pH值对南美白对虾虾苗成活率的影响

    何新华张秋平潘娟

    摘 要：实验研究不同pH值对南美白对虾虾苗成活率的影响，得出以下结论：pH值7.0～9.0范围内虾苗应激较小，成活率较高。pH值低于7.0或高于9.0时，虾苗初期死亡率普遍高于pH值7.0～9.0。pH值的高低会影响到虾苗的成长健康以及成活率大小等问题，研究pH值对南美白对虾苗成活率影响大小，为南美白对虾养殖业提供了重要的科学依据。

    关键词：pH值；南美白对虾；海水；pH值测定仪

    1 实验材料及方法

    1.1 实验用品及试剂

    400 g海水晶，80 L大整理箱一个，天平一个，加热棒一个，自来水，1 m长0.5 cm宽的软管一个，曝气装置一个，50 mL烧杯两个，500 mL烧杯一个，pH值测定仪一台，pH值4.0，6.86试剂粉末各一包，吸纸一张，250 mL容量瓶两个，试剂瓶两个，玻璃棒一个，温度计一个，胶头滴管一个，盐酸500 mL和氢氧化钠500 g，16个盆，保鲜膜若干，抄网一个，药匙一个，虾料若干。

    pH值溶液及其配制：pH值测定仪校准液共有三种，分别是pH值4.0，pH值6.86，pH值91。正式实验中用到了前两种溶液。溶液的调配：将pH值试剂粉末放到烧杯中，用少许蒸馏水溶解，再用玻璃棒顺时针搅匀。然后将玻璃棒转移到容量瓶中，将烧杯中的pH值溶液顺着玻璃棒缓慢地转移到容量瓶中，将其定容为250 mL容量瓶中。

    盐酸和氢氧化钠溶液及其配制：本实验所用的盐酸来自于天津市天河化学试剂厂，500 mL，分子量为36.46，无色透明液体，在空气中易挥发，有刺激性酸味，在实验中将其配置成10%的盐酸溶液；实验所用的氢氧化钠来自上海化学试剂有限公司试剂一厂，500 g，分子量为40.00，含量不少于96%，为白色片状固体，容易吸收空气中水分及二氧化碳，易溶于水，将其配置成浓度为10%的氢氧化钠溶液。pH值测定仪测出pH值，用盐酸溶液和氢氧化钠溶液调节pH值的高低，使pH值固定下来。

    1.2 实验动物

    本实验采用的是厦门新荣腾水产技术开发有限公司的SPF第一代南美白对虾苗，虾苗的体长普遍在0.8～1.2 cm。运来时的虾苗非常活跃，袋中放着许多活性炭，目的是为了吸附水中有毒物质，使虾苗的体质保持健康状态。

    1.3 实验方法

    1.3.1 pH值简介 pH值即氢离子浓度指数，是指溶液中氢离子的总数和总物质的量的和比。它的数值俗称“pH值”。溶液酸性或碱性水平的数值，即所含氢离子浓度的常用对数的负值。pH值是水溶液最主要的理化参数之一。凡触及水溶液的自然现象，工业化学和化学生产过程都与pH值有关。因此，在工业、农业、医学、环保和科研范畴都需要研究及测定pH值。水的pH值是指水中氢离子活度的负对数值，表示为pH=-lg [H+]。pH值有时由于氢离子活度的数值往往很小，在应用上很不方便，所以就用pH值也称氢离子指数。

    这一观点作为水溶液酸性、碱性的判定指标。并且，氢离子活度的负对数值能够表示出酸性、碱性的变化幅度细微，这样运用起来就非常便利。

    1.3.2 pH值测定仪使用方法 将pH值测定仪连接好，插上电源预热10 min，用pH值溶液校正。按校正键，Call1闪烁，把电极从保护溶液中取出，放到盛有蒸馏水的烧杯中，用玻璃棒顺时针搅动后静置一分钟，取出电极后用滤纸稀吸干电极上的蒸馏水，然后将电极放入装有pH值6.86溶液的50 mL烧杯中，静止片刻读出数值，对照pH值测定仪器使用说明书，正确后按校正键，Call2键闪烁，将电极用蒸馏水洗净，放入pH值4.0溶液中，接下来的步骤基本一致，校正正确后开始测水体中的pH值高低，用盐酸溶液和碱性高的氢氧化钠溶液调pH值，经常使用pH值测定仪校正两次就可以。在使用pH值测定仪时一定要小心电极，电极极易损坏，实验中一定要小心。

    1.3.3 实验用水配制及虾苗的暂养 在大整理箱内放入80 L的水，将海水晶袋撕开，插上天平，找一个500 mL烧杯放在天平上去皮归零，然后称取400 g的海水晶，拿一个盆在大整理箱内取出半盆水，将盛有海水晶的烧杯放到盆中，使海水晶充分溶解，把溶解后的海水倒入大整理箱内，插上电热棒放入水中加温，温度设置在24 ℃，用曝气装置的两个曝气管曝气，排除掉水中的其它杂物。

    虾苗的暂养：刚运输过来的虾苗因为袋中的温度较高，不宜直接放入到兑好的海水中，使用加热棒将兑好的海水加热到一定温度，与袋中的温度差不到1 ℃时，可以将其倒入，倒入时必须留有一定的原海水，使虾苗有一个对环境转变适应的过程。暂养的虾苗每天喂三顿，饵料的量为用药匙取一勺，放入烧杯中加水溶解，然后倒入盛虾苗的大整理箱内。时间分别固定在早晨8：00，中午12：00，下午18：00。

    1.3.4 实验步骤 实验容器为直径35 cm的盆，每个盆内用保鲜膜套好，放入勾兑好的海水5 L，实验虾苗规格普遍在0.8～1.2 cm，无节幼体在盆中适应6 h后选取健康的虾苗进行实验，实验前停止投饵。

    根据金春华所做实验[1]而设定pH值梯度，正式实验共设置8个pH值梯度。以0.5为间隔，pH梯度分别为6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10.0。在8个pH值梯度中各个环节设1组平行，水中的pH值用10%的盐酸溶液和10%的氢氧化钠溶液调节好，随即从运来虾苗的袋中依次选取50尾健康的虾苗放入勾兑好的海水中。

    实验采用静水观察法，实验期间不充气，温度为23 ℃。实验在10 L盆中进行，实验水体为5 L，实验用水为：经沉淀、消毒、曝气处理，用海水晶兑成千分之五的海水，海水比重为1.003（20 ℃），pH为8.53。观察并记录虾苗在不同的pH值水体中生存时间的长短及成活率的大小，采用静水式观察法得出一系列的数据并对实验相关一系列数据进行归纳总结。

    实验时间为48 h，分别在12 h记录一次，48 h记录一次。每个盆用若干保鲜膜套好，防止盆壁中以前做毒理实验残留下的有毒化学物质而导致实验误差，依次选取50尾体质健康、活跃度高的虾苗放入每个套好的保鲜膜盆中。观察并记录虾苗在不同阶段不同pH值范围活力及死亡数据。

    2 实验结果与分析

    2.1 死亡率的修正

    当对照组中实验虾苗出现偶尔死亡时，各pH值组的死亡率按下面公式加以修正。修正后得出相应数据记录。

    校正后的死亡百分数=（实验组死亡百分数—对照组死亡百分数）/（1—对照组死亡百分数）×100%。

    2.2 不同pH值对南美白对虾苗的影响

    当pH为 6.5时，放入水中的虾苗的应激性表现剧烈，应激性特别大，虾苗的弹跳能力超强，迅速弹跳，挣扎抽搐现象明显，围绕盆壁四周一个方向游动，在12 h出现死亡情况。通过观察，虾苗死亡之前虾身僵直，虾体通透，虾须来回迅速抖动。死亡后胃部通红。不同pH值12 h南美白对虾虾苗死亡情况见表1，pH值24 h南美白对虾虾苗死亡情况见表2，pH值48 h南美白对虾虾苗死亡情况见表3。

    根据上述实验结果，得出这样的结论，在南美白对虾苗中pH值控制在7.0到9.0范围内，放入水中的虾苗应激性较小，虾苗的存活率较高，为虾苗的适宜环境。在7.0以下以及9.0以上，虾苗的应激性非常大，挣扎抽搐剧烈弹跳现象明显，虾苗不适应此环境。虾苗在pH值8.0，8.5最适宜生存。

    3 讨论

    3.1 影响实验结果偏差因素及处理

    正式实验用到的盆都是被保鲜膜套好的塑料盆，之前做的预备试验中，两组平行实验未加任何化学试剂，观察后得出的结果具有很大差距。一个pH值8.5的盆中6 h后成活率100%，一个pH值8.5的盆中成活率为0%，通过对照两个盆，发现盆壁上贴有菊酯类有毒物质标签，所以采用保鲜膜套盆的方法减少实验数据的误差。铺膜后放入水中的虾苗应激性与不铺膜比较，应激性会小些，活跃度高，存活时间更长，实验数据更加准确。大整理箱曝气的长短也会影响到虾苗成活率高低，在实验前期用曝气装置连续两天充分曝气，减少虾苗因水质问题出现死亡。因为正式实验为48 h，连续性非常强，会受到天气等因素的影响，在实验中把加热棒调到固定值24 ℃，减少因温度的变化而引起虾苗活动力降低，减少实验结果的影响。在实验中用到的虾苗体质需健康，用网抄捞到的虾苗需活跃度非常强且体长普遍一致，保证实验动物的一致性，有助于实验数据的准确性。调节好水体的pH值，过一段时间，pH值会有所上升，酸性较高的pH值会普遍上升0.5，数值甚至会更大，温度的变化是一个因素，精准pH值测定仪使用也是一个因素，在实验进行中，每隔2 h，用pH值测定仪测量pH值一次，高了用盐酸溶液调低。保持pH值在一个固定值，观察并记录好实验数据。

    3.2 pH值对南美白对虾苗成活率的影响

    pH值6.5时，放入水中的虾苗应激性较大，虾苗入水弹跳力很强，在很短的时间内迅速从盆壁弹跳到盆的中间，12 h后死亡数达到14尾，48 h后死亡率为100%，虾苗在pH值6.5不能长时间存活；pH值7.0时，虾苗的应激性较小，入水后在盆壁及四周缓慢游动甚至很少弹跳，12 h后死亡尾数4尾，48 h后死亡率为13%，虾苗能适应pH值7.0的环境；pH值为7.5、8.0、8.5时，虾苗放入水中的应激性都比较小，与pH值7.0相似，死亡尾数大致相同，说明虾苗在pH值7.0～8.5范围，能长时间存活。pH值为9.0时，放入水中虾苗应激性较前边几组数值大，但虾苗能在2 h内适应pH值9.0的环境，12 h后死亡数达到14尾，48 h候死亡率为25%，虾苗也能适应这样的环境；当pH值为9.5时，放入水中的虾苗和pH值6.5时放入虾苗的情况很相似，应激性大，狂游，6 h后大部分虾苗抽搐，12 h后死亡尾数为33尾，48 h候死亡率为89.02%，虾苗不适宜在pH值9.5范围存活；pH值为10.0时，情况和pH值9.5相似但更为剧烈，48 h后的死亡率为100%。说明选取的最低值和最高值成功，整体实验数据准确。得出以下结论：pH值7.0～90范围内虾苗应激性较小，虾苗成活率较高；pH值低于7.0或高于9.0时，虾苗初期死亡率普遍高于pH值7.0～9.0，为虾的不适应范围值，在pH值8.0，8.5最适宜生存。pH值的高低会影响到虾苗的成长健康以及成活率大小等问题，研究pH值对南美白对虾苗成活率影响大小，为养殖南美白对虾提供良好的生长环境[2]，为南美白对虾养殖业提供了重要的科学依据[3]。

    参考文献：

    [1] 江锦波，金春华.pH值突变对南美白对虾仔虾淡化培育成活率的影响[J].齐鲁渔业，2005，（12）：29-30

    [2] 查广才.凡纳对虾淡化养殖虾池水体生态环境及调控研究[J].生态学，2004（6）：12-13

    [3] 杨军.南美白对虾单双造池塘养殖效益分析[J].内陆水产，2005（12）：22-24