薯蓣皂苷对照品4.10 mg，置于10 mL棕色量瓶中，用甲醇溶解并稀释到刻度，摇匀，备用。
2.1.2 供试品溶液的制备 称取粉萆薢粉末（过60目筛）约300 mg，精密称定，置100 mL具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇30 mL，称定质量，超声提取（功率250 W，频率40 kHz）60 min，过滤，减压回收溶剂，残渣用70%乙醇定容至25 mL棕色量瓶中。用0.45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液，作为供试品溶液，备用。
2.2 色谱条件
2.3 线性关系考察
分别精密吸取原薯蓣皂苷对照品溶液（浓度为0.432 mg/mL）4、8、12、16、20 μL，薯蓣皂苷对照品溶液（浓度为0.410 mg/mL）2.5、5.0、10、15、20 μL，注入高效液相色谱仪，按“2.2”项下色谱条件进行分析，测定峰面积。以对照品量（μg）为横坐标，色谱峰峰面积为纵坐标，进行回归计算，得回归方程分别为：原薯蓣皂苷Y=111 214X-23 782，r=0.999 1；薯蓣皂苷Y=143 558X+1721.9，r=0.999 6。原薯蓣皂苷与薯蓣皂苷量分别在1.73～8.64 μg和1.03～8.20 μg范围内呈良好的线性关系。
2.4 精密度试验
精密吸取同一供试品溶液20 μL，按“2.2”项下色谱条件连续进样6次，测定原薯蓣皂苷、薯蓣皂苷的色谱峰峰面积，分别计算原薯蓣皂苷与薯蓣皂苷的峰面积，结果RSD分别为2.35%、1.61%，表明方法精密度良好。
2.5 稳定性试验
精密吸取同一份供试品溶液20 μL，分别于制备后0、2、4、6、8、24 h进样测定，计算原薯蓣皂苷与薯蓣皂苷峰面积的RSD分别为1.08%、1.14%，结果表明供试品溶液中原薯蓣皂苷与薯蓣皂苷在室温条件下24 h内基本稳定。
2.6 重复性试验
取粉萆薢药材（广西玉林，过60目筛）粉末6份，按“2.1.2”项下方法操作，制得6份供试品溶液，取20 μL注入高效液相色谱仪，测定含量。6份样品中原薯蓣皂苷与薯蓣皂苷的含量平均值分别为1.98%、2.01%，RSD分别为2.04%、1.57%，表明该方法重复性良好。
2.7 加样回收率试验
取粉萆薢（已知原薯蓣皂苷、薯蓣皂苷含量分别为1.98%、2.01%）粉末6份，每份约150 mg，精密称定，分别精密加入原薯蓣皂苷对照品溶液（含原薯蓣皂苷1.8 mg/mL）、薯蓣皂苷对照品溶液（含薯蓣皂苷2.0 mg/mL）各1.5 mL，按“2.1.2”项下方法制备，按“2.2”项下色谱条件测定，计算回收率，结果见表1。
2.8 含量测定
取10个不同产地粉萆薢药材粉末300 mg各3份，精密称定，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.2”项下色谱条件测定峰面积，并用外标法计算样品中原薯蓣皂苷和薯蓣皂苷的含量。10个不同产地粉萆薢药材中原薯蓣皂苷和薯蓣皂苷含量相差较大。薯蓣皂苷含量以湖南沅陵最高，为3.22%；浙江临安最低，为0.75%。原薯蓣皂苷含量以湖北荆州最高，为2.24%；江西宜春最低，为0.89%。二者含量之和由高到低产地依次为：湖南沅陵>湖北荆州>浙江龙泉>安徽亳州>广西玉林>广西南宁>广东广州>浙江临安>湖北宜昌>江西宜春。结果见表2。
3 讨论
本试验考察了波长203、208、210 nm的色谱图，发现在203 nm处噪音干扰较大、210 nm处灵敏度较低，而在208 nm处原薯蓣皂苷与薯蓣皂苷均有吸收且分离良好，且在此波长下同时测定2个成分杂质干扰少、灵敏度高，因此选择208 nm 作为检测波长。
本试验考察了乙腈-水、乙腈-0.2%冰醋酸水、乙腈-0.1%磷酸水等不同比例的流动相进行梯度洗脱，结果表明乙腈-水梯度洗脱的色谱峰峰形好，保留时间适中，灵明度高，可达到较好的分离效果。
由于原薯蓣皂苷在甲醇中不稳定，其C-22-OH容易被甲基化，转变成甲基原薯蓣皂苷，故不选用甲醇做溶剂和流动相。本试验提取溶剂考察了30%、50%、70%、95%乙醇溶剂的提取效率，结果显示70%乙醇提取效率较高。
因原薯蓣皂苷为原皂苷类，在受热的情况下容易水解，失去26-位的葡萄糖基，F-环环合得到相应的次级皂苷类，为避免加热，所以选择超声提取法。提取溶剂用量考察了10、30、50 mL，提取时间考察了20、40、60、80 min，结果表明30 mL的70%乙醇超声提取60 min可提取完全。
参考文献：
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[M].北京：中国医药科技出版社，2015：289.
[2] 高志捷，陈信义，刘江涛，等.薯蓣皂苷体外抑制白血病细胞增殖研究[J].中国中医基础医学杂志，2003，9（8）：17-19.
[3] 李淑青，肖潇，王坤凤，等.不同产地粉萆薢总皂苷含量测定[J].中国实验方剂学杂志，2013，19（12）：118-120.
[4] MA C， WANG W， CHEN Y Y， et al. Neuroprotective and antioxidant activity of compounds from the aerial parts of Dioscorea opposite[J]. Journal of Natural Products，2005，68（8）：1259-1261.
[5] 刘静，吴红，丛恬駪，等.薯蓣皂苷含药血清对大鼠心室肌细胞钠离子通道的影响[J].中草药，2014，45（16）：2370-2374.
[6] 高志捷，陈信义，刘江涛，等.薯蓣皂苷体外抑制肿瘤细胞增殖的研究[J].中国中医药信息杂志，2005，12（7）：33-34.
[7] 斯其连，周达新.薯蓣皂苷抗血小板聚集作用的临床观察[J].中国临床药学杂志，2006，15（4）：238-239.
[8] 孙雪艳，杨丽平，占永立，等.薯蓣皂苷抑制脂多糖刺激的大鼠系膜细胞增殖及对Wnt通路的影响[J].中华中医药杂志，2014，29（3）：871-874.
[9] 汪洋珍，王俊俊，梁继超，等.薯蓣皂苷对大鼠成骨细胞增殖、分化及OPG/RANKL mRNA表达的影响[J].中华中医药杂志，2010，25（1）：134-136.
[10] 金绍刚.HPLC法测定粉萆薢和绵萆薢中薯蓣皂苷元的含量[J].广州化工，2014，42（2）：127-130.
[11] 刘丛彬，王举涛，刘劲松，等.梯度洗脱反相高效液相色谱法测定粉萆薢与绵萆薢中薯蓣皂苷含量[J].安徽中医学院学报，2013，32（6）：81-83.
