丰花月季组培苗增殖与生根技术研究
沙琳
【摘? ?要】 该实验主要探讨最佳的丰花月季增殖培养、生根培养培养基配方,结果得出:瓶苗切段转接到MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+ GA3 1.0 mg/L配方中,最适合丰花月季的增殖,还能减少玻璃化现象的发生;通过3-4次的继代后,再次切段转接到1/2MS+IBA 0.5 mg/L配方中,生根效果最佳,平均根数达到4.6条。
【关键词】 增殖培养;生根培养;丰花月季;组培
Study on propagation and rooting technology of tissue culture seedlings of rose
Sha Lin
(Garden management center of jilin city, jilin province? ?132000)
[Abstract] This experiment mainly discussed the optimal formula of proliferation culture medium and root culture medium of Chinese flowering rose. The results showed that the cutting section of bottle seedlings was transferred to MS+KT 1.0mg /L+NAA 0.2mg /L+ GA3 1.0mg /L formula, which was most suitable for proliferation of Chinese flowering rose and could reduce vitrification. After 3-4 generations, the resections were cut and transferred to the 1/2 ms +IBA 0.5mg /L formula, and the rooting effect was the best, with the average number of roots reaching 4.6.
[Keywords] proliferation culture; rooting culture; chinese rose of abundant flower; seed
豐花月季,拉丁学名为:Rosa cultivars Floribunda,也叫聚花月季、多花月季、四季月季等,是蔷薇科蔷薇属中的一种丛生型落木灌丛,是现代月季种类之一。丰花月季的苗木常常高0.9-1.3 m,呈丛木状,羽状复叶,小叶5-7片,小叶长圆形,底部由长圆形逐渐变尖。近几年针对丰花月季的组培繁殖技术研究较多,但在丰花月季增殖、生根阶段研究的较为笼统,没有具体到配方的激素用量,因此该试验单独针对增殖与生根培养进行具体研究,以优化培养基配方。
1? 材料与方法
1.1? 试验材料
丰花月季组培苗由辽宁省林科院组织培养实验室提供,瓶苗生长健壮无菌无污染。
1.2? 仪器及药品
试验仪器有:高压灭菌锅(沈阳科瑞永兴化玻璃仪器有限公司);电冰箱(美歌电器有限公司);超净工作台(苏洁净化设备公司);干燥箱(中国科学院上海光学精密机械研究所);电子天平(长春长衡电子衡器有限公司);搅拌仪(苏州奇乐电子科技有限公司);恒温培养箱(优尼克环境试验设备有限公司),等。
试验药品有:NAA,KT,IBA,GA3,次氯酸钠,84消毒液,升汞,新洁尔灭,酒精,戊二醛,琼脂,白砂糖,等。
1.3? 试验方法
增殖培养配方分别记作:B1:MS+KT 0.5 mg/L;B2:MS+KT 0.5 mg/L+IAA 0.02 mg/L;B3:MS+KT 0.5 mg/L+IAA 0.04 mg/L;B4:MS+KT 0.5 mg/L+IAA 0.06 mg/L;B5:MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.02 mg/L;B6:MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.04 mg/L;B7:MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.06 mg/L。
生根培养配方分别记作:C1: 1/2MS+IBA 0.3 mg/L;C2:1/2MS+IBA 0.5 mg/L;C3: 1/2MS+NAA 0.3 mg/L;C4:1/2MS+NAA 0.5 mg/L。
7种不同的增殖培养基中,每种培养基接种50瓶,每瓶接种3小段,转接后定期观察小段的增殖状况,28d后统计苗木的增值倍数、平均苗高,另注意观察一些异常状况的发生。待增殖阶段生产出大量的增殖瓶苗时,从组培瓶苗中挑选生长健壮的嫩茎切成2 cm小段,段上保持4~6片叶转接到3种生根培养基配方上,每配方转接20瓶,每瓶转接5小段,定期观察生根状况。
2? 结果与分析
2.1? 不同增殖培养基上增殖情况
增殖阶段最容易出现玻璃化现象,主要统计玻璃化瓶数,统计的具体结果见表1。
由表1可以看出,B6增值倍数最大,其次为B7、B5,而平均苗高相比较,B5较大,说明在KT 1.0水平下,生长素NAA量的增加有利于增殖,但影响到苗高的生长,另外,从B1~B6,玻璃化的比率一直处于上升状态,B7和B6基本相当,说明生长素NAA添加,增殖倍数和苗高较IAA效果好,但容易导致苗木的玻璃化。经查阅资料显示,在培养基中添加1.0mg/L的GA3,可以减少玻璃化现象,因此为减少玻璃化现象的发生,在第2次继代时,选择在B5、B6配方添加1.0mg/L GA3,28 d统计苗木增殖情况,发现B5配方添加GA3后已无玻璃化现象发生,而B6配方添加GA3虽然玻璃化比率下降,但仍有玻璃化存在,因此得出B5+ GA3 1.0mg/L,即MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.02 mg/L+ GA3 1.0 mg/L最适合作为丰花月季的增殖培养基。
2.2? 不同生根培养基上生根情况
表2是不同生根培养基中生根情况的实验数据,根据数据可以看出,配方1和配方2的生根率最高并且达到了100%,而第三组与第四组的生根情况则不如第一组与第二组,只有72%和23%,所以比较第一组和第二组的其他因素,平均根数第二组4.6大于第一组的2.6,且根的形态较粗壮,通过对比分析得到实验结论,C2(1/2 MS+IBA 0.5 mg/L)的配方更适合风花月季的生长。
3? 结论与讨论
通过比较7个配比对丰花月季组培苗的增殖状况,发现NAA越高越有利于苗木增殖,但又会产生玻璃化现象。经查阅资料显示,在培养基中添加1.0mg/L的GA3,可以减少玻璃化现象,因此为减少玻璃化现象的发生,发现添加可以减少玻璃化现象的GA3,通過比较得出MS+KT 1.0mg/L+NAA 0.2 mg/L+ GA3 1.0mg/L最适合作为丰花月季的增殖培养基配方。通过比较4个配比对苗木的生根状况,C1、C2生根率比C3、C4高且均达到100%,说明1/2 MS配方中添加IBA比NAA更有利于试管苗生根。
由于时间和精力关系,本试验主要研究了在组培培养室阶段的生长,关于出瓶后的进一步管理并未探讨,还有待于进一步的研究。丰花月季为木本植物,关于扦插繁殖技术有限导致其不能大量繁殖,所以采用组培快速繁殖方面进行研究 以达到大批量的生产应用。
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