羊魏氏梭菌病的临床特点、剖检变化、诊断与防控措施

    韩宝力

    摘要：羊魏氏梭菌病是由于感染魏氏梭菌而发生的一种急性传染病，病羊主要是发生毒血症，如羊肠毒血症、羊猝疽、羔羊痢疾等。通常在气候寒冷的秋冬和初春时节发生，呈现明显的季节性。该病主要通过消化道感染，当羊感到寒冷、过于饥饿或者采食腐败的饲草而导致抵抗力降低时，则容易出现发病。病菌分泌的毒素会导致羊的消化道黏膜发炎、坏死，并造成中毒性休克，死亡率较高。现概述羊魏氏梭菌病的临床症状、剖检变化、实验室诊断及防控。

    关键词：羊;魏氏梭菌病;临床症状;剖检变化;实验室诊断;疫情处理;药物治疗;免疫预防

    中图分类号： S858.26 文献标识码：B文章编号：2095-9737（2020）03-0106-02

    1 临床症状

    该病的特点是突然发生，病程持续时间短，病羊通常没有表现出明显的症状就突然死于牧场或者圈舍内。病程持续略长的病羊，可见躯体痉挛，肌肉颤抖，卧地抽搐，四肢不断划动，眼球转动，口吐白沫，有混杂血液的泡沫流出，流涎、磨牙，体温变化存在差异，往往经过2～4 h后极度衰竭而死，死亡后腐败较快。

    2 剖检变化

    剖检病死羊，主要是肠道发生典型病变，其中最明显的是小肠发炎，肠道内严重充血，内部黏膜发生脱落，且实质性脏器都发生严重的出血性炎症。肝脏，呈钝圆形，边缘泛黄，存在出血点;心脏，心内外膜存在出血性斑点，心包肿大，含有大量积液;肺脏伴有严重的出血症状，同时发生明显水肿;脾脏散布有出血点;肾脏被膜下存在明显的出血点;气管、支气管发生坏死性充血，里面存在红色泡沫;胃部黏膜发生坏死并脱落，其中病变最严重的是瘤胃。

    3 实验室诊断

    3.1 涂片镜检

    无菌条件下，取病死羊的肠管以及脏器等病料进行涂片，经过革兰氏染色、显微镜观察，能够看到革兰氏阳性大杆菌，菌体两端钝圆。

    3.2 培养特性

    3.2.1 需氧培养

    无菌条件下，取病死羊的心血、肝脏、肺脏、脾脏等病料组织分别以划线方式在普通平板、血平板培养基上接种，置于37℃下培养，经过20 h没有长出菌落。

    3.2.2 厌氧培养

    将以上接种病料的培养基置于厌氧条件下培养，可见普通培养基上长出菌落。在血平板培养基上生长淡黄色的圆形菌落，直径为2～4 mm，表面光滑，中央隆起，且周围有溶血环，个别菌落呈圆盘形，但边缘呈锯齿状。

    挑取单个菌落在牛乳培养基中接种，经过8～10 h培养，可见牛乳发生凝集，并产生气体，出现剧烈发酵。

    3.3 生化反应

    该菌可使葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、果糖、淀粉、棉籽糖分解，并产酸产气，无法使卫矛醇、甘露醇、杨苷、枸椽酸盐发酵。

    3.4 尿中葡萄糖检测

    取膀胱内尿液加热至沸腾，接着进行过滤，先在试管中加入5 mL本尼迪克氏试剂，再加入0.5 mL处理后的尿液，混合均匀后继续加热煮沸2 min，室温静置5 min，发现管底出现大量黄色沉淀，表明尿液中存在较多的葡萄糖。

    3.5 肠毒素检查

    取一段病死羊肠内容物放在1个干净的三角瓶中，添加20 mL生理盐水进行稀释，混合均匀后以3500 r/ min的速度进行15 min离心沉淀，用微孔滤器对上清液过滤，分成3份做3组实验。

    第一组为滤液直接注射组，即取病料滤液给2只健康小白直接注射，每只接种剂量为0.2 mL。

    第二组为加热处理组，即取病料滤液加热至60℃，经过30 min处理后给2只健康小白鼠注射，每只接种剂量为0.2 mL。

    第三组为空白对照组，即取生理盐水给2只健康小白鼠直接注射，每只接种剂量为0.2 mL，用于空白对照实验。

    试验结果表明：第一组小白鼠最终发生死亡;第二组小白鼠在大约0.5 h后表现出精神不振，呼吸加速，经过4～5 h后恢复;第三组小白鼠一切正常。说明肠内容物中含有足够的毒素致死，而经过加热处理的症状轻微，可能是由于毒素在加热时被破坏。

    3.6 毒素定型试验

    取肠内容物上清液在健康小白鼠尾静脉注射，设置4组，每组各3只，注射剂量分别为0.3 mL、0.2 mL、0.1 mL、0.05 mL，对于小白鼠在5 min内都发生死亡的最小剂量作为该样品的LD50。结果肠毒素的LD50为0.1 mL。

    先取魏氏梭菌A、B、C、D 4种定型血清同肠毒素进行中和试验，然后再进行动物保护试验。要求取各型血清0.1 mL分别与2个最小致死量的肠毒素混合，这是给1只小鼠注射的用量;同时，设置对照组，按0.1 mL生理盐水与2个最小致死量肠毒素混合，均放在温箱内进行40～60 min的中和，然后取出按组尾静脉注射小鼠，对各组小鼠进行观察记录，根据最终存活的小鼠即可判定菌型。

    4 防控措施

    4.1 疫情处理

    只要发现病羊，要立即转移至地势高、干燥的草地进行放牧，如果条件允许可采取转场。同时，用强力消毒灵对羊舍建筑物、场地、用具等进行严格消毒。对于病死羊尸体，未经兽医技术人员允许禁止随便剥皮，尸体要求采取焚烧或者深埋处理，避免疫情蔓延。

    4.2 药物治疗

    对于病程持续较长的病羊，可口服100 mL 2%硫酸铜溶液，并配合使用镇静剂、强心剂以及大量的抗生素、磺胺类药物，治疗效果较好。

    另外，病羊可服用呋喃唑酮，羔羊每次用量为0.05～0.1 g，成年羊用量适当增加，每天2次，连续使用3～5天。

    4.3 免疫预防

    羊群可定期免疫接种魏氏梭菌铝胶灭活苗免，使机体形成特异性免疫。常用疫苗为羊快疫、肠毒血症、猝疽（羔羊痢疾）三联四防灭活干粉疫苗和羊梭菌病四防灭活疫苗。

    由于新生羔羊很快就可发病，即使刚出生就接种疫苗，但由于疫苗需要較长的时间（7～15天）才可建立坚强的免疫力，部分羔羊还未等疫苗发挥作用就已经死亡。因此，要求母羊在配种前1～2个月或者配种后1个月接种疫苗，这样可提高母乳的抗体滴度，提高后代羔羊抵抗该病的能力，在一定程度上预防发病，减少死亡。