草莓组培快繁技术
庞传明+李忠
摘要:简要介绍了草莓组培快繁技术流程及每个环节的技术要点,采用该技术草莓试管移栽成活率可达90%以上。
关键词:草莓;组织培养;移栽
文章编号:1005345X(2015)02005402中图分类号:S668.4文献标识码:B
草莓是结果快、成熟早、植株小、周期短、管理方便、病虫较少、加工容易、便于调控的一种果树。在世界浆果类水果生产中,其栽培面积和产量仅次于葡萄。草莓繁殖主要通过匍匐茎分株。在长期无性繁殖中,易导致种苗退化,影响产量和品质。应用离体培养技术可有效解决这一难题,现将草莓组培快繁技术简介如下。
1外植体的植入
春季当草莓匍匐茎长到10 cm以上时,于晴天早上10时以前,采取无病虫害、生长健壮的茎尖(2~3 cm),迅速拿到实验室在流水下处理2~3 h,再用洁尔灭浸泡1 h,后用流水冲洗干净。然后在超净台内用75%的酒精浸泡15~20 s,用无菌水洗3~5遍,再用0.1%的升汞浸泡8 min(升汞液中加1~2滴吐温),浸泡过程中要不断搅拌,最后再用无菌水清洗3~5遍后放在无菌滤纸上吸干水分。在显微镜下剥取约0.2~0.5 mm的茎尖,接种到诱导培养基内(培养基配方为改良MS+6-BA 0.5 mg/L),放入培养室培养。培养室光照14~16 h/d,光照强度1 800~2 000 lx,温度20~26 ℃(光照时段26 ℃左右,暗培时段20 ℃左右)。
2继代扩繁及生根培养
当外植体培养50~60 d后,茎尖长到1.5~2.0 cm时,开始转接于继代培养基(MS+BA 0.2 mg/L+NAA 0.05 mg/L)上培养,培养条件同前,继代培养周期为30~35 d。连续扩繁几个周期,瓶苗增殖到一定数量后,开始进行生根培养。生根选用苗高2 cm以上、具
庞传明等:草莓组培快繁技术
3~4片大叶的健壮株,接种到(1/2MS+NAA 0.2 mg/L)的生根培养基中,20 d后,根系长到1~2 cm时开始炼苗移栽。
3大棚炼苗移栽
大棚炼苗的最佳时间在4-10月份,此时棚内温度较高,地温也相对较高,光照时间长,最适合草莓组培苗的生长发育,易于成活。
3.1炼苗
将装有生根苗的培养瓶放入大棚内,进行闭瓶炼苗,约10~15 d。此段时间每3 d增加一次光照强度,从5 000 lx一直增到10 000 lx,温度30 ℃左右,当瓶苗明显长高且有新叶长出,根系长到3~4 cm时开始开瓶炼苗2~3 d。开瓶前大棚要消毒一次,以防大量污染。开瓶后每瓶内迅速加少量水,以增加瓶苗的湿度和水分,同时还有一定的防菌作用。
3.2移栽
移栽前应先配制营养土和准备苗床。将准备好的泥炭、沙、珍珠岩,按5︰1︰1的比例配好,用500倍液的多菌灵灭菌,然后用塑料布闷盖,灭菌2~3 d。栽苗前把营养土铺好,厚度约10 cm左右,最后再用500倍液多菌灵把苗床浇透或直接将营养土装入72孔穴盘待用。
完成炼苗后把小苗从瓶内用镊子取出放入清水中清洗干净根系上附着的培养基,去掉小苗茎部发黄、发脆的老叶,然后将苗子放入1 000倍的多菌灵液中浸泡3~5 min。尔后把小苗按30 cm×60 cm株行距栽入提前铺好的炼苗床上,最后浇透水,扣上小拱棚,并在小拱棚上搭上遮阳网。若栽到72孔的穴盘中,也要放入小拱棚,开始驯化。注意在取苗、洗苗、栽苗过程中必须轻取轻放,以防幼嫩根系和茎段折断影响成活率。
3.4移苗管理
移栽第1周不放风,在晴天上午10时左右到下午4时盖好遮阳网,保证光照强度不高于5 000 lx,湿度达到100%,温度25 ℃左右,以使其安全度过缓苗期。第2周后开始慢慢增加光照强度,晚上开始通底风。第3周时白天逐步开棚降低湿度,让其逐步适应外界环境,开始有新叶长出。第4周时叶片开始长大变厚,浇水肥1次,打1次杀菌剂。1个月后苗子可达到三叶一心,基本可以适应外界环境。此法移栽成活率在90%以上。
摘要:简要介绍了草莓组培快繁技术流程及每个环节的技术要点,采用该技术草莓试管移栽成活率可达90%以上。
关键词:草莓;组织培养;移栽
文章编号:1005345X(2015)02005402中图分类号:S668.4文献标识码:B
草莓是结果快、成熟早、植株小、周期短、管理方便、病虫较少、加工容易、便于调控的一种果树。在世界浆果类水果生产中,其栽培面积和产量仅次于葡萄。草莓繁殖主要通过匍匐茎分株。在长期无性繁殖中,易导致种苗退化,影响产量和品质。应用离体培养技术可有效解决这一难题,现将草莓组培快繁技术简介如下。
1外植体的植入
春季当草莓匍匐茎长到10 cm以上时,于晴天早上10时以前,采取无病虫害、生长健壮的茎尖(2~3 cm),迅速拿到实验室在流水下处理2~3 h,再用洁尔灭浸泡1 h,后用流水冲洗干净。然后在超净台内用75%的酒精浸泡15~20 s,用无菌水洗3~5遍,再用0.1%的升汞浸泡8 min(升汞液中加1~2滴吐温),浸泡过程中要不断搅拌,最后再用无菌水清洗3~5遍后放在无菌滤纸上吸干水分。在显微镜下剥取约0.2~0.5 mm的茎尖,接种到诱导培养基内(培养基配方为改良MS+6-BA 0.5 mg/L),放入培养室培养。培养室光照14~16 h/d,光照强度1 800~2 000 lx,温度20~26 ℃(光照时段26 ℃左右,暗培时段20 ℃左右)。
2继代扩繁及生根培养
当外植体培养50~60 d后,茎尖长到1.5~2.0 cm时,开始转接于继代培养基(MS+BA 0.2 mg/L+NAA 0.05 mg/L)上培养,培养条件同前,继代培养周期为30~35 d。连续扩繁几个周期,瓶苗增殖到一定数量后,开始进行生根培养。生根选用苗高2 cm以上、具
庞传明等:草莓组培快繁技术
3~4片大叶的健壮株,接种到(1/2MS+NAA 0.2 mg/L)的生根培养基中,20 d后,根系长到1~2 cm时开始炼苗移栽。
3大棚炼苗移栽
大棚炼苗的最佳时间在4-10月份,此时棚内温度较高,地温也相对较高,光照时间长,最适合草莓组培苗的生长发育,易于成活。
3.1炼苗
将装有生根苗的培养瓶放入大棚内,进行闭瓶炼苗,约10~15 d。此段时间每3 d增加一次光照强度,从5 000 lx一直增到10 000 lx,温度30 ℃左右,当瓶苗明显长高且有新叶长出,根系长到3~4 cm时开始开瓶炼苗2~3 d。开瓶前大棚要消毒一次,以防大量污染。开瓶后每瓶内迅速加少量水,以增加瓶苗的湿度和水分,同时还有一定的防菌作用。
3.2移栽
移栽前应先配制营养土和准备苗床。将准备好的泥炭、沙、珍珠岩,按5︰1︰1的比例配好,用500倍液的多菌灵灭菌,然后用塑料布闷盖,灭菌2~3 d。栽苗前把营养土铺好,厚度约10 cm左右,最后再用500倍液多菌灵把苗床浇透或直接将营养土装入72孔穴盘待用。
完成炼苗后把小苗从瓶内用镊子取出放入清水中清洗干净根系上附着的培养基,去掉小苗茎部发黄、发脆的老叶,然后将苗子放入1 000倍的多菌灵液中浸泡3~5 min。尔后把小苗按30 cm×60 cm株行距栽入提前铺好的炼苗床上,最后浇透水,扣上小拱棚,并在小拱棚上搭上遮阳网。若栽到72孔的穴盘中,也要放入小拱棚,开始驯化。注意在取苗、洗苗、栽苗过程中必须轻取轻放,以防幼嫩根系和茎段折断影响成活率。
3.4移苗管理
移栽第1周不放风,在晴天上午10时左右到下午4时盖好遮阳网,保证光照强度不高于5 000 lx,湿度达到100%,温度25 ℃左右,以使其安全度过缓苗期。第2周后开始慢慢增加光照强度,晚上开始通底风。第3周时白天逐步开棚降低湿度,让其逐步适应外界环境,开始有新叶长出。第4周时叶片开始长大变厚,浇水肥1次,打1次杀菌剂。1个月后苗子可达到三叶一心,基本可以适应外界环境。此法移栽成活率在90%以上。