孔雀鱼体表变形虫病及其防治研究

    李赫+李文宽+胡宗云+富丽静+宋文华+王庆海+张涛+张健

    

    摘 要：2014年10-11月，辽宁某地温室大棚观赏鱼场养殖的孔雀鱼（Poecilia reticulate）普遍暴发了体表变形虫病，其病原初步鉴定为池沼多核变形虫Pelomyxa palustris Greeff。病鱼的主要症状是游动缓慢，食欲减退，以至不摄食；体表两侧局部溃烂，镜检病灶处可见大量虫体。防治试验结果表明：乙酸和过氧化氢混合使用（1∶3），浓度为0.5%～1.0%，浸泡4～5 min，有一定杀虫效果。盐酸奎宁浓度为500～1 500 mg/L，浸泡15 min，有一定杀虫效果。青蒿素+TMP+高甲醚（300 mg/L∶60 mg/L∶10 mg/L）浸泡20～30 min，杀虫效果较好。

    关键词：孔雀鱼；变形虫病；防治；病害

    观赏渔业是水产养殖业的一个分支，是我国大有发展潜力的新兴产业之一。随着科学技术的发展和社会的进步，人民生活水平不断提高，国际经济与贸易迅速发展，国内外市场对观赏鱼的需求日趋旺盛，观赏渔业得到了长足发展。但随着产业的发展，由于养殖技术、水质、饲料等诸多因素的影响，病害频发，经济损失严重，已成为制约产业发展的主要因素之一。2014年10-11月，辽宁某地大棚观赏鱼场养殖的孔雀鱼普遍爆发了体表变形虫病，给养殖者造成了严重的经济损失。引起鱼类疾病的原生动物较多[1-3]，包括鞭毛虫、孢子虫、纤毛虫等，而由变形虫引起的鱼类疾病报道甚少，有鯇内变形虫（Entamoeba ctenopharyngodoni）、变形虫（Amoeba sp.）、拟变形虫（Paramoeba perniciosa）[2，4]，引起观赏鱼疾病的变形虫更为鲜见，杨丽文等报道了孔雀鱼暗尾丝虫病[5]。为此，我们对此病的病原和防治措施进行了初步研究，以期为观赏鱼养殖疾病防治提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 试验鱼

    试验鱼取自辽宁某地大棚观赏鱼场养殖的孔雀鱼，捞取症状明显的病鱼100余尾（全长4～5 cm），带回实验室用于治疗试验。

    1.2 试验药物

    双氧水（浓度30%过氧化氢，辽宁新兴试剂有限公司）、过氧化氢（浓度3%，广东恒健制药有限公司）、苯扎溴铵（浓度45%，广州精博生物技术有限公司）、硫酸鋅（沈阳市华东试剂厂）、乙酸（浓度99.5%，沈阳市华东试剂厂）、高锰酸钾（上海凌峰化学试剂有限公司）、甲醛（浓度36%～40%沈阳天罡化学试剂厂）、盐酸奎宁（纯度985%，上海蓝季科技发展有限公司）、青蒿素（纯度98%，西安皓源生物技术有限公司）、蒿甲醚（纯度99%，西安皓源生物技术有限公司）、三羟甲基丙烷（TMP，纯度98%，广州华生达兽药有限公司）、高效氯氰菊酯（浓度4.5%（w/v）武汉中博水产生物技术有限公司）、聚维酮碘（浓度10%，西安富迤生物工程有限公司）、伊维菌素（浓度1%，山西昌泰动物药物有限公司）、阿维菌素（浓度200 mL∶0.6 g，山西昌泰动物药物有限公司）、辛硫磷（浓度100 mL∶40 g，武汉中博水产生物技术有限公司）、10%新洁尔灭（含苯扎溴铵27～33 g/L，山东利尔康医疗科技股份有限公司）、磺胺喹噁啉钠可溶性粉（浓度10%，天津威隆动物药品有限公司）、磺胺氯呲嗪钠可溶性粉（浓度100 g∶20 g，山东德信生物科技有限公司）。

    1.3 试验方法

    在实验室，用上述药物进行预试验，筛选出敏感药物。然后，根据预试筛选出的敏感药物，设几个不同药物浓度，在观赏鱼养殖大棚用规格为60 cm×35 cm×30 cm的泡沫箱进行正式治疗试验，每箱盛水30 L，放症状明显的病鱼15尾，浸浴15～30 min后，镜检杀虫效果。

    2 结果

    2.1 病原

    经显微镜观察，此虫的形态特征与中国淡水生物图谱[6]记载的多核变形虫科（Pelomyxidae）、多核变形虫属（Pelomyxa）的池沼多核变形虫Pelomyxa palustris Greeff相似，虫体呈长卵圆形，个体较大，平均体长达58.6 μm（43.6～79.9 μm），体宽36.4 μm（24.2～48.4 μm）。繁殖方式是二分裂繁殖。

    2.2 症状

    此虫主要寄生在鱼的体表。少量寄生，症状不明显，大量寄生可造成体表溃疡。虫体主要密集在溃疡处。病鱼游动缓慢，摄食减少，直至完全不摄食。病鱼逐渐死亡，累计死亡率达20%以上。

    2.3 流行情况

    在辽宁某地大棚观赏鱼场养殖区均有流行，流行于10月-12月，主要危害孔雀鱼，虽然没有造成急剧大批死亡，但累计死亡率较高。发病水温20 ℃左右，水中氨氮0.494 mg/L，亚硝酸盐0.634 mg/L，pH值8.8。

    2.4 杀虫效果

    过氧化氢（400 mg/L）、硫酸锌（100～500 mg/L）、苯扎溴铵（200～1 500 mg/L）、高锰酸钾（15～200 mg/L）、甲醛（250～1 500 mg/L）、氯氰菊酯（1 mg/L）、聚维酮碘（100 mg/L）、伊维菌素（10 mg/L）、阿维菌素（10 mg/L、20 mg/L）、双氧水（200 mg/L）、辛硫磷（2 mg/L）、10%新洁尔灭（0.1%）、磺胺喹噁啉钠可溶性粉（5～10 g/L）、磺胺氯呲嗪钠可溶性粉（14 g/L），浸泡10～30 min，对此虫无杀灭效果。乙酸和过氧化氢混合使用（1∶3），浓度为0.5%～1.0%，浸泡4～5 min，有一定杀虫效果。盐酸奎宁浓度为500～1 500 mg/L，浸泡15 min，有一定杀虫效果。青蒿素+TMP+蒿甲醚（300 mg/L∶60 mg/L∶10 mg/L，溶解后用1 mol/L NaOH 调节至pH值535左右）浸泡20～30 min，杀虫效果较好。

    3 讨论

    目前，辽宁地区大棚养殖的孔雀鱼所用饲料主要是人工捞取的水丝蚓，而此虫多栖息于含有机质、腐殖质较多的污水沟、排水沟的底泥中。若投喂的水丝蚓清洗不彻底，就会把此虫带入观赏鱼养殖池中，当条件适合时，此虫就会大量繁殖。同时，在养殖过程中，为了防止青苔生长，养殖者经常向池中泼洒土霉素等药物，使池水透光性差，这就为此虫的繁殖创造了条件。观赏鱼养殖密度较高，当管理不善、防病措施不力时，就很容易爆发流行。

    在自然條件下，此虫原本是营自由生活，生活在池塘、水沟的底泥中[7]及河流中[8]。但在水泥池中，由于生态条件和食物条件的改变，迫使它营寄生生活。这也是自然界生物的一种本能。试验发现，此虫大量寄生在死亡的鱼体上，而在健康的鱼体上基本未有发现，这说明体质弱的鱼容易感染发病。

    朱军[9]等报道过变形虫寄生于水螅，并引起水螅大量死亡。Maria JS[10]等开展了有关黑鲈感染阿米巴虫的调查，发现此虫可以引起黑鲈较高的死亡率（43%～73%）。D.ZILBERG[11]发现由Neoparamoeba pemaquidensis引起的阿米巴鳃病，对鲑鱼的海水养殖造成巨大损失，同时也正威胁着鲽鱼的养殖。孔雀鱼体表常见寄生虫有小瓜虫、三代虫、纤毛虫、指环虫[8，12-13]等，而由变形虫寄生引起的疾病尚未见报道。对于一种新的疾病，找到其有效的防治药物尤为重要。从本试验结果来看，高锰酸钾、硫酸锌、甲醛、苯扎溴铵、氯氰菊酯、伊维菌素、阿维菌素、辛硫磷等药物对此虫基本无效，而过氧化氢和乙酸混合使用有较好的杀虫效果，但浸泡时间不宜过长，否则，会造成鱼的死亡。青蒿素+TMP+蒿甲醚（300 mg/L∶60 mg/L∶10 mg/L）混合使用杀虫效果较好，同时对鱼也较安全。在治疗过程中我们发现，无论使用哪种药物，一次都很难将虫体全部杀死，这可能是因为虫体在病灶处高度密集并不间断地迅速活动，从而刺激鱼体分泌大量黏液，将虫体包裹起来，短时间内药物很难渗透到里面，所以一次只能杀死位于表层的虫体。

    在养殖生产实践中，要杜绝此病的发生，应定期对养殖池进行消毒，保持池塘环境卫生，同时对投喂的活饵水丝蚓也要进行消毒处理，以免病原体随饵料带入池中，引起疾病的发生。

    参考文献：

    [1]湖北省水生生物研究所.湖北省鱼病病原区系图志[M].北京：科学出版社，1973

    [2] 黄琪琰.水产动物疾病学[M].上海：上海科学技术出版社，1993：161-162

    [3] 魏丽英，刘堂水，李远国，等.水产养殖动物病害防治实用新技术专题讲座 第八篇 防治常见原生动物类寄生虫病实用新方法[J].渔业致富指南，2010（10），51-52

    [4] 陈启鎏.青、鯇、鳙、鲢等四种家鱼寄生原生动物的研究I.寄生鯇鱼的原生动物[J].水生生物学集刊，1955（2）：123-164

    [5] 杨丽文，潘宏博，李华，等.孔雀鱼暗尾丝虫病病原性确认与鉴定[J].水生生物学报，2012，36（3）：578-582

    [6] 韩茂森，束蕴芳.中国淡水生物图谱[M].北京：海洋出版社，1995：180-183

    [7] 龚竹林，杨奕祥，雷建军.漓江浮游动物调查[J].广西水产科技，2007（2）：35-46

    [8] 曲万侠，姜艳华.孔雀鱼的饲养及病害防治[J].黑龙江水产，2009（6）：22-23

    [9] 朱军，杨秀玲，孙国娜，等.变形虫对水螅的危害及防治初探[J].生物学通报，2005，40（8）：19

    [10] Maria JS，Francisca C，Pamela C，et al.Impact of amoeba and scuticociliatidia infections on the aquaculture European sea bass （Dicentrarchus labrax L.） in Portugal.Veterinary Parasitology，2010（171） ，15-21

    [11] D.zilberg.Amoebic gill disease of marine fish caused by Neoparamoeba pemaquidensis.Acta Zoologica Sinica，2005，51（4）：554-556

    [12] 陈思行.孔雀鱼的养殖及病害防治[J].水产科技情报，2002，29（1）：40-42

    [13] 许杰，张树林，赵燕超.由三代虫引发孔雀鱼溃烂病及防治[J].天津水产，2006（1）：30-31

    Abstract：From October to November in 2014， Guppy cultivated in greenhouse of ornamental fish farm in Liaoyang area commonly broke out amoebiasis.The pathogen was preliminarily identified as Pelomyxa palustris.Principal apparent symptoms of diseased fish were swimming slowly， decreased appetitie， up to no feeding and fester on partial surface of both sides.A large number of P.palustris were found in microscopic examination.Experiment results showed that both soaking the diseased fish in 05%～1.0% mixed liquid of acetic acid and hydrogen peroxide （1：3） for 4～5 min and in 500～1 500 mg/L of Quinine hydrochloride for 15 min had some effect.It had better control effect by soaking the diseased fish in mixed liquid of artemisinin，TMP and artemether（300 mg/L∶60 mg/L∶10 mg/L）for 20～30 min.

    Key words：Poecilia reticulate； amoebiasis； prevention and treatment；disease

    （收稿日期：2016-05-03）